一种筛选药物或评价药物有效性的方法技术

本发明专利技术公开了一种筛选药物或评价药物有效性的方法，包括步骤：1)征集患有病症的试验对象，以及用于对症治疗的候选药物；2)用药前，采集试验对象的检测样本，检测试验对象的线粒体功能指标；3)将候选药物对试验对象进行对症用药；4)用药后，采集试验对象的检测样本，测定待检样本中线粒体功能指标；5)分析用药前后线粒体功能指标变化，筛选出针对病症的有效药物，或评价候选药物的有效性。本发明专利技术能够有效地对寒证、热证、虚证和实证具有不同疗效的候选药物加以区分和筛选，或评价候选药物对症治疗寒证、热证、虚证和实证的有效性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及中医药领域，具体地，涉及一种筛选药物或评价药物有效性的方法。
技术介绍
辨证论治是中医学术的核心和特色，其中八纲辨证是中医诊断疾病的总纲，在辨证中处于极其重要的地位，疾病的诊断分析都离不开阴阳、表里、寒热、虚实这八纲。热证，也称热病，是中医常指发热、口渴、舌红、便秘、烦躁不安、脉搏快等综合症状。热证的病因有远因与近因两种。远因是无明产生了嗔恚而致病，近因是患者的胆汁过量而致病。病缘是时令、鬼魅、饮食、起居等外缘致病，具体分析可从体质因素、患病时间、病因、总病部位、发病系统、疾病的阶段等区分。从体质因素来讲，人身则有少年、青壮年、老年之分；从时间来讲分新旧两种；病因又依人体的“龙”、“赤巴”、“培根”、血液、“黄水”热而分为五种；部位则有外部、内部、中层、肌肉、皮肤、脉道、骨骼、五脏六腑之分；患病系统分本系和旁系两类，单一型证象清晰者，是本系，合并症和综合症为旁系；疾病的阶段又分内成型期、扩散期、虚热期、伏热期、陈旧期等。从种类分析又分炎症、失调、疫疠、毒症等。实证，中医通常指发病时高烧、无汗、大便不通、胸腹胀满等症状。实证的形成，或是由病人体质素壮，因外邪侵袭而暴病，或是因脏腑气血机能障碍引起体内的某些病理产物，如气滞血瘀、痰饮水湿凝聚、虫积、食滞等。临床表现由于病邪的性质及其侵犯的脏腑不同而呈现不同证候，其特点是邪气盛，正气衰，正邪相争处于激烈阶段。常见症状为高热，面红，烦躁，谵妄，声高气粗，腹胀满疼痛而拒按，痰涎壅盛，大便秘结，小便不利，或有瘀血肿块，水肿，食滞，虫积，舌苔厚腻，脉实有力等。寒证，多见于冬天，但其他季节亦可见，外寒是导致人体发病的寒邪，伤于肌表为“伤寒”，直中脏腑为“中寒”，也可与他邪合并致病为风寒、寒湿等，内寒是脏腑阳气不足，主要是肾阳不足所致。虚证，中医指人体正气不足，脏腑功能衰退所表现的症候。虚证的形成，或因体质素弱(先天、后天不足)，或因久病伤正，或因出血、失精、大汗，或因外邪侵袭损伤正气等原因而致“精气夺则虚”。主证：面色苍白或萎黄，精神萎靡，身疲乏力，心悸气短，形寒肢冷或五心烦热，自汗盗汗，大便溏泻，小便频数失禁，舌少苔或无苔，脉虚无力等。临床上由于气、血、阴、阳不足可分为气虚、血虚、阴虚、阳虚，由于脏腑的不足造成的各脏腑的虚证(如肺气虚、心血虚、肝阴虚、脾气虚、肾阳虚等)。近年来，有学者试图从重要的机理研究中，寻找西医理论模式对中医理论的解释。但目前中医寒热的研究还仅限于描述性及相关性方面，对于寒热机理的研究也仅涉及传导途径方面的研究。并且，目前的研究现状并不能区分现象的发生时寒热发生的因还是果。最重要的是，寒热是所有组织器官都会发生的，但目前在任何终极靶组织器官都没有发现基因、基因组、蛋白、蛋白质组的表达与活性的变化和寒热概念相关。解偶联蛋白2(UCP2)是线粒体阴离子载体蛋白超家族成员之一，它的主要生物学功能是介导质子渗漏，解偶联氧化磷酸化，减少ATP的生成并将能量转化为热的形式。和其他UCPs不同，UCP2分布广泛，参与了肥胖和糖尿病、心血管疾病、脑中风、炎症反应、衰老、癌症等许多生理病理进程。全面深入地研究UCP2的生物学功能及其作用机制，对进一步研究UCPs及其所介导的解偶联作用在生理病理情况下的作用具有非常重要的意义。UCP2是解偶联蛋白家族的成员，是位于线粒体内膜上的蛋白。UCP2表达很广，几乎在任何组织(如胰岛细胞，心脏、脾脏及淋巴组织等)中均有表达。若组织中UCP-2的表达或活性增高，将影响ATP的产生，从而导致在组织范围内热量增加，这跟中医理论中的“寒热”相对应。UCP2属于线粒体上表达的蛋白，调节线粒体功能及细胞生理活动；PPARγ(过氧化物酶体增殖子激活受体γ)共激活因子1α(PGC-1α)不在线粒体上表达，但通过调节线粒体相关基因或在线粒体上形成蛋白功能复合物从而调控线粒体数量、功能及细胞生理活动。PGC-1α通过和转录因子结合，共同上调一系列核编码的线粒体基因的表达，最终达到调节线粒体功能及数量、ATP含量的目的，通过促进线粒体DNA复制和线粒体基因表达，可以刺激线粒体生成。PGC-1α可以通过调节线粒体功能及数量、ATP含量，及时满足器官能量需求或产热需求，同中医“寒热虚实”概念建立联系。创新药物，尤其是中药创新药物，包括有效成分新药和有效部位新药。其中，对候选药物的筛选是研制中药创新药物的关键步骤。但是，在使用实验动物对候选药物进行筛选的过程中，尚缺乏有效的检测指标，以对候选药物对实证、热证、虚证和寒证的疗效加以检测，由此带来候选药物筛选困难的问题。
技术实现思路
本专利技术的目的是解决候选药物筛选困难的问题，提供一种有效的筛选方法，以对实证、热证、虚证和寒证具有不同疗效的候选药物加以区分和筛选。为了实现上述目的，本专利技术提供了一种筛选药物或评价药物有效性的方法，该方法包括如下步骤：1)征集患有病症的试验对象，以及用于对症治疗的候选药物；2)用药前，采集试验对象的检测样本，检测试验对象的线粒体功能指标；3)将候选药物对试验对象进行对症用药；4)用药后，采集试验对象的检测样本，测定待检样本中线粒体功能指标；5)分析用药前后线粒体功能指标变化，筛选出针对病症的有效药物，或评价候选药物的有效性。优选地，所述病症包括：寒证、热证、虚证、实证。优选地，所述线粒体功能指标包括选自下组的一种或多种：UCP2基因的表达量、UCP2蛋白的表达量、PGC-1α基因的表达量、PGC-1α蛋白的表达量、ATP的含量和线粒体呼吸控制率。优选地，所述候选药物包括中医传统用于治疗寒证、热证、虚证、实证的单味药、验方、其他中药、中成药、中药制剂、中药汤剂中的至少一种；优选地，所述单味药包括大黄、知母、黄连、栀子、黄柏、人参、肉桂、麻黄中的至少一种。优选地，所述给药方式包括：饲喂、灌胃、口服、呼吸道给药、透皮给药、粘膜给药、腔道给药、肌肉注射、皮下注射和腹腔注射中的至少一种。优选地，所述试验对象为小鼠、大鼠、豚鼠、犬、猫、兔和人中的至少一种。优选地，所述检测样本包括：器官、组织和细胞中的至少一种；所述器官包括脑、心、肺、肝、脾、胰岛、小肠、肾、脂肪和骨骼肌中的至少一种；所述组织包括上皮组织、神经组织、肌肉组织和结缔组织中的至少一种；所述细胞包括肝实质细胞、肝星形细胞和肝窦内皮细胞中的至少一种。优选地，所述分析用药前后线粒体功能指标变化包括：与用药前或空白对照相比，用药后，UCP2基因和/或蛋白表达量升高，指示候选药物为针对寒证的有效药物；UCP2基因和/或蛋白表达量降低，指示候选药物为针对热证的有效药物；所述空白对照是施用等量蒸馏水或生理盐水。优选地，所述分析用药前后线粒体功能指标变化包括：与用药前或空白对照相比，用药后，PGC-1α基因和/或蛋白表达量升高，指示候选药物为针对寒证的有效药物；PGC-1α基因和/或蛋白表达量降低，指示候选药物为针对热证的有效药物。优选地，所述分析用药前后线粒体功能指标变化包括：与用药前或空白对照相比，用药后，ATP的含量升高，指示候选药物为针对虚证的有效药物；ATP的含量降低，指示候选药物为针对实证的有效药物。通过上述技术方案，本专利技术能够有效地对寒证、热证、虚证和实证具有不同疗效的候选药物加以区分本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种筛选药物或评价药物有效性的方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：1)征集患有病症的试验对象，以及用于对症治疗的候选药物；2)用药前，采集试验对象的检测样本，检测试验对象的线粒体功能指标；3)将候选药物对试验对象进行对症用药；4)用药后，采集试验对象的检测样本，测定待检样本中线粒体功能指标；5)分析用药前后线粒体功能指标变化，筛选出针对病症的有效药物，或评价候选药物的有效性。

