一种树鼩脊髓挫伤模型的构建方法技术

本发明专利技术公开了一种树鼩脊髓挫伤模型的构建方法，构建模型的步骤为：对树鼩进行分组，分成假手术组和脊髓挫伤模型组；制备脊髓挫伤模型组；制备假手术组；术后护理。通过此方法得到的模型具有稳定性好、复制性强、存活率高的特点，对研究脊髓损伤的病理机制以及探讨新的治疗方案尤为重要。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，具体地说，涉及一种树鼩脊髓挫伤模型的构建方法。
技术介绍
树鼩被认为是除灵长类外与人类最亲密的近亲，由于树鼩的许多分子和细胞结构近似于人类，在肿瘤、内分泌、消化、泌尿、神经生物学、生殖生物学、免疫学等方面已有广泛和深入的研究。脊髓外伤导致的截瘫的治疗及术后康复仍然是人类面临的医学难题。树鼩作为一种灵长目动物，相比大鼠具有与人类更近的亲缘关系，已经广泛地应用于医学生物学研究。但树鼩应用于脊髓外伤的研究仍较少，无公认的有效的疾病模型。本技术构建脊髓打击伤即脊髓挫伤模型，为人类脊髓打击伤研究提供更接近人类的树鼩脊髓疾病动物模型。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术针对上述的问题，提供了一种树鼩脊髓挫伤模型的构建方法，本疾病模型中的脊髓挫伤是脊髓受到打击损伤，但未完全断开；本疾病模型为脊髓不完成损伤研究提供了一种稳定性好、复制性强、存活率高的研究模型。为了解决上述技术问题，本专利技术公开了一种树鼩脊髓外伤模型的构建方法，包括以下步骤：1)对树鼩进行分组，分成假手术组和脊髓挫伤模型组；2)制备脊髓挫伤模型组；3)制备假手术组；4)术后护理。进一步地，步骤2)中的制备脊髓挫伤模型组具体为：术者带口罩手套，对所有树鼩采用10ml/kg腹腔注射浓度为36mg/ml水合氯醛进行麻醉，待树鼩失去意识后使用橡皮筋固定于手术台上，采用俯卧位；使用电动推毛器将树鼩自肩部至臀部的背部毛发剃净进行备皮；术者洗手消毒后采用质量分数为0.5％聚维酮碘进行皮肤消毒三遍，铺无菌洞巾，然后穿无菌手术衣带无菌手套；沿树鼩背部中线以胸10为中心作一纵行切口，切口长约4cm，逐层切开皮下组织，分离棘突两侧肌肉，充分暴露胸9-11棘突及椎板；使用咬骨钳咬除胸10棘突及椎板，显露硬脊膜作为目标区域；挫伤模型使用直径2.5mm的40g重物由15cm高处自由落下，撞击树鼩硬脊膜及脊髓组织，若见树鼩尾巴痉挛摆动且双下肢瘫痪，表明造模成功；采用丝线逐层缝合肌肉、皮下组织及皮肤，0.1％聚维酮碘消毒液冲洗伤口，无菌敷贴覆盖伤口，制备得到脊髓挫伤模型组。进一步地，步骤3)中的制备假手术组具体为：进行手术切开皮肤和肌肉并暴露脊髓，但不损伤脊髓，暴露硬脊膜后即使用质量分数为0.1％聚维酮碘消毒液冲洗伤口，采用丝线逐层缝合肌肉、皮下组织及皮肤，无菌敷贴覆盖伤口。进一步地，步骤4)中的术后护理具体为：手术后每日早、晚挤尿各两次，直至树鼩恢复排尿反射；隔日换药直至伤口愈合。与现有技术相比，本专利技术可以获得包括以下技术效果：1)与假手术组树鼩相比，挫伤手术组树鼩脊髓损伤后平衡木实验及运动行为评分显著下降，说明脊髓明显受损，但术后有逐渐好转的趋势。2)脊髓钝挫伤模型可为药物治疗人类脊髓不完全损伤提供实验模型。当然，实施本专利技术的任一产品并不一定需要同时达到以上所述的所有技术效果。附图说明此处所说明的附图用来提供对本专利技术的进一步理解，构成本专利技术的一部分，本专利技术的示意性实施例及其说明用于解释本专利技术，并不构成对本专利技术的不当限定。在附图中：图1是本专利技术树鼩固定图；图2是本专利技术实施例1中的树鼩改良Tarlov评分；图3是本专利技术实施例1中的树鼩改良横梁实验；具体实施方式以下将配合实施例来详细说明本专利技术的实施方式，藉此对本专利技术如何应用技术手段来解决技术问题并达成技术功效的实现过程能充分理解并据以实施。实施例1脊髓钝挫伤模型的构建方法本专利技术设立2个组，即脊髓挫伤模型组和假手术组(对照组)。术者带口罩帽子，对所有树鼩采用10ml/kg腹腔注射浓度为36mg/ml水合氯醛进行麻醉，待树鼩失去意识后使用橡皮筋固定于手术台上，采用俯卧位。如图1所示手术台为长40cm，宽15cm的钢板。四角处各有一矮柱用于固定树鼩。使用橡皮筋固定树鼩四肢，其中一端拴于树鼩肢体远端关节以上，另一端固定于矮柱上。