【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于糖尿病的辅助诊断
，具体涉及人体血清或尿液中C-肽定量测定的试剂盒。
技术介绍
糖尿病是由于胰岛素分泌缺陷或胰岛素作用障碍所致的以高血糖为特征的代谢性疾病。C-肽是胰岛β细胞的分泌产物，它与胰岛素有一个共同的前体——胰岛素原。一个分子的胰岛素原经酶切后，裂解成一个分子的胰岛素和一个分子的C-肽。在使用胰岛素治疗的糖尿病病人中，胰岛素的测定会受到外源性胰岛素和外周循环抗体的干扰。但进行胰岛素治疗的病人所检测到的胰岛素抗体对C-肽没有显著干扰。C-肽从人体产生后，不被肝细胞所摄取，主要在肾脏代谢并从肾脏排出体外。C-肽无生物活性，也不与细胞膜上的受体结合，且不被降解C-肽的测定方法是比胰岛素本身更为可靠的指示胰岛素分泌水平的方法。另外，对于应用外源性胰岛素的测定，由于C-肽与胰岛素抗体无交叉反应，不受胰岛素抗体干扰，外源性胰岛素又不含C-肽，故C-肽测定显得更为重要，从而了解胰岛β细胞功能情况，对于指导治疗有积极作用。目前临床上用于测定C-肽的方法主要有放射免疫分析、酶联免疫分析、时间分辨荧光免疫分析和化学发光免疫分析等。放射免疫分析受方法本身工作原理的限制，其灵敏度及抗干扰能力差，存在放射线辐射和污染等问题，已基本上退出市场。而酶联免疫分析受方法学的限制，特异性和灵敏性有待提高，一般作为初筛，现阶段还不能作为定性、定量手段。时间分辨荧光免疫分析进行超微量分析的时候，会受到激发光的杂散光影响，进而...
【技术保护点】
一种C‑肽定量测定试剂盒，其特征在于：包括抗C‑肽抗体包被的磁性微粒、吖啶酯标记的抗C‑肽抗体；所述抗C‑肽抗体包被的磁性微粒包括带有羧基或对甲苯磺酰基的磁性微粒、抗C‑肽抗体、包被缓冲液、保存液、封闭液；所述吖啶酯标记的抗C‑肽抗体由标记物、抗C‑肽抗体、标记缓冲液、保存液制备而成；所述标记物为吖啶酯或吖啶磺酰胺或吖啶磺酰胺衍生物中的任意一种。
【技术特征摘要】
1.一种C-肽定量测定试剂盒，其特征在于：包括抗C-肽抗体包被的磁性微粒、吖啶酯标
记的抗C-肽抗体；
所述抗C-肽抗体包被的磁性微粒包括带有羧基或对甲苯磺酰基的磁性微粒、抗C-肽抗
体、包被缓冲液、保存液、封闭液；
所述吖啶酯标记的抗C-肽抗体由标记物、抗C-肽抗体、标记缓冲液、保存液制备而成；
所述标记物为吖啶酯或吖啶磺酰胺或吖啶磺酰胺衍生物中的任意一种。
2.根椐权利要求1所述的C-肽定量测定试剂盒，其特征在于：所述带有羧基的抗C-肽抗
体包被的磁性微粒还包括活化剂和偶联剂，所述带有羧基的抗C-肽抗体包被的磁性微粒的
制备方法如下：
1)配制所述包被缓冲液、封闭液、保存液、活化剂、偶联剂；
2)抗C-肽抗体预处理：取所述抗C-肽抗体用超滤离心管进行离心，弃掉滤液，往浓缩的
抗体中加入包被缓冲液，继续离心，重复4-6次，然后将离心管倒置离心，浓缩收集抗体备
用；
3)制备抗C-肽抗体包被的磁性微粒：取所述带有羧基的磁性微粒用包被缓冲液清洗4-
6次，磁分离去除上清液，加入活化剂和偶联剂，用漩涡混合器充分混匀悬浮磁性微粒，反应
30-40min；再用包被缓冲液清洗4-6次，磁分离架上去除上清液，添加步骤2)预处理过的抗
C-肽抗体，添加包被缓冲液，在25℃下，用漩涡混合器旋转包被15-20小时；反应完成后用包
被缓冲液清洗4-6次，磁分离去除上清液，加入封闭液，在25℃下，用漩涡混合器旋转包被4-
5小时，最后用保存液清洗4-6次，用保存液稀释后，2-8℃保存。
3.根椐权利要求1所述的C-肽定量测定试剂盒，其特征在于：所述带有甲苯磺酰基的抗
C-肽抗体包被的磁性微粒还包括催化剂，所述带有甲苯磺酰基的抗C-肽抗体包被的磁性微
粒的制备方法如下：
1)配制所述包被缓冲液、封闭液、保存液、催化剂；
2)抗C-肽抗体预处理：取所述抗C-肽抗体用超滤离心管进行离心，弃掉滤液，往浓缩的
抗体中加入包被缓冲液，继续离心，重复4-6次，然后将离心管倒置离心，浓缩收集抗体备
用；
3)制备抗C-肽抗体包被的磁性微粒：取所述带有对甲苯磺酰基的磁性微粒用包被缓冲
液清洗4-6次，磁分离去除上清液，加入催化剂，用漩涡混合器充分混匀悬浮磁性微粒，反应
30-40min；再用包被缓冲液清洗4-6次，磁分离去除...
【专利技术属性】
技术研发人员：陆建斌，
申请(专利权)人：广州科方生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44
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