一种中药水提物增强双歧杆菌活菌数的方法及其产品技术

本发明专利技术公开了一种中药水提物增强双歧杆菌活菌数的方法及其产品。一种利用中药水提物增加双歧杆菌活菌数的方法，利用中药增强的TPY培养基对双歧杆菌进行厌氧或兼性厌氧培养发酵。中药增强的TPY培养基是将特定几种中草药水提液加入TPY培养基所得。太子参、北沙参、黄芪、虫草花等都是属于药食同源类中药，具有补中益气的作用，能够促进双歧杆菌的生长，提高活菌数，同时中药本身的效用又能协同提高的双歧杆菌的益生保健和增强免疫功能作用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物工程
，涉及一种中药水提物增强双歧杆菌活菌数的方法及其产品。
技术介绍
双歧杆菌作为人体内的正常生理菌和最重要的益生菌，为人体肠道健康提供独特的保护作用。在迄今为止，已有大量的文献表明，双歧杆菌具有维持肠道微生态平衡、营养与促机体生长作用、免疫增强抗衰老作用、降低血脂和胆固醇作用、改善糖尿病症状和抗肿瘤作用等。双歧杆菌是严格兼性厌氧菌，在生产上需要一定的厌氧条件，同时对营养要求非常苛刻，有时候需要在培养基中加入牛肉汤，猪肝汤等才能进一步提高活菌数或延长活菌存活时间，在一定意义上限制了双歧杆菌活菌产品的保存和大规模的生产。且增加了产品在贮藏过程中染菌的风险。
技术实现思路
本专利技术的目的是针对现有技术的上述不足，提供一种利用中药水提物增加双歧杆菌活菌数的中药增强型TPY培养基。本专利技术的另一目的是提供一种中药水提物增强双歧杆菌活菌数的方法。本专利技术的又一目的是提供按照该方法制备的口服液产品或菌粉产品。本专利技术的目的可通过以下技术方案实现：一种利用中药水提物增加双歧杆菌活菌数的中药增强型TPY培养基，所述的中药增强型TPY培养基是在常规TPY双歧杆菌培养基中加入相当于常规TPY双歧杆菌培养基体积1％～5％(V/V)的中药水提液混合而成；所述的中药水提液选自北沙参、太子参、黄芪、虫草花、党参、白术、百合中的一种的水提液或多种的水提液的混合物。作为本专利技术的优选方式，所述的中药水提液优选北沙参、太子参、黄芪、虫草花、党参、白术、百合中的任意一种的水提液。作为本专利技术的优选方式，所述的中药水提液选自北沙参水提液和太子参水提液的混合物、北沙参水提液和黄芪水提液的混合物、太子参水提液和黄芪水提液的混合物、太子参水提液、北沙参水提液和黄芪水提液的混合物、太子参水提液和虫草花水提液的混合物、北沙参水提液和和虫草花水提液的混合物、黄芪水提液和虫草花水提液的混合物、太子参水提液、北沙参水提液、黄芪水提液和虫草花水提液的混合物。作为本专利技术进一步的优选方式，所述的中药水提液选自北沙参水提液和太子参水提液1:1～2体积比混合的混合物、北沙参水提液和黄芪水提液1:1～3体积比混合的混合物、太子参水提液和黄芪水提液1～2:1～3体积比混合的混合物、太子参水提液和虫草花水提液1～2:1～2体积比混合的混合物、北沙参水提液和和虫草花水提液1:1～2体积比混合的混合物、黄芪水提液和虫草花水提液1～3：1～2体积比混合的混合物。作为本专利技术的更进一步优选方试，所述的中药水提液为北沙参水提液、太子参水提液、黄芪水提液按照1:1～2:1～3体积比混合而成，或者为北沙参水提液：太子参水提液：黄芪水提液：虫草花水提液体积比按照1:1～2:1～3：1～2混合而成。所述的北沙参、太子参、黄芪、虫草花、党参、白术或百合的水提液通过以下方法制备得到：取药材，按照1：10(g/ml)的料液比加入去离子水冷浸1～3h，加热回流1～3h，取滤液，向药渣中按照1：5～10(g/ml)的料液比加入去离子水，加热回流1h～3h，合并两次滤液，趁热过滤，加热浓缩，使药材与浓缩液的质量体积比为1:1，121℃高压灭菌40～50min。所述的虫草花水提液通过以下方法制备得到：取虫草花药材，按照1:30(g/ml)的料液比加入去离子水，90℃热浸25～30min，在水浴上90℃提取1～2h，取滤液，加热浓缩，使药材与浓缩液的质量体积比为1:1，121℃高压灭菌40～50min。双歧杆菌常规TPY培养基[1]组方：大豆蛋白胨5g、胰胨5g、酵母粉10g、葡萄糖10g、吐温-801mL、L-半胱氨酸0.5g、无机盐液40mL(每1L中CaCl2含量为0.2g，K2HPO4为1.0g，MgSO4·7H2O为0.48g，KH2PO4为1.0g，NaHCO3为10.0g，NaCl为2.0g)、H2O加至1L，pH7.0。121℃高压灭菌20min。本专利技术所述的中药增强型TPY培养基在增加双歧杆菌活菌数中的应用。一种利用中药水提物增加双歧杆菌活菌数的方法，取双歧杆菌种子液按照0.5～5％(V/V)接种量，接入常规TPY培养基，35～38℃静置培养8小时活化，活化后的双歧杆菌以0.1～1％体积比接入到中药增强的TPY培养基中，35-38℃厌氧或兼性厌氧培养12-16h的发酵产物。本专利技术所述的方法优选将发酵产物无菌灌装成口服液，或离心集菌后冷冻干燥成菌粉。本专利技术所述的方法优选将所述的发酵产物经过8000～10000rpm离心浓缩，得菌泥，按菌泥：冻干保护剂＝10～20：1(V/V)向菌泥中加入冻干保护剂，充分混合均匀后置于真空冷冻干燥机中进行真空冷冻干燥制得的菌粉，粉碎，过40目筛得中药增强双歧杆菌菌粉；其中冻干保护剂保护剂配方为Vc1～2wt％，谷氨酸钠1～2wt％，脱脂乳12～20wt％，乳糖8～15wt％，溶剂为去离子水。本专利技术所述的双歧杆菌选自长双歧杆菌，青春双歧杆菌，两歧双歧杆菌，婴儿双歧杆菌中的任意一种。按照本专利技术所述的方法制备得到的中药增强双歧杆菌口服液或中药增强双歧杆菌菌粉。有益效果：本专利技术加了中药的TPY培养基能够取代牛肉汤、猪肝汤等物质，比一般TPY培养基明显增加双歧杆菌的活菌数，并且有利于双歧杆菌活菌的存活和提高稳定性。其次牛肉汤和猪肝汤操作麻烦，本身的营养过于丰富，不利于发酵产品的贮存。而上述所加的中药大部分是药食同源的物质，本身具有一定的保健作用，具有补中益气的作用，不仅能够促进双歧杆菌的生长，提高活菌数，还能发挥中药本身的药效协同提高双歧杆菌的益生保健和增强免疫功能。附图说明图1、中药增强培养双歧杆菌电泳图，从左到右分别为TPY培养基组，TPY培养基组加牛肉汤和猪肝汤组，加太子参、北沙参和黄芪组，加黄芪组，加太子参组，加北沙参组。具体实施方式实施例1(1)中药水提液的制备：取太子参药材或药材粉末500g，加5L去离子水冷浸1h，加热回流2h，取滤液，药渣再加2.5L去离子水加热回流1h，合并两次滤液，趁热过滤，加热浓缩至500ml(即相对于生药量为1g/ml)，121℃高压灭菌40min。北沙参、黄芪水提液的制备方法同上述太子参。(2)双歧杆菌TPY常规培养基的制备方法：大豆蛋白胨5g、胰胨5g、酵母粉10g、葡萄糖10g、吐温-801mL、L-半胱氨酸0.5g、无机盐液40mL(每1L中CaCl2含量为0.2g，K2HPO4为1.0g，MgSO4·7H2O为0.48g，KH2PO4为1.0g，NaHCO3为10.0g，NaCl为2.0g)、H2O1L，pH7.0。121℃高压灭菌20min。(3)将太子参、北沙参、黄芪中药水提液分别离心，离心转速6000rpm，离心时间10min。按体积比，分别取离心后的北沙参水提液20ml、太子参水提液20ml和黄芪水提液20ml单独或不同组合混合加入到1L高压灭菌的TPY常规培养基中，混匀。按照接种量0.5％体积比接入长双歧杆菌于TPY常规培养基，3本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种利用中药水提物增加双歧杆菌活菌数的中药增强型TPY培养基，其特征在于所述的中药增强型TPY培养基是在常规TPY双歧杆菌培养基中加入相当于常规TPY双歧杆菌培养基体积1％～5％(V/V)的中药水提液混合而成；所述的中药水提液选自北沙参、太子参、黄芪、虫草花、党参、白术、百合中的一种的水提液或多种的水提液的混合物。

