细胞凋亡诱导剂制造技术

本发明专利技术的目的在于提供用于在细胞中有效地诱导细胞凋亡和/或增殖抑制的组合物及使用该组合物的方法。本发明专利技术涉及用于诱导细胞凋亡的药剂、含有该药剂的医药组合物、使用了该药剂的伴随着细胞凋亡的异常的疾病的处置方法等，所述药剂含有抑制GST‑π的药物和抑制RB1CC1的药物作为活性成分。

Apoptosis inducing agent

The object of the present invention is to provide a composition for inducing apoptosis and / or proliferation inhibition in a cell and a method of using the same. The present invention relates to a medicament, inducing apoptosis, pharmaceutical compositions containing the medicament using the medicament with cell apoptosis disorder treatment method, the drug medicament containing drugs inhibit GST PI and RB1CC1 inhibitor as active ingredient.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及新型的细胞凋亡诱导剂、细胞增殖抑制剂、自噬抑制剂、含有该细胞凋亡诱导剂、细胞增殖抑制剂或自噬抑制剂的医药组合物、以及伴随着细胞凋亡、细胞增殖或自噬的异常的疾病的新型治疗方法等。
技术介绍
癌是人类所面对的最重要且最难对付的疾病之一，为了对其进行治疗进行了大量的研究努力。癌是由于基因的突变或表基因的异常等而使细胞失去控制地进行增殖的疾病。关于癌的基因异常已有很多报告(例如非专利文献1等)，其中很多被认为和与细胞的增殖、分化、生存相关的信号传递有某些关联。另外，由于这样的基因异常，由正常分子构成的细胞内的信号传递发生异常，由此导致特定的信号级联的活化或灭活，最终有时会成为引起细胞异常增殖的一个因素。初期的癌治疗主要着眼于对细胞增殖本身的抑制，但由于该治疗也抑制生理性地正常增殖的细胞的增殖，因此会伴随着脱发、消化系统疾病、骨髄抑制等副作用。因此，为了抑制所述副作用，基于以癌特有的基因异常或信号传递异常为靶的分子靶向药等的新想法的癌治疗药的开发不断进展。作为癌特有的基因异常，已熟知KRAS(V-Ki-ras2Kirstenratsarcomaviraloncogenehomolog，V-Ki-ras2Kirsten大鼠肉瘤病毒致癌基因同源物)的异常。KRAS是位于EGFR(Epidermalgrowthfactorreceptor，表皮生长因子受体)、PDGFR(Platelet-derivedgrowthfactorreceptor，血小板衍生生长因子受体)等酪氨酸激酶型受体的下游的低分子量GTP结合蛋白(也称为低分子量G蛋白)，其担负着将来自这些受体的与增殖、分化相关的信号向下游的MAPK(Mitogen-activatedproteinkinase，丝裂原活化蛋白激酶)级联传递的作用。正常的KRAS通过配体的结合在被活化的受体的酪氨酸激酶活性作用下介由Grb2(Growthfactorreceptor-boundprotein2，生长因子受体结合蛋白2)及SOS(Sonofsevenless，鸟苷酸交换因子)而被活化，将Raf(Rapidlyacceleratedfibrosarcoma，迅速加速纤维肉瘤)等的MAPK磷酸化而驱动MAPK级联，但突变型KRAS即使没有来自受体的刺激也恒定性地活化，持续传递增殖信号。考虑因此而发生异常的细胞增殖。作为催化谷胱甘肽结合的酶之一的谷胱甘肽-S-转移酶(GST)、特别是GST-π(glutathioneS-transferasepi，谷胱甘肽-S-转移酶π，也称为GSTP1)的表达在各种癌细胞中增加，表明其可能是对部分抗癌剂产生抗性的一个原因。实际上已知，当使针对GST-π的反义DNA或GST-π抑制剂作用于过量表达GST-π并显示药物抗性的癌细胞系时，药剂抗性得到抑制(非专利文献2～4)。此外，最近的报告中报告了，当使针对GST-π的siRNA作用于过量表达GST-π的雄激素非依赖性前列腺癌细胞系时，其增殖得到抑制、细胞凋亡增加(非专利文献5)。另外还报告了，当使针对GST-π的siRNA作用于KRAS存在突变的癌细胞系时，Akt的活化得到抑制且自噬增加，但细胞凋亡的诱导为中等程度(非专利文献6)，专利文献1中记载了一种凋亡诱导剂等，其含有抑制GST-π的药物和抑制自噬的药物作为活性成分。