一种天然产物Eupalinolide J的新用途制造技术

本发明专利技术公开了一种天然产物Eupalinolide J的新用途，天然产物Eupalinolide J可作为STAT3抑制剂，进一步地天然产物Eupalinolide J作为制备抗乳腺癌药物的原料。本发明专利技术首次公开了Eupalinolide J在三阴性乳腺癌细胞中对STAT3的抑制作用，证明该化合物为高效的STAT3抑制剂，为寻找新的三阴性乳腺癌靶向治疗及Eupalinolide J进入临床提供了理论依据。

New use of natural product Eupalinolide J

The present invention discloses a new use of natural products Eupalinolide J, Eupalinolide J natural products can be used as STAT3 inhibitors, further natural product Eupalinolide J as preparation of anti breast cancer drug raw materials. The present invention discloses the first inhibitory effect of Eupalinolide J on STAT3 in three negative breast cancer cells, that this compound is a potent inhibitor of STAT3, provides the theoretical basis for the three negative breast cancer targeting therapy and Eupalinolide J in clinical.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种天然产物的新用途，特别涉及一种天然产物EupalinolideJ的新用途。
技术介绍
乳腺癌是全球女性高发的一种恶性肿瘤，近年来发病率有明显升高趋势。三阴性乳腺癌(triple-negativebreastcancer,TNBC)是乳腺癌的一种特殊亚型，特指雌激素受体(estrogenreceptor,ER)、孕激素受体(progesteronereceptor,PR)和人表皮生长因子受体2(humanepidermalgrowthfactorreceptor2,HER2)均为阴性的乳腺癌，约占所有乳腺癌病理类型的12％～17％。众所周知，ER、PR、HER2是目前临床治疗乳腺癌的主要靶点，但由于TNBC患者缺少这些靶点，所以不能从内分泌治疗及分子靶向治疗中获益，因此，化学治疗依然是三阴性乳腺癌患者主要的治疗手段。由于TNBC患者预后差、复发转移率高、死亡率高，因此成为近几年乳腺癌研究和治疗关注的焦点。目前针对三阴性乳腺癌的治疗主要依靠手术、放化疗，其中化疗是三阴性乳腺癌综合治疗的主要手段，一般是通过干扰或抑制肿瘤细胞的生化代谢过程，进而影响肿瘤细胞的增殖来达到抗癌效果，如蒽环类和紫杉类药物。虽然，目前大部分三阴性乳腺癌患者的辅助化疗中都使用过这两类药物，但在晚期患者中再使用这些药物，其疗效值得怀疑。对于三阴性乳腺癌晚期使用蒽环类和紫杉类药物治疗失败的患者，会采用伊沙匹隆，由于伊沙匹隆与紫杉类有不同的微管结合位点，因此使用伊沙匹隆对紫杉类耐药者仍有活性。但是由于伊沙匹隆主要用于乳腺癌晚期的治疗，产量不足且价格昂贵，因此不能作为常用化疗药物。近年来，肿瘤分子靶向治疗开始兴起，其主要针对可能导致细胞癌变的环节，从分子水平来逆转这种恶性生物学行为，从而抑制肿瘤细胞生长，甚至使其完全消退的一种全新的生物治疗模式。分子靶向治疗作为近年研究三阴性乳腺癌的一个热点，其研究目的为了研发得到使患者提高生存期的新药物，当前三阴性乳腺癌的特征性分子靶点主要有聚腺苷二磷酸聚合酶、部分小分子热休克蛋白、蛋白激酶、表皮生长因子等。目前，在三阴性乳腺癌分子靶向治疗中，信号转导与转录活化因子(signaltransducerandactivatoroftranscription,STATs)蛋白的相关研究备受瞩目，STAT3蛋白是一种重要的核转录因子，参与调控细胞的生长、分化、增生、恶性转化及凋亡抑制，存在于许多肿瘤细胞系及人的癌变组织中。STAT3蛋白可以被众多的配基激活，包括EGF，PDGF和IL-6等，STAT3激活后扮演的重要角色是抑制细胞凋亡。STAT3信号在正常组织中呈极低的活化状态，在肿瘤组织中呈持续激活的状态，进而诱导靶基因的持续转录。有研究表明，在所有类型的乳腺癌细胞中，激活的STAT3绝大多数在TNBC细胞中表达。有趣的是，80％的TNBC细胞表达活化状态的STAT3。STAT3信号传导途径的这一特点为针对三阴性乳腺癌细胞而不影响正常细胞的治疗策略提供了一个可靠的切入点。目前，针对STAT3途径的分子治疗研究已取得很大的进展，靶向抑制STAT3蛋白的活性必将抑制三阴性乳腺癌细胞增殖和诱导凋亡，抑制肿瘤血管生成，从而达到提高治疗三阴性乳腺癌的目的。