一种负载卡莫司汀的胶质瘤靶向聚合物胶束及其制备方法技术

本发明专利技术提供了负载卡莫司汀的胶质瘤靶向聚合物胶束，包括聚乙二醇‑聚乳酸‑羟基乙酸共聚物、T7肽修饰的聚乙二醇‑聚乳酸‑羟基乙酸共聚物与卡莫司汀，其中所述聚合物胶束与所述药物卡莫司汀的质量比为10：1。本发明专利技术还提供了上述聚合物以及靶向胶束的制备方法，即薄膜水化法。本发明专利技术的方法能够形成稳定的具有特定靶向脑毛细血管内皮及胶质瘤细胞的聚合物胶束；与传统治疗药物相比，本发明专利技术的靶向胶束对胶质瘤细胞的毒性作用最强，并可大大减少全身副作用；而且本发明专利技术的靶向药物在室温下保存一周后仍能通过HPLC测得接近100％的原型药物。因此，可应用于卡莫司汀静脉注射等常规治疗手段，为目前尚存在应用缺陷的BCNU提供了一个新的可实施途径。

A glioma target load of carmustine to polymer micelle and preparation method thereof

The invention provides a glioma target load of carmustine to polymer micelles, including polyethylene glycol polylactic acid glycolic acid, T7 peptide modified polyethylene glycol polylactic acid glycolic acid and carmustine, the quality of the polymer micelles and the drug card carmustine is 10:1. The invention also provides the preparation method of the polymer and the targeting micelle. The method of the invention can form stable polymeric micelles with specific targeting to the brain capillary endothelial cells and glioma; compared with the traditional drug treatment, the toxic effect of targeted micelles on glioma cells was the strongest, and can greatly reduce systemic side effects; and the invention of the drug targeting at room temperature preservation week after week can be measured close to 100% prototype by HPLC. Therefore, can be applied to carmustine intravenous injection and other conventional treatment method, provides a new way for the implementation of existing defects in application BCNU.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于药物制剂领域，具体涉及一种负载卡莫司汀的胶质瘤靶向胶束及其制备方法。
技术介绍
卡莫司汀(Carmustine，商品名BCNU)结构式如下：卡莫司汀是烷化类抗肿瘤药物，具有高脂溶性、分子量小、血浆蛋白结合率低等优点，可以迅速通过血脑屏障，通过对DNA和RNA的烷基化作用而发挥其抗肿瘤作用，被认为是颅内胶质瘤化疗的“金标准”。但是BCNU血浆半衰期较短，只有15-20分钟，给药后24h时血药浓度几乎为0，肿瘤局部不能达到有效的作用浓度和时间。加大药物剂量又会导致骨髓抑制、肺纤维化等全身副作用。针对卡莫司汀静脉给药的问题，许多学者希望通过改进卡莫司汀的制剂形式及给药方式，能够在肿瘤及周边达到较高药物作用浓度及较长的作用时间。G1iadel@是1996年FDA批准的局部植入型BCNU缓释剂型，手术后G1iadel膜片可局部植入到瘤腔内，用于胶质瘤的辅助治疗。然而，G1iadel@的植入会导致一些并发症的发生：感染，癫痫和切口不愈合等。最为制约G1iadel@临床应用的是，当颅内G1iadel@释放完全后，还需要再次开颅植入新的膜片。这对患者来讲，难以承受。因此，迫切需要建立一种制备简单，安全性好且高效率的给药体系，这是目前BCNU临床应用急需突破的课题。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的第一目的在于：提供了一种负载卡莫司汀的胶质瘤靶向聚合物胶束，包括以下组分：聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸共聚物、T7肽修饰的聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸共聚物与卡莫司汀。优选地，本专利技术所述的负载卡莫司汀的胶质瘤靶向聚合物胶束中，所述聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸共聚物为甲氧基封端的聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸共聚物。优选地，本专利技术所述的负载卡莫司汀的胶质瘤靶向聚合物胶束中，所述聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸共聚物、T7肽修饰的聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸共聚物，与所述卡莫司汀的重量比为10：1。优选地，本专利技术所述的负载卡莫司汀的胶质瘤靶向聚合物胶束中，所述T7肽修饰的聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸共聚物占总胶束材料质量比的10％-40％；更优选地，所述T7肽修饰的聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸共聚物占总胶束材料质量比的20％。