一种蔬菜和水果中硅噻菌胺残留量的测定方法技术

本发明专利技术公开了一种蔬菜和水果中硅噻菌胺残留量的测定方法，用乙腈或含1%乙酸的乙腈溶液均质提取样品中残留的硅噻菌胺，提取液经乙二胺‑N‑丙基硅烷（PSA）和十八烷基硅烷键合相（C18）基质分散净化后，气相色谱串联质谱（GC‑MS/MS）检测，采用不含待测农药的空白基质溶液建立校正的标准工作曲线，外标法定量。本方法平均回收率为83.0%～90.8%，平均相对标准偏差（RSD）为5.1%～7.5%，检出限低于0.013 μg/kg，具有操作简便、快速、灵敏度高、重复性好、定性定量准确的优点。能满足美国、欧盟、日本等国家对相应产品安全检测的技术要求，为保障我国人民食品安全及对外出口贸易健康发展提供有力的技术支撑。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种蔬菜和水果中硅噻菌胺残留量的测定方法，更具体地说是采用气相色谱串联质谱(GC-MS/MS)定性定量测定蔬菜和水果中残留的硅噻菌胺含量的方法，属于农药残留量的测定

技术介绍
硅噻菌胺(通用名：Silthiofam，试验代号：Mon65500，商品名称：Latitude，其他名称：Silthiopham)，是由孟山都公司开发的酰胺类杀菌剂。主要用作种子处理，防治谷物上的全蚀病。化学名称：N-烯丙基-4,5-二甲基-2-(三甲基硅基)噻吩-3-甲酰胺，英文名称：N-allyl-4,5-dimethyl-2-(trimethylsilyl)thiophene-3-carboxamide，CAS登录号：175217-20-6，化学结构式为：外观为白色晶状粉末；熔点：86.1～88.3℃；沸点＞280℃；蒸汽压8.1×101mPa(20℃)分配系数：KowlogP＝3.72(20℃)；Henry常数5.4×10-1Pam3mol-1；溶解度：水39.9mg/L(20℃),正己烷15.5g/L(20℃)，对二甲苯、1,2-二氯乙烷、甲醇、丙酮、乙酸乙酯均＞250g/L(20℃)；稳定性：DT5061d(pH5)，448d(pH7)，314d(pH9)(25℃)。硅噻菌胺是由孟山都公司1993-94年发现、并于1998年在英国布赖顿植保会议上介绍的新颖杀菌剂，可能是ATP抑制剂，抑制能量(ATP)从线粒体向细胞溶质的传递。具有良好的保护活性，残效期长。持效期长，用作种子处理剂。1994年，硅噻菌胺在欧盟进入田间试验阶段，1999年在爱尔兰首先获准登记，继而在欧盟其他国家、中国、南非等取得进一步的登记。2004年1月1日，硅噻菌胺列入欧盟农药登记指令(91/414)附录1，其登记资料因此获得了这一天起算的10年期的保护权。硅噻菌胺的主要适用作物有：大麦、黑小麦和小麦等。其主要市场包括：比利时、智利、中国、捷克共和国、丹麦、法国、德国、爱尔兰、波兰、南非、瑞典和英国等，具有很广阔的应用前景。随着硅噻菌胺的登记、推广和使用，作为我国主要出口市场的欧盟等国家制定了其在蔬菜、水果、粮谷和畜产品等食品农产品中的最大允许残留量(MRL)，MRL允许值很严格，MRL范围为：0.01～0.05mg/kg，欧盟、日本等国家规定若田间使用农药没有在该国家登记，没有制定相应的残留限量标准时，出口至其国家的食品农产品包括畜禽肉等动物源性食品中残留限量均实行0.01mg/L的“一律标准”。现阶段，对硅噻菌胺残留量测定方法的研究较少，报道的检测方法主要为蔬菜和水果中硅噻菌胺残留检测方法，这些检测方法均采用液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)测定蔬菜和水果中硅噻菌胺残留量的检测方法，使用LC-MS/MS测定食品农产品中农药残留具有快速、简便、灵敏度高等优点，但由于其价格较昂贵，很多检测机构、企业或科研院所未配置该仪器或配置台数较少，由于不同的化合物采用LC-MS/MS检测时，需使用不同的流动相或色谱柱，这样需要不断更换色谱柱、流动相并耗费比较长的时间对系统进行平衡，这一定程度上制约了LC-MS/MS的应用。使用气相色谱串联质谱(GC-MS/MS)分析食品农产品中农药残留具有快速、简便、灵敏度高、选择性强等优点，可实现几百种农药的多残留分析，但迄今为止未见食品农产品中硅噻菌胺残留量的GC-MS/MS检测方法的报道，因此建立简便、快速、准确、耐用、能准确定性和定量分析蔬菜和水果中氟醚菌酰胺残留量的GC-MS/MS检测方法具有重要意义。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种蔬菜和水果中硅噻菌胺残留量的测定方法。为实现以上目的，本专利技术所采用的技术方案是：一种蔬菜和水果中硅噻菌胺残留量的测定方法，包括如下步骤：(1)提取称取样品于具塞离心管中，加入乙腈或含1％乙酸的乙腈溶液均质提取1min，加入氯化钠或乙酸钠中的一种和无水硫酸镁，振荡后离心。(2)净化移取样品提取液上清液于离心管中，加入基质分散固相萃取剂，涡旋振荡，离心，吸取一定量净化液氮气吹干后，用体积比为1/1的丙酮/正己烷混合溶剂溶解定容，过膜后，待气相色谱串联质谱(GC-MS/MS)检测。(3)标准工作溶液的配制将不含硅噻菌胺的同种类基质空白样品按上述步骤(1)、(2)处理时，得样品提取净化残渣，加入适量溶剂和标准溶液，涡旋混匀，配制成至少3个浓度的硅噻菌胺系列混合标准工作液。(4)气相色谱串联质谱法(GC-MS/MS)测定将步骤(3)中的各浓度梯度的标准工作液进行GC-MS/MS测定，以标准工作液的色谱峰面积对其相应浓度进行回归分析，得到标准工作曲线；在相同条件下将步骤(2)中净化后的样品液注入GC-MS/MS进行测定，测得样品液中硅噻菌胺的色谱峰面积，代入标准工作曲线，得到样品液中硅噻菌胺含量，然后根据样品液所代表试样的质量计算得到样品中硅噻菌胺残留量；若上机溶液中硅噻菌胺残留量超过线性范围上限，需用定容溶剂将上机溶液浓度稀释至线性范围之内。步骤(1)中样品若为脱水蔬菜和水果，需降低称样量，并加适量水充分浸润。步骤(1)中采用乙腈提取时加入氯化钠盐析，采用含1％乙酸的乙腈溶液提取时加入乙酸钠盐析；含水量较少的样品盐析时需加入一定量的水。步骤(2)中基质分散固相萃取剂由无水硫酸镁、C18和PSA组成，每毫升提取液中无水硫酸镁、C18和PSA加入量分别为150mg、50mg和25mg。步骤(4)中气相色谱条件为：色谱柱：HP-5MS毛细管色谱柱，柱长30m，内径0.25mm，膜厚0.25μm；进样口温度250℃；载气：He，不分流模式进样，进样量：1μL；恒流模式，流速1.2mL/min；升温程序：初温60℃保持2min，以每分钟20℃的速度升至200℃，然后以每分钟2℃的速度升至220℃，再以每分钟20℃的速度升至280℃，保持10min；传输线温度：290℃。步骤(4)中质谱条件为：电离模式：电子轰击电离(EI，70eV)；离子源温度280℃；碰撞气：氩气；多反应监测扫描方式MRM，监测参数为：步骤(4)中测定样液和基质标准工作溶液时，若样液中农药色谱峰保留时间与标准溶液中相应农药保留时间相一致，并且在扣除背景后的样品质谱图中，所选择的离子均出现，而且离子丰度比与标准溶液的离子丰度比相一致，则可判断样液中存在这种农药；若上述两个条件不能同时满足，则判断不含该种农药。本专利技术的有益效果在于：本专利技术利用分散固相萃取技术，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种蔬菜和水果中硅噻菌胺残留量的测定方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)提取称取蔬菜和水果样品于具塞离心管中，加入乙腈或含1％乙酸的乙腈溶液均质提取1min，加入氯化钠或乙酸钠中的一种和无水硫酸镁振荡后离心；(2)净化移取样品提取液于离心管中，加入基质分散固相萃取剂，涡旋振荡，离心，取一定量净化液氮气吹干后，用体积比为1/1的丙酮/正己烷混合溶剂溶解定容，过膜后，待气相色谱串联质谱(GC‑MS/MS)检测；(3)标准工作溶液的配制将不含硅噻菌胺的同种类基质空白样品按上述步骤(1)、(2)处理，得样品提取净化残渣，加入适量溶剂和标准溶液，涡旋混匀，配制成至少3个浓度的硅噻菌胺系列混合标准工作液；(4)测定和结果计算将步骤(3)中的各浓度梯度的标准工作液进行GC‑MS/MS测定，以标准工作液的色谱峰面积对其相应浓度进行回归分析，得到基质标准工作曲线；在相同条件下将步骤(2)中净化后的样品液注入GC‑MS/MS进行测定，测得样品液中硅噻菌胺的色谱峰面积，代入基质标准工作曲线，得到样品液中硅噻菌胺含量，然后根据样品液所代表试样的质量计算得到样品中硅噻菌胺残留量；若上机溶液中硅噻菌胺残留量超过线性范围上限，需用定容溶剂将上机溶液浓度稀释至线性范围之内。...

