毛蕊异黄酮苷在制备哮喘药物中的用途制造技术

本发明专利技术属制药领域，涉及毛蕊异黄酮苷新的药用用途，具体涉及毛蕊异黄酮苷在制备治疗哮喘药物中的用途，尤其是在制备过敏性哮喘药物中的用途。本发明专利技术通过体内动物实验和体外CD4+T细胞培养实验证实了毛蕊异黄酮苷对卵蛋白诱导的小鼠哮喘模型的作用以及对脾脏分离的CD4+T细胞的作用，实验结果表明，所述的毛蕊异黄酮苷能明显降低哮喘小鼠的气道高反应性，抑制气道炎症，降低肺泡灌洗液中炎症细胞数量，抑制趋化因子分泌，促进Th1细胞分化，抑制IL-17A，促进IFN-γ和IL-10分泌，抑制NF-κB活化。所述的毛蕊异黄酮苷能作为单一成分用于制备治疗哮喘或过敏性哮喘的药物。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属制药领域，涉及毛蕊异黄酮苷新的药用用途，具体涉及毛蕊异黄酮苷在治疗哮喘药物中的用途，尤其是在制备治疗过敏性哮喘药物中的用途。
技术介绍
研究显示了哮喘是一种由多种细胞和细胞成分参与的气道慢性炎症性疾病，该种慢性炎症导致气道对多种刺激因子反应性增高，出现可逆性气流受限，引起反复发作的喘息、气急、胸闷、咳嗽等症状。研究报道，哮喘性炎症主要表现为以T淋巴细胞、肥大细胞、嗜酸性粒细胞和中性粒细胞为主的多种炎症细胞在气道的侵润和聚集，这些炎症细胞相互作用，分泌多种炎症介质和细胞因子，这些炎症介质和细胞因子与炎症细胞相互作用，构成复杂的调控网络，放大局部炎症反应，维持气道炎症持续存在。目前，临床上用于治疗哮喘的药物主要有糖皮质激素、肾上腺素β2受体激动剂、白三烯调节剂、缓释茶碱等药物。毛蕊异黄酮苷是中药黄芪的活性成分，属于黄酮类化合物。有研究报道低浓度的毛蕊异黄酮(2、4和8μmol/L)促进MCF-7细胞增殖，高浓度毛蕊异黄酮(16和32μmol/L)抑制MCF-7细胞增殖，并且呈剂量依赖性；同时，低浓度的毛蕊异黄酮能减少MCF-7细胞凋亡率；另有研究显示，毛蕊异黄酮对K562细胞有明显的抑制作用，业内认为，将细胞生长周期阻滞在G0/G1期以及降低细胞内CyclinD1mRNA水平可能是其抑制K562细胞生长的主要作用机制；另有研究显示，毛蕊异黄酮可以抑制TGF-β1诱导的内皮细胞(ECV-304)向肌成纤维细胞转化，具有保护内皮细胞的作用，但是，迄今为止，尚未见蕊异黄酮苷在制备治疗过敏性哮喘药物中的用途的报道，尤其是毛蕊异黄酮苷对卵蛋白OVA诱导的哮喘模型的调节作用鲜见报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供毛蕊异黄酮苷新的药用用途，具体涉及毛蕊异黄酮苷在制备治疗哮喘药物中的用途，尤其是在制备治疗过敏性哮喘药物中的用途。本专利技术提供了毛蕊异黄酮苷在制备治疗哮喘中的用途，所述的毛蕊异黄酮苷通过降低哮喘小鼠气道高反应性，抑制气道炎症，抑制免疫性炎症相关趋化因子，调节T细胞亚型及相关细胞因子分泌，抑制NF-κB通路发挥抗哮喘作用，所述的毛蕊异黄酮苷能作为治疗药物用于治疗哮喘尤其是过敏性哮喘。本专利技术所述的毛蕊异黄酮苷(英文名称：Calycosin-7-O-β-D-glucoside，CAS登记号：20633-67-4，其来源：黄芪提取物；其外观：白色针晶粉；纯度：≥98.0％(HPLC)；包装：1g，或根据客户要求提供相应包装；4℃保存)，具有式(I)的结构(可市购)，其分子式为：C22H22O10，分子量为：446.40。所述的式(I)的毛蕊异黄酮苷可采用下述方法制得：以黄芪粗提物为原料，利用高效液相色谱法(HPLC)分离制备得到的毛蕊异黄酮苷单体。本专利技术通过体内动物实验和体外CD4+T细胞培养实验观察毛蕊异黄酮苷对卵蛋白诱导的小鼠哮喘模型的作用以及对脾脏分离的CD4+T细胞的作用，进行了毛蕊异黄酮苷对卵蛋白诱导的小鼠哮喘模型气道高反应性AHR的影响，对气道炎症的影响，对BALF中炎性细胞的影响核对BALF中炎性趋化因子的影响实验，以及对小鼠脾脏CD4+T淋巴细胞亚型的影响，对小鼠脾脏CD4+T淋巴细胞炎症因子分泌的影响和对小鼠脾脏CD4+T淋巴细胞NF-kB的影响等实验，结果显示，所述的毛蕊异黄酮苷能明显降低哮喘小鼠的气道高反应性，抑制气道炎症，降低肺泡灌洗液中炎症细胞数量，抑制趋化因子分泌，促进Th1细胞分化，抑制IL-17A，促进IFN-γ和IL-10分泌，抑制NF-κB活化。实验结果表明，所述的毛蕊异黄酮苷能作为治疗药物用于治疗哮喘尤其是缺过敏性哮喘。