优选地，本专利技术所述的负载卡莫司汀的胶质瘤靶向聚合物胶束中，所述聚合物胶束的平均直径为83.31±0.52nm。优选地，本专利技术所述的负载卡莫司汀的胶质瘤靶向聚合物胶束中，所述负载卡莫司汀的胶质瘤靶向聚合物胶束的包封率为66.28％，载药量为5.49％。本专利技术的另一目的在于提供一种负载卡莫司汀的胶质瘤靶向聚合物胶束的制备方法，包括以下步骤：1)制备聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸共聚物；2)制备T7肽修饰的聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸共聚物；3)将步骤1)制备的乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸共聚物与和步骤2)制备的T7肽修饰的聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸共聚物，与卡莫司汀按照10：1质量比混合加入有机溶剂溶解，除去有机溶剂后，得到聚合物胶束的薄膜；4)将步骤3)获得聚合物胶束的薄膜分散在水化介质中，通过超声平衡使所述薄膜充分分散在所述水化介质中，继续充分搅拌，得到负载卡莫司汀的胶质瘤靶向聚合物胶束。优选地，本专利技术所述的聚合物胶束制备方法中，所述步骤3)中有机溶剂为二氯甲烷。优选地，本专利技术所述的聚合物胶束制备方法中，所述步骤3)中T7肽修饰的聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸共聚物占总胶束材料质量比的10％-40％；优选地，所述T7肽修饰的聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸共聚物占总胶束材料质量比的20％。优选地，本专利技术所述的聚合物胶束制备方法中，所述步骤4)中水化介质量是1ml，超声平衡时间是15分钟，搅拌时间是30分钟。由上述方法及本专利技术后续实施例可以知道，本专利技术的负载卡莫司汀的胶质瘤靶向聚合物胶束，至少具有以下优点：1)本专利技术的负载卡莫司汀的胶质瘤靶向聚合物胶束，通过本专利技术后续实施例证明，卡莫司汀被包裹在由聚乳酸-羟基乙酸共聚物形成的核心结构里，聚乙二醇暴露在胶束的表面，并在表面修饰了靶向基团T7肽，从而形成稳定的具有特定靶向能力的聚合物胶束；2)与传统治疗药物相比，本专利技术的负载卡莫司汀的胶质瘤靶向聚合物胶束，通过在纳米材料表面进行修饰，可以实现主动靶向作用，更加利于药物向肿瘤区域的汇集和浓聚，可以在肿瘤细胞局部达到有效的作用浓度和时间；同时由于药物剂量较低，不会导致骨髓抑制、肺纤维化等毒副作用；3)本专利技术的负载卡莫司汀的胶质瘤靶向聚合物胶束，可以降解为乳酸而被机体利用，而且，本专利技术的靶向聚合物胶束可以增加卡莫司汀在体内的循环时间，并能减轻正常组织对卡莫司汀的非特异性吞噬。因此，本专利技术负载卡莫司汀的胶质瘤靶向聚合物胶束，有望早日实现卡莫司汀临床转化应用。4)最后，本专利技术的负载卡莫司汀的胶质瘤靶向聚合物胶束，能够大大提高药物在水性介质中的稳定性。卡莫司汀原药在水溶液中稳定性极差，pH7.0以上迅速分解，半衰期小于15分钟。而经过本专利技术方法制备胶束后，令人意外地，专利技术人发现该药物聚合物胶束于室温下保存一周仍能通过HPLC测得接近100％的原型药物。因此，本专利技术的负载卡莫司汀的胶质瘤靶向聚合物胶束可应用于卡莫司汀静脉注射等常规治疗手段。综上，本专利技术的负载卡莫司汀的胶质瘤靶向聚合物胶束为目前尚存在应用缺陷的BCNU提供了一个新的可实施途径。附图说明图1为T7肽修饰的聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸共聚物的合成方法示意图及1HNMR鉴定图；图2为本专利技术的负载卡莫司汀的胶质瘤靶向聚合物胶束的动态激发光散射(DLS)、透射电子显微镜(TEM)检测图及胶束的体外释放曲线图；图3为负载卡莫司汀的胶质瘤靶向聚合物胶束细胞内定位示意图；图4为本专利技术的负载卡莫司汀的胶质瘤靶向聚合物胶束的体外细胞毒性分析；图5为本专利技术的负载卡莫司汀的胶质瘤靶向聚合物胶束静脉给药后脑内分布图；图6为本专利技术的负载卡莫司汀的胶质瘤靶向聚合物胶束在裸鼠胶质瘤模型体内药效示意图。具体实施方式以下通过具体实施方式详细说明本专利技术的技术方案，应理解以下具体实施方案仅为示例性的，任何改动或变化只要不脱离本专利技术的技术方案的设计，都应在本专利技术权利要求保护范围之内：本专利技术的技术方案是：由聚乳酸-羟基乙酸共聚物及聚乙二醇衍生物两步反应合成出PEG-PLGA，再经T7肽修饰生成两亲性材料T7-PEG-PLGA，并由该化合物与卡莫司汀在水溶液中自组装形成负载卡莫司汀的胶束制剂；所述T7肽序列为His-Ala-Ile-Tyr-Pro-Arg-His(市购可得)。在本专利技术的一个实施方案的负载卡莫司汀的胶质瘤靶向聚合物胶束的制备方法中，包括以下步骤：1)制备聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸共聚物；2)制备T7肽修饰的聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸共聚物；3)将步骤1)制备的聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸共聚物与和步骤2)制备的T7肽修饰的聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸共聚物，与卡莫司汀按照10：1质量比混合加入溶剂溶解，除去溶剂后，得到聚合物胶束的薄膜；4)将步骤3)获得聚合物胶束的薄膜分散在水化介质中，得到负载卡莫司汀的胶质瘤靶向聚合物胶束。在本专利技术的一个实施方案的负载卡莫司汀的胶质瘤靶向聚合物胶束的制备方法中，所述聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸共聚物为甲氧基化聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸共聚物。在本专利技术的一个实施方案的负载卡莫司汀的胶质瘤靶本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种负载卡莫司汀的胶质瘤靶向聚合物胶束，其特征在于，所述靶向聚合物胶束包括以下组分：聚乙二醇‑聚乳酸‑羟基乙酸共聚物、T7肽修饰的聚乙二醇‑聚乳酸‑羟基乙酸共聚物与卡莫司汀。