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种天然产物EupalinolideJ的新用途，首先天然产物EupalinolideJ可作为STAT3抑制剂，进一步地天然产物EupalinolideJ作为制备抗乳腺癌药物的原料。本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案是：一种天然产物EupalinolideJ的新用途，天然产物EupalinolideJ作为STAT3抑制剂的用途。一种天然产物EupalinolideJ的新用途，天然产物EupalinolideJ作为制备抗乳腺癌药物的应用。目前对癌症的治疗主要通过手术、放化疗及近年来新兴起的分子靶向治疗。但是手术和放疗手段对癌症患者会造成生活质量下降，免疫力低下，且对中晚期恶性肿瘤患者往往因局部不彻底、残留病灶的复发及远端转移而死亡。长时间的化疗会产生耐药性，使药物的治疗力下降。分子靶向治疗主要针对已经明确的致癌分子来设计治疗药物，使肿瘤细胞特异性死亡，而不会涉及肿瘤周围的正常组织细胞。因此，寻找具有特异性治疗靶点的抗乳腺癌药物仍旧是当务之急。本专利技术的天然产物EupalinolideJ来源于中药野马追，中草药作为我国传统医药瑰宝，在治疗癌症方面能抑制肿瘤生长；减轻放、化疗的毒副作用；抗复发转移；改善乳腺癌患者的生存质量；调节免疫功能等成效显著。申请人经大量研究发现EupalinolideJ在体外可显著抑制三阴性乳腺癌细胞株的增殖，诱导三阴性乳腺癌细胞凋亡，阻滞细胞周期，并且能明显抑制STAT3的表达。本专利技术的具体研究结果阐述如下：首先，利用pSTAT3-TA-Luc质粒，瞬时转染HEK293T细胞，建立了STAT3荧光素酶报告基因，检测EupalinolideJ是否能抑制STAT3转录活性；并检测其能否抑制三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞中STAT3蛋白的表达。研究表明EupalinolideJ能显著抑制STAT3转录活性，抑制率为53.9±7.2％，并且能下调STAT3的蛋白表达，抑制其磷酸化，且具有时间、剂量依赖性。其次，通过EupalinolideJ对MDA-MB-231、MDA-MB-468三阴性乳腺癌细胞株生长抑制作用的研究。发现EupalinolideJ对三阴性乳腺癌MDA-MB-231、MDA-MB-468细胞均存在明显的生长抑制作用。最后，研究EupalinolideJ对三阴性乳腺癌细胞凋亡的影响。经流式分析，发现EupalinolideJ能明显诱导三阴性乳腺癌细胞凋亡。作为优选，所述天然产物EupalinolideJ的化学结构式为：作为优选，所述乳腺癌为三阴性乳腺癌。作为优选，天然产物EupalinolideJ在体外显著抑制三阴性乳腺癌细胞株的增殖，诱导三阴性乳腺癌细胞凋亡，阻滞细胞周期，并且能明显抑制STAT3蛋白的表达。作为优选，所述三阴性乳腺癌细胞株为MDA-MB-231、MDA-MB-468。本专利技术的有益效果是：本专利技术首次公开了EupalinolideJ在三阴性乳腺癌细胞中对STAT3的抑制作用，证明该化合物为高效的STAT3抑制剂，为寻找新的三阴性乳腺癌靶向治疗及EupalinolideJ进入临床提供了理论依据。附图说明图1：为荧光素酶报告基因检测EupalinolideJ作用于已转染pSTAT3-TA-Luc质粒的HEK293T细胞后，STAT3的相对表达量。图2：为WesternBolt法检测EupalinolideJ对MDA-MB-468细胞中STAT3和p-STAT3蛋白表达情况的影响。图3：为MTT法检测EupalinolideJ对MDA-MB-231、MDA-MB-468细胞株的生长抑制作用。图4：采用AnnexinV-FITC/7AAD法用流式细胞仪检测EupalinolideJ诱导MDA-MB-231、MDA-MB-468细胞株凋亡的情况。具体实施方式下面通过具体实施例，对本专利技术的技术方案作进一步的具体说明。本专利技术中，若非特指，所采用的原料和设备等均可从市场购得或是本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种天然产物Eupalinolide J的新用途，其特征在于，天然产物Eupalinolide J作为STAT3抑制剂的用途。

【技术特征摘要】
1.一种天然产物EupalinolideJ的新用途，其特征在于，天然产物EupalinolideJ作为STAT3抑制剂的用途。2.一种天然产物EupalinolideJ的新用途，其特征在于，天然产物EupalinolideJ作为制备抗乳腺癌药物的应用。3.根据权利要求1或2所述的一种天然产物EupalinolideJ的新用途，其特征在于，所述天然产物EupalinolideJ的化学结构式为：4.根据权利要求2所述的一种天然产物Eupalin...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵华军，杨波，赵亚萍，朱瑞，楼成华，
申请(专利权)人：浙江中医药大学，
类型：发明
国别省市：浙江;33