【技术特征摘要】
1.一种蔬菜和水果中硅噻菌胺残留量的测定方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
(1)提取
称取蔬菜和水果样品于具塞离心管中，加入乙腈或含1％乙酸的乙腈溶液均质提取1min，
加入氯化钠或乙酸钠中的一种和无水硫酸镁振荡后离心；
(2)净化
移取样品提取液于离心管中，加入基质分散固相萃取剂，涡旋振荡，离心，取一定量净
化液氮气吹干后，用体积比为1/1的丙酮/正己烷混合溶剂溶解定容，过膜后，待气相色谱串联
质谱(GC-MS/MS)检测；
(3)标准工作溶液的配制
将不含硅噻菌胺的同种类基质空白样品按上述步骤(1)、(2)处理，得样品提取净化
残渣，加入适量溶剂和标准溶液，涡旋混匀，配制成至少3个浓度的硅噻菌胺系列混合标准工
作液；
(4)测定和结果计算
将步骤(3)中的各浓度梯度的标准工作液进行GC-MS/MS测定，以标准工作液的色谱峰
面积对其相应浓度进行回归分析，得到基质标准工作曲线；在相同条件下将步骤(2)中净化
后的样品液注入GC-MS/MS进行测定，测得样品液中硅噻菌胺的色谱峰面积，代入基质标准
工作曲线，得到样品液中硅噻菌胺含量，然后根据样品液所代表试样的质量计算得到样品中
硅噻菌胺残留量；若上机溶液中硅噻菌胺残留量超过线性范围上限，需用定容溶剂将上机溶
液浓度稀释至线性范围之内。
2.根据权利要求1...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭庆龙，
申请(专利权)人：郭庆龙，
类型：发明
国别省市：山东;37