图中A区域为备皮及消毒范围。使用电动推毛器将树鼩背部(自肩部至臀部)毛发剃净以进行备皮(如图1所示)。术者洗手消毒后采用质量分数为0.5％聚维酮碘进行皮肤消毒三遍，铺无菌洞巾，然后穿无菌手术衣带无菌手套。沿树鼩背部中线以胸10为中心作一纵行切口，切口长约4cm，逐层切开皮下组织，分离棘突两侧肌肉，充分暴露胸9-11棘突及椎板。使用咬骨钳咬除胸10棘突及椎板，显露硬脊膜作为目标区域。使直径2.5mm的40g重物由15cm高处自由落下，撞击树鼩硬脊膜及脊髓组织，若见树鼩尾巴痉挛摆动且双下肢瘫痪，表明造模成功。使用质量分数为0.1％聚维酮碘消毒液冲洗伤口，采用丝线逐层缝合肌肉、皮下组织及皮肤，无菌敷贴覆盖伤口。与脊髓挫伤组相对应的比较组为假手术组，假手术组树鼩只进行手术切开皮肤和肌肉并暴露脊髓，但不损伤脊髓，暴露硬脊膜后即使用质量分数为0.1％聚维酮碘消毒液冲洗伤口，采用丝线逐层缝合肌肉、皮下组织及皮肤，无菌敷贴覆盖伤口。手术后2个组每日早、晚挤尿两次，直至树鼩恢复排尿反射；隔日换药直至伤口愈合。下面结合具体的实验过程来说明本专利技术的技术效果：1行为学Tarlov评分结果假手术组树鼩步态正常，得分为5分。脊髓挫伤术后4～6天，脊髓挫伤组仅限于髋、膝关节的非反射性运动，评分在1分内，评分结果见表1。行为学Tarlov评分结果显示脊髓挫伤组评分比假手术组明显降低(下表1，图2)。表1Tarlov评分结果时间假手术组脊髓挫伤组第2天5±00.5±0.4第4天5±00.3±0.5第6天5±00.6±0.52行为学横梁评分结果假手术组树鼩放上横梁后逃逸，得分为6分。脊髓挫伤组在术后4～6天树鼩上肢悬挂于横梁上，给予刺激后移动距离超过横梁中点，评分在1～2分之间，评分结果见表2。行为学横梁评分结果显示脊髓挫伤组评分明显低于假手术组(下表2，图3)。表2行为学横梁评分结果假手术组脊髓挫伤组第2天6±00第4天6±01.8±1.2第6天6±01.6±1.1评分说明：按照上述评分不给予刺激树鼩评分都是0分，参与人员商议后决定从第四天起给予刺激，实验后发现给予刺激和不给于刺激有明显差异。本专利技术与假手术组树鼩相比，如图2和图3，脊髓钝挫伤组术后第2、4、6天的横梁实验评分及Tarlov评分，脊髓挫伤组树鼩横梁实验及Tarlov评分明显下降，但术后有逐渐好转的趋势。综上所述，本模型为脊髓外伤的研究提供了一种稳定性好、复制性强、存活率高的研究模型。上述说明示出并描述了专利技术的若干优选实施例，但如前所述，应当理解专利技术并非局限于本文所披露的形式，不应看作是对其他实施例的排除，而可用于各种其他组合、修改和环境，并能够在本文所述专利技术构想范围内，通过上述教导或相关领域的技术或知识进行改动。而本领域人员所进行的改动和变化不脱离专利技术的精神和范围，则都应在专利技术所附权利要求的保护范围内。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种树鼩脊髓挫伤模型的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：1)对树鼩进行分组，分成假手术组和脊髓挫伤模型组；2)制备脊髓挫伤模型组；3)制备假手术组；4)术后护理。

【技术特征摘要】
1.一种树鼩脊髓挫伤模型的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：1)对树鼩进行分组，分成假手术组和脊髓挫伤模型组；2)制备脊髓挫伤模型组；3)制备假手术组；4)术后护理。2.根据权利要求1所述的树鼩脊髓挫伤模型的构建方法，其特征在于，步骤2)中的制备脊髓挫伤模型组具体为：术者带口罩手套，对所有树鼩采用10ml/kg腹腔注射浓度为36mg/ml水合氯醛进行麻醉，待树鼩失去意识后使用橡皮筋固定于手术台上，采用俯卧位；使用电动推毛器将树鼩自肩部至臀部的背部毛发剃净进行备皮；术者洗手消毒后采用质量分数为0.5％聚维酮碘进行皮肤消毒三遍，铺无菌洞巾，然后穿无菌手术衣带无菌手套；沿树鼩背部中线以胸10为中心作一纵行切口，切口长约4cm，逐层切开皮下组织，分离棘突两侧肌肉，充分暴露胸9-11棘突及椎板；使用咬骨钳咬除...

【专利技术属性】
技术研发人员：王廷华，王杰栋，刘佳，张荣平，
申请(专利权)人：昆明医科大学，
类型：发明
国别省市：云南;53