一种烟草及烟草制品中马来酰肼残留量的检测方法技术

本发明专利技术公开了一种烟草及烟草制品中马来酰肼残留量的检测方法，包括：步骤1，对烟草样品进行前处理，得到待检测样品；步骤2，以氘代马来酰肼水溶液为内标溶液，利用液相色谱串联质谱仪对待检测样品进行测量，依据标准曲线和测量结果，计算得到待检测样品中的马来酰肼残留量。内标溶液中氘代马来酰肼的浓度为100μg/mL。本发明专利技术提供的烟草及烟草制品中马来酰肼残留量的检测方法，能快速、准确检测出烟草及烟草制品中的马来酰肼农药残留，且测定结果准确、重复性好。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及痕量分析
，具体涉及一种烟草及烟草制品中马来酰肼残留量的检测方法。
技术介绍
马来酰肼农药作为一种植物生长调节剂，经植物吸收后可以通过抑制细胞分裂而抑制植物生长。在烟草生产过程中马来酰肼农药一般用来作为烟草抑芽剂使用，因此导致部分马来酰肼在烟草内部出现积累和残留。国际烟草科学研究合作中心(CORESTA)于2003年12月提出了烟草中99种农药的指导性残留限量(GRLs，GuidanceResidueLevels)，并于2008年和2013年进行了两次增补和修订，最新版本中对马来酰肼农药的残留限量值为80mg/kg。现有技术中，对烟草中马来酰肼农药残留分析的检测方法主要有分光光度法、胶束液相色谱法、气相色谱法和液相色谱法等。授权公告号为CN101876649B的专利技术专利文献公开了一种烟草或烟草制品中马来酰肼残留量的测定方法，其主要步骤为：对样品采用盐酸溶液加热回流萃取，用C18固相萃取小柱净化，再采用氢氧化钠溶液洗脱得到样品溶液，然后利用高效液相色谱采用外标法测定样品中马来酰肼的残留量。现有的行业标准YC/T405.5-2011采用液相色谱法进行分析，前处理操作较为繁琐，包括盐酸溶液回流萃取，过滤之后定容，固相萃取后定容等，而且紫外检测器对马来酰肼的灵敏度并不高，所以导致低浓度的目标物检测偏差较大。
技术实现思路
本专利技术提供了一种烟草及烟草制品中马来酰肼残留量的检测方法，能快速、准确检测出烟草及烟草制品中的马来酰肼农药残留，且测定结果准确、重复性好。一种烟草及烟草制品中马来酰肼残留量的检测方法，包括：步骤1，对烟草样品进行前处理，得到待检测样品；步骤2，以氘代马来酰肼水溶液为内标溶液，利用液相色谱串联质谱仪对待检测样品进行测量，依据标准曲线和测量结果，计算得到待检测样品中的马来酰肼残留量。所述的烟草样品包括烟草以及含有烟草的烟草制品。本专利技术中，利用液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)仪测量烟草及烟草制品中的马来酰肼残留量，前处理步骤简单，检测结果准确。作为优选，前处理包括以下步骤：将烟草样品、内标溶液、盐酸溶液混合均匀，加热回流1～2h，冷却至室温后，过0.45μm水相滤膜得到待检测样品。作为优选，内标溶液中氘代马来酰肼的浓度为100μg/mL。作为优选，盐酸溶液的浓度为2mol/L，每克烟草样品中加入0.1～0.2mL内标溶液和30～50mL盐酸溶液。进一步优选，盐酸溶液的浓度为2mol/L，每克烟草样品中加入0.1mL内标溶液和40mL盐酸溶液。作为优选，利用液相色谱串联质谱仪对待检测样品进行测量时的工作参数如下：液相色谱条件：柱温：30℃；流动相：A相：质量分数为0.1％甲酸水(甲酸为溶质，水为溶剂)，B相：质量分数为0.1％甲酸甲醇(甲酸为溶质，甲醇为溶剂)；流动相梯度为：0min～8min，95％A；8～15min，70％A；15～15.1min，70％A；15.1～20min，10％A；20～20.1min，10％A；20.1～30min，95％A；30min，95％A；流速为0.3mL/min；进样量：5μL；质谱条件：正离子电喷雾电离模式；电喷雾电压4000V；离子源温度400℃；雾化气压力50psi；扫描方式为多反应监测。为了保证标准曲线具有良好的线性，并能够涵盖通常所需的测量范围，优选地，制作标准曲线的系列标准工作溶液的浓度依次为：20ng/mL、50ng/mL、100ng/mL、200ng/mL、500ng/mL、1000ng/mL。制作标准曲线时，每个标准工作溶液中加入0.1mL内标溶液。与现有技术相比，本专利技术提供的烟草及烟草制品中马来酰肼残留量的检测方法具有以下优点：(1)采用LC-MS/MS进行检测，简化了现有技术中的样品前处理方法，并能提供更准确更稳定的测定结果。