【技术特征摘要】
1.一种利用中药水提物增加双歧杆菌活菌数的中药增强型TPY培养基，其特征
在于所述的中药增强型TPY培养基是在常规TPY双歧杆菌培养基中加入相当于
常规TPY双歧杆菌培养基体积1％～5％(V/V)的中药水提液混合而成；所述的
中药水提液选自北沙参、太子参、黄芪、虫草花、党参、白术、百合中的一种的
水提液或多种的水提液的混合物。
2.根据权利要求1所述的方法其特征在于中药增强型TPY培养基，其特征在于
中药水提液为北沙参水提液、太子参水提液、黄芪水提液按照1:1～2:1～3体积
比混合而成，或者为北沙参水提液：太子参水提液：黄芪水提液：虫草花水提液
体积比按照1:1～2:1～3：1～2混合而成，或者选自北沙参、太子参、黄芪、虫
草花、党参、白术、百合中任意一种或两种的水提液。
3.根据权利要求2所述的方法其特征在于中药增强型TPY培养基，其特征在于
所述的北沙参、太子参、黄芪、虫草花、党参、白术或百合的水提液通过以下方
法制备得到：取药材，按照1：10(g/ml)的料液比加入去离子水冷浸1～3h，
加热回流1～3h，取滤液，向药渣中按照1：5～10(g/ml)的料液比加入去离子
水，加热回流1h～3h，合并两次滤液，趁热过滤，加热浓缩，使药材与浓缩液
的质量体积比为1:1，121℃高压灭菌40～50min。
4.根据权利要求2所述的方法其特征在于中药增强型TPY培养基，其特征在于
所述的虫草花水提液通过以下方法制备得到：取虫草花药材，按照1:30(g/ml)
的料液比加入去离子水，90...

【专利技术属性】
技术研发人员：华子春，徐根兴，戴宇青，张燕，
申请(专利权)人：南京吉瑞康生物科技有限公司，南京大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32