本专利技术中，由其提供了毛蕊异黄酮苷作为单一成分在制备哮喘药物中的用途。为了便于理解，下面通过附图和具体实施例对本专利技术进行详细的描述。需要特别指出的是，具体实施例和附图仅是为了说明，显然本领域的技术人员可以根据本文说明，对本专利技术进行各种修正或改变，这些修正和改变也将纳入本专利技术范围之内。附图说明图1显示了毛蕊异黄酮苷对卵蛋白诱导的小鼠哮喘模型气道高反应性(airwayhyperresponsiveness，AHR)的影响，其中，NC：正常对照组；AS：模型组；DEX：地塞米松对照组；CL：毛蕊异黄酮苷低剂量组；CM：毛蕊异黄酮苷中剂量组；CH：毛蕊异黄酮苷高剂量组；*：与模型组相比，P＜0.05。图2显示了毛蕊异黄酮苷对卵蛋白诱导的小鼠哮喘模型气道炎症的影响，其中，NC：正常对照组；AS：模型组；DEX：地塞米松对照组；CL：毛蕊异黄酮苷低剂量组；CM：毛蕊异黄酮苷中剂量组；CH：毛蕊异黄酮苷高剂量组。图3显示了毛蕊异黄酮苷对卵蛋白诱导的小鼠哮喘模型肺泡灌洗液(bronchoalveolarlavagefluid，BALF)中炎症细胞数量的影响，其中，NC：正常对照组；AS：模型组；DEX：地塞米松对照组；CL：毛蕊异黄酮苷低剂量组；CM：毛蕊异黄酮苷中剂量组；CH：毛蕊异黄酮苷高剂量组；WBC：白细胞总计数；NEU：中性粒细胞计数；LYM：淋巴细胞计数；MON：单核细胞计数；EOS：嗜酸性粒细胞计数；BAS：嗜碱性粒细胞计数；*：与正常组对比，p＜0.05；#：与模型组对比p＜0.05。图4显示了毛蕊异黄酮苷对卵蛋白诱导的小鼠哮喘模型BALF中炎性趋化因子的影响，回收小鼠肺泡灌洗液，ELISA法检测趋化因子CCL3和CCL19水平，其中，NC：正常对照组；AS：模型组；DEX：地塞米松对照组；CL：毛蕊异黄酮苷低剂量组；CM：毛蕊异黄酮苷中剂量组；CH：毛蕊异黄酮苷高剂量组；*：与正常组对比，p＜0.05；#：与模型组对比p＜0.05。图5显示了毛蕊异黄酮苷对小鼠脾脏CD4+T淋巴细胞亚型的影响，其中，NC：正常对照组；stim：淋巴细胞刺激复合物干预组；C20：毛蕊异黄酮苷20μM剂量组；C40：毛蕊异黄酮苷40μM剂量组；C80：毛蕊异黄酮苷80μM剂量组。图6显示了毛蕊异黄酮苷对小鼠脾脏CD4+T淋巴细胞炎症因子分泌的影响，其中，NC：正常细胞淋巴细胞刺激复合物干预组；C20：毛蕊异黄酮苷20μM剂量组；C40：毛蕊异黄酮苷40μM剂量组；C80：毛蕊异黄酮苷80μM剂量组；*：与正常组对比，p＜0.05。图7显示了毛蕊异黄酮苷对小鼠脾脏CD4+T淋巴细胞NF-κB的影响，其中，NC：正常细胞淋巴细胞刺激复合物干预组；C20：毛蕊异黄酮苷20μM剂量组；C40：毛蕊异黄酮苷40μM剂量组；C80：毛蕊异黄酮苷80μM剂量组。具体实施方式实施例1毛蕊异黄酮苷对卵蛋白诱导的小鼠哮喘模型气道高反应性AHR的影响实验采用健康清洁级7周龄雌性BALB/c小鼠60只，体重16-18g(由上海西普尔必凯实验动物有限公司提供)，随机分为6组，每组10只，即正常对照组(NC)、哮喘模型组(AS)、地塞米松干预组(DEX)、毛蕊异黄酮苷低、中、高剂量干预组(CL、CM、CH)；小鼠第0天起予一次性腹腔注射20ug卵蛋白和2mg氢氧化铝的生理盐水混悬液0.2ml，使小鼠处于致敏状态。分别于第7、14和21天以相同方法重复致敏三次；第25天起予3％卵蛋白超声雾化吸入，每次约30分钟诱发哮喘；小鼠出现呼吸加快、腹肌痉挛、口唇发本文档来自技高网...

【技术保护点】
毛蕊异黄酮苷作为单一成分在制备治疗哮喘药物中的用途；所述的毛蕊异黄酮苷是以黄芪粗提物为原料，利用高效液相色谱法(HPLC)分离制备得到的毛蕊异黄酮苷单体，其分子式为：C22H22O10，分子量为：446.40，具有式(I)的结构，

【技术特征摘要】
1.毛蕊异黄酮苷作为单一成分在制备治疗哮喘药物中的用途；所述的毛蕊异黄酮苷是以黄芪粗提物为原料，利用高效液相色谱法(HPLC)分离制备得到的毛蕊异黄酮苷单体，其分子式为：C22H22O10，分子量为：446.40，具有式(I)的结构，2.按权利要求1所述的用途，其特征是，所述的哮喘是过敏性哮喘。3.按权利要求1或2所述的用途，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：董竞成，魏颖，张红英，杜鑫，罗清莉，吕玉宝，
申请(专利权)人：复旦大学附属华山医院，
类型：发明
国别省市：上海;31