【技术特征摘要】
1.一种负载卡莫司汀的胶质瘤靶向聚合物胶束，其特征在于，所述靶向聚合物胶束包括以下组分：聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸共聚物、T7肽修饰的聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸共聚物与卡莫司汀。2.根据权利要求1所述的靶向聚合物胶束，其特征在于，所述聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸共聚物为甲氧基封端的聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸共聚物。3.根据权利要求1所述的靶向聚合物胶束，其特征在于，所述聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸共聚物、T7肽修饰的聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸共聚物，与所述卡莫司汀的质量比为10：1。4.根据权利要求1所述的靶向聚合物胶束，其特征在于，所述T7肽修饰的聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸共聚物占总胶束材料质量比的10％-40％；优选地，所述T7肽修饰的聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸共聚物占总胶束材料质量比的20％。5.根据权利要求1所述的靶向聚合物胶束，其特征在于，所述聚合物胶束的平均直径为83.31±0.52nm。6.一种负载卡莫司汀的胶质瘤靶向聚合物胶束的制备方法，包括以下步骤：1)制备聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸共聚物；2)制备T7肽修饰的聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸共聚物；3)将步骤1)制备的乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸共聚物与和步骤2)制备的T7肽修饰的聚乙...

【专利技术属性】
技术研发人员：毕云科，赵世光，蒋晨，卢逸飞，
申请(专利权)人：毕云科，赵世光，蒋晨，卢逸飞，
类型：发明
国别省市：上海;31