【技术特征摘要】
1.一种筛选药物或评价药物有效性的方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：1)征集患有病症的试验对象，以及用于对症治疗的候选药物；2)用药前，采集试验对象的检测样本，检测试验对象的线粒体功能指标；3)将候选药物对试验对象进行对症用药；4)用药后，采集试验对象的检测样本，测定待检样本中线粒体功能指标；5)分析用药前后线粒体功能指标变化，筛选出针对病症的有效药物，或评价候选药物的有效性。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述病症包括：寒证、热证、虚证、实证。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述线粒体功能指标包括选自下组的一种或多种：UCP2基因的表达量、UCP2蛋白的表达量、PGC-1α基因的表达量、PGC-1α蛋白的表达量、ATP的含量和线粒体呼吸控制率。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述候选药物包括中医传统用于治疗寒证、热证、虚证、实证的单味药、验方、其他中药、中成药、中药制剂、中药汤剂中的至少一种；优选地，所述单味药包括大黄、知母、黄连、栀子、黄柏、人参、肉桂、麻黄中的至少一种。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述给药方式包括：饲喂、灌胃、口服、呼吸道给药、透皮给药、粘膜给药、腔道给药、肌肉注射、皮
\t下注射和腹腔注射中的至少一种。6.根据权利要求1所述的方法，其特征...

【专利技术属性】
技术研发人员：张辰宇，
申请(专利权)人：江苏命码生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32