(2)本专利技术方法样品前处理过程中，延续了盐酸加热回流萃取的提取方法，保证提取过程的有效性，同时省去了盐酸溶液过滤定容以及固相萃取等步骤，可节省操作时间。(3)本专利技术方法采用了高灵敏度和强抗干扰能力的LC-MS/MS进行检测，具有操作准确、灵敏度高及重复性好的优点。(4)本专利技术方法采用了氘代马来酰肼做内标进行定量，可减小基质效应对质谱测定的影响，而且可消除体积变化的影响。具体实施方式结合以下实施例对本专利技术做进一步描述，但并不是限制本专利技术。实施例1仪器与试剂农药：马来酰肼，内标：d2-马来酰肼(氘代马来酰肼)，均为标准品；甲醇为色谱纯试剂；纯水，符合GB/T6682中一级水的要求；盐酸溶液(杭州双林化工试剂厂)，配制成2mol/L备用。美国ABQTRAP5500液相色谱-三重四极杆串联质谱仪(LC-MS/MS)；瑞士MettlerToledoXP205电子天平(感量：0.0001g)；电加热套(型号SD-2000-6，北京圣达共创科技公司)。一种烟草及烟草制品中马来酰肼残留量的检测方法，包括以下步骤：(1)配制内标溶液配制氘代马来酰肼浓度为100μg/mL的水溶液作为内标溶液。(2)样品制备称取1.0g烟草样品于250mL圆底烧瓶中，然后向该圆底烧瓶中加入0.1mL内标溶液和40mL盐酸溶液(浓度为2M)，将圆底烧瓶放入电加热套中，装上球形冷凝管，连续加热回流1h。回流完毕后冷却至室温，取上层清液0.4mL用水稀释至1mL，过0.45μm水相滤膜后得试样萃取液，作为待检测样品。(3)准备标准工作溶液称取0.010g(精确至0.1mg)马来酰肼农药标准品，置于100mL容量瓶中，用水溶解并定容得到100μg/mL的标准储备液。分别准确移取0.02mL、0.05mL、0.1mL、0.2mL、0.5mL和1mL的标准储备液，置于100mL容量瓶中，每个容量瓶中准确加入100μL内标溶液，用水定容至刻度，即得系列标准工作溶液。配制的系列标准工作溶液的浓度为：20ng/mL、50ng/mL、100ng/mL、200ng/mL、500ng/mL、1000ng/mL。(4)工作曲线的制作吸取配制好的不同浓度的标准工作溶液，过0.45μm水相滤膜后，进行液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)测试。在进行LC-MS/MS测定时，采用的色谱条件为：色谱柱：Hypercarb液相色谱分析柱(5μm，100mm×2.1mmi.d.)；柱温：30℃；流动相：质量分数0.本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种烟草及烟草制品中马来酰肼残留量的检测方法，其特征在于，包括：步骤1，对烟草样品进行前处理，得到待检测样品；步骤2，以氘代马来酰肼水溶液为内标溶液，利用液相色谱串联质谱仪对待检测样品进行测量，依据标准曲线和测量结果，计算得到待检测样品中的马来酰肼残留量。

【技术特征摘要】
1.一种烟草及烟草制品中马来酰肼残留量的检测方法，其特征在于，包括：
步骤1，对烟草样品进行前处理，得到待检测样品；
步骤2，以氘代马来酰肼水溶液为内标溶液，利用液相色谱串联质谱仪对待检测样品进
行测量，依据标准曲线和测量结果，计算得到待检测样品中的马来酰肼残留量。
2.如权利要求1所述的烟草及烟草制品中马来酰肼残留量的检测方法，其特征在于，内
标溶液中氘代马来酰肼的浓度为100μg/mL。
3.如权利要求2所述的烟草及烟草制品中马来酰肼残留量的检测方法，其特征在于，前
处理包括以下步骤：
将烟草样品、内标溶液、盐酸溶液混合均匀，加热回流1～2h，冷却至室温后，过0.45μm
水相滤膜得到待检测样品。
4.如权利要求3所述的烟草及烟草制品中马来酰肼残留量的检测方法，其特征在于，盐
酸溶液的浓度为2mol/L，每克烟草样品中加入0.1～0.2mL内标溶液和30～50mL盐酸溶液。
5.如权利要求4所述的烟草及烟草制品中马...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈晓水，陆明华，蒋佳磊，汤晓东，苏燕，林垦，潘凡达，李淑彪，斯文，王雨凝，朱书秀，
申请(专利权)人：浙江中烟工业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33