但是，关于GST-π与细胞增殖或细胞凋亡之间的关系、GST-π的分子机理、GST-π在各种细胞内信号传递中的作用等还几乎未弄清楚。细胞内的信号传递极其复杂，不仅常有1种分子影响多种分子的作用、或相反1种分子受到多种分子的影响的情况，而且常有即使抑制了某种分子的作用，其它的信号级联也活化，从而无法获得期望效果的情况。因此，为了开发更为优异的分子靶向药，需要弄清楚复杂地交织在一起的细胞的信号传递机理，但是尽管经过了多年研究也不过弄清楚了其中的极小一部分，因此还需要进一步的研究努力。现有技术文献专利文献专利文献1：国际公开第2012/176282号非专利文献非专利文献1：Futrealetal.，NatRevCancer.2004；4(3)：177-83非专利文献2：TakahashiandNiitsu，GanToKagakuRyoho.1994；21(7)：945-51非专利文献3：Banetal.，CancerRes.1996；56(15)：3577-82非专利文献4：Nakajimaetal.，JPharmacolExpTher.2003；306(3)：861-9非专利文献5：Hokaiwadoetal.，Carcinogenesis.2008；29(6)：1134-8非专利文献6：Nishitaetal.，AACR102ndAnnualMeeting，AbstractNo.1065
技术实现思路
专利技术所要解决的课题本专利技术的目的在于提供用于在细胞中有效地诱导细胞凋亡和/或增殖抑制的组合物及使用该组合物的方法。用于解决课题的方法本专利技术者们为了弄清楚GST-π的分子机理不断地进行刻苦研究，结果发现了当同时抑制细胞中GST-π的表达和RC1CC1(RB1-induciblecoiled-coilprotein1，RB1-诱导卷曲蛋白1)的表达时，与仅抑制两者中的任一者的表达时相比，细胞增殖被进一步强力抑制，并且进一步发现了通过同时抑制RB1CC1的表达，由GST-π的表达抑制诱导的自噬显著地得到抑制、细胞凋亡得到强力诱导，从而完成了本专利技术。即本专利技术涉及以下内容。(1)一种用于诱导细胞凋亡的药剂，其含有抑制GST-π的药物和抑制RB1CC1的药物作为活性成分。(2)一种用于抑制细胞增殖的药剂，其含有抑制GST-π的药物和抑制RB1CC1的药物作为活性成分。(3)一种用于在GST-π得到抑制的细胞中抑制自噬的药剂，其含有抑制RB1CC1的药物作为活性成分。(4)一种用于增强由抑制GST-π的药物引起的细胞凋亡的诱导和/或细胞增殖的抑制的药剂，其含有抑制RB1CC1的药物作为活性成分。(5)根据(1)～(4)中任一项所述的药剂，其中，活性成分选自由RNAi分子、核酶、反义核酸、DNA/RNA嵌合多核苷酸及表达它们的载体组成的组。(6)一种医药组合物，其含有(1)～(5)中任一项所述的药剂。(7)根据(6)所述的医药组合物，其为细胞的异常增殖引起的疾病的治疗用。(8)根据(6)所述的医药组合物，其为癌治疗用。专利技术效果由于本专利技术的细胞凋亡诱导剂与以往的药剂相比能够更有效地诱导细胞凋亡、抑制细胞增殖，因此作为医药组合物是极其有用的。特别是在癌的治疗中，由于能够通过细胞凋亡杀死癌细胞，因此不仅可期待阻止癌发展的效果，而且可期待使癌退缩的效果。附图说明图1为表示各种癌细胞中的GST-π和/或RB1CC1的敲减产生的细胞增殖抑制效果的图。图2为表示MDA-MB-231细胞中的GST-π和/或RB1CC1的敲减产生的细胞增殖抑制效果的图。图3为表示M7609细胞中的GST-π或GST-π+RB1CC1的敲减产生的细胞增殖抑制效果的图。图4为表示MIAPaCa-2细胞中由GST-π的敲减产生的自噬得到诱导的图。图5为表示将用对照siRNA处理过的MIAPaCa-2细胞用本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于诱导细胞凋亡的药剂，其含有抑制GST‑π的药物和抑制RB1CC1的药物作为活性成分。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.06.17 JP 2014-1247821.一种用于诱导细胞凋亡的药剂，其含有抑制GST-π的药物和抑制RB1CC1的药物作为活性成分。2.一种用于抑制细胞增殖的药剂，其含有抑制GST-π的药物和抑制RB1CC1的药物作为活性成分。3.一种用于在GST-π得到抑制的细胞中抑制自噬的药剂，其含有抑制RB1CC1的药物作为活性成分。4.一种用于增强由抑制GST-π的...

【专利技术属性】
技术研发人员：新津洋司郎，田中洋行，
申请(专利权)人：日东电工株式会社，
类型：发明
国别省市：日本;JP