本发明专利技术涉及一种增加乌头属植物提取物中单酯型生物碱含量的方法。通过调节提取物溶液的酸碱度和高压水解的方法，使提取物中的双酯型生物碱尽可能的转化为单酯型生物碱。反应产物主要是以水解反应产物为主，双酯型生物碱发生水解反应，生成毒性较小的单酯型生物碱。由于是对提取物溶液的水解，不用考虑生药材的闷润时间等多种因素的影响。而且溶液分布均匀，反应更稳定可靠。减少副产物，缩短生产周期，提高单酯型生物碱产率０．１７－１３倍。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于中药
，具体涉及增加乌头属植物提取物中单酯型生物碱含量的方法。毛茛科(Ranunculaceae)乌头属(Aconitum)植物在我国品种很多，约160多种，主产 于西南各省，约有44种已作为药用，其中附子(i adxA;ow力丄flferafo)、川乌(Wacfo:y4cowW) 和草乌(ite//* 《ww;rq^/)是最常用的中药。附子为毛茛科植物乌头C4co"/加wow7w/c/;w// Z)eA"的子根，川乌为毛茛科植物乌头的干燥母根，草乌为毛茛科植物北乌头(j"W"〃附A7/縦-(參'i "'c/76)的干燥块根。乌头属植物中主要含有三类生物碱双酯型生物碱、单酯型生物碱和脂类生物碱(表l)。 现代药理研究证明，双酯型生物碱为附子及乌头属植物中的剧毒成分，乌头碱、中乌头碱、次乌头碱的小鼠LDso分别为l. 8 mg/kg、 1. 9 mg/kg和5. 8 mg/kg (Ohno Y. / 7br 2Jbx7" ifev. , 1998， 17(1): 1-11)。中毒症状以神经系统和循环系统为主,其次是消化系统症状,尸检 可见脑部及全身各器官均有不同程度的出血"此类生物碱的毒性概括为箭毒样作用即阻断神 经)肌肉接头传导;乌头碱样作用表现为心率紊乱、血压下降、体温降低、呼吸抑制、肌肉麻 痹和中枢神经功能紊乱等"乌头碱可直接毒害心肌细胞,故其心脏中毒的致命性最为严重(宋 东江.乌头碱类化合物毒理学研究概况.中国药理通报，1989,5(5):272)。虽然单酯型生物碱含 量低，但是毒性低，使用安全，炮制品和配伍水煎液中含量较高，但是提取物中仍有一定双 酯型生物碱残余。在加热水解过程中双酯型生物碱如乌头碱首先水解失去C-8位乙酰基而 成为毒性较小且仍具有一定药理作用的苯甲酰乌头原碱类(benzoylaconitines)毒性约为乌头 碱的1/200，己基本达到去毒目的。若进一步水解则失去C-14位苯甲酰酯基而成为毒性更 小，药理作用也较弱的乌头原碱类(aconines)，其毒性仅为原生物碱的1/2000 1/4000。水 解后的产物仍然有效。本专利的目的，即通过调节提取溶液的酸碱度和高压水解的方法，使 提取物中的双酯型生物碱尽可能的转变为单酯型生物碱。本专利技术是通过调节提取物溶液的酸碱度和高压水解的方法，使提取物中的双酯型生物碱 尽可能的转化为单酯型生物碱。表l乌头属植物中主要双酯型生物碱、单酯型生物碱和脂类生物碱
技术介绍
技术实现思路
<formula>formula see original document page 3</formula>生物碱双酯 型生 物碱輔 型牛 物碱脂型 生物 碱次乌头碱 中乌头碱 乌头碱 14-苯甲酰次乌头胺 14-苯甲酰中乌头胺 14-苯甲酰乌头胺 8-亚油酰-14-苯甲酰次乌头胺 8-亚油酰-14-苯甲酰中乌头胺 8-亚油酰-14-苯甲酰乌头R2R3R4R5R6R7质荷比 Cm/z)口服半 数致死 量 (mg/Kg)OCH3CH3HOCH3OAcOBzOHOH6165.8OCH3C2H5HOCH3OAcOBzOHOH6321.9OCH3C2H5OHOCH3OAcOBzOHOH6461.8OCH3CH3HOCH3OHOBzOHOH574800OCH3C2H5HOCH3OHOBzOHOH柳腸OCH3C2H5OHOCH3OHOBzOHOH6041500OCH3CH3HOCH3OLipoOBzOHOH836100-200OCH3C2H5HOCH3OLipoOBzOHOH85210-40OCH3C2H5OHOCH3OLipoOBzOHOH866>400，其步骤和条件如下 将乌头类植物的千燥粉末浸于体积分数为50-95%的乙醇溶液中，乌头类植物的干燥粉末质量 (g): 50-95W的乙醇溶液的体积(ml)比为1: 1-3;超声提取1.5-4小时后滤出乙醇提取液；按上述方 法再处理两次；合并三次滤出的乙醇提取液，4(TC-6(TC下减压蒸出溶剂，得到提取物；该提取物用 蒸馏水稀释成以乌头类植物的干燥粉末质量(g)和蒸馏水的体积(ml)比为3-6g/ml的溶液，加氨 水调pH值到6.0-10.0，置高压反应釜中于100。C-12(TC加热，加热时间40-80min，得到一种增加乌 头属植物提取物中单酯型生物碱含量的提取液。有益效果 ，反应产物主要是以水解反 应产物为主，双酯型生物碱发生水解反应，生成毒性较小的单酯型生物碱。由于是对提取物溶液的 水解，不用考虑生药材的闷润时间等多种因素的影响。而且溶液分布均匀，反应更稳定可靠。减少 别产物，缩短生产周期，提高单酯型生物碱产率0.17-13倍。 检测方法(1) 质谱半定量法金属加热毛细管温度18(TC;喷雾电压4. 5kV;管透镜补偿电压10V;碰撞能量为20。/。42%;氮气为壳气；金属加热毛细管电压10 V;注射泵流速3 u L /min。取上述样品溶液20pL， 加入100nL高乌甲素(内标物)，用甲醇稀释25倍后，进电喷雾质谱仪分析。(2) 检测图见附图1和附图2 附图说明附图l为生川乌未经过增加乌头属植物提取物中单酯型生物碱含量的方法得到的电喷雾质谱阁(图中616.88、 632.68、 646.61为双酯型生物碱)。由图可以看出未水解的生川乌提取液样品中主要以双酯型生物碱为主，单酯型生物碱的含量很低(相对含量为22.66%)。附图2为生川乌经过增加乌头属植物提取物中单酯型生物碱含量的方法得到的电喷雾质 谱图(图中590.63、 574.62、 604.58为单酯型生物碱；836.63、 852.51为脂型生物碱)。由图 可以看出水解后的生川乌提取液样品中主要是单酯型生物碱(相对含量为317.90%)，双酯 型生物碱己水解成单酯型生物碱。 具体实施例方式实施例l 将生川乌的干燥粉末5g浸于体积比为50。/。的乙醇5ml溶液中超声提取1.5小 时后滤出乙醇提取液，按上述方法再处理两次，合并三次滤出的乙醇提取液，40。C下减压蒸 出溶剂，得到生川乌提取物，提取物用蒸馏水稀释成生川乌干燥粉末与蒸馏水的比是3g/ml 的溶液，加氨水调PH值到6.0，至高压反应釜中于10(TC加热，加热时间40min，得到一种增 加生〗11乌的提取物中单酯型生物碱含量的提取液。把该生川乌的提取液冷却至室温，取20pL样品溶液，加入lOOpL高乌甲素作为内标物， 混匀后，进LCQ质谱半定量检测，双酯型生物碱全部水解，单酯型生物碱水解前的相对含 量为22.66%,水解后的相对含量为317.90%。实施例2将生川乌的干燥粉末5g浸于体积比为95%的乙醇15ml溶液中超声提取4小 时后滤出乙醇提取液，按上述方法再处理两次，合并三次滤出的乙醇提取液，60。C下减压蒸 出溶剂，得到生川乌提取物，提取物用蒸馏水稀释成生川乌干燥粉末与蒸馏水的比是6g/ml 的溶液，加氨水调PH值到10.0，至高压反应釜中于12(TC加热，加热时间80min，得到一 种增加生川乌的提取物中单酯型生物碱含量的提取液。把该生川乌的提取液冷却至室温，取20nL样品溶液，加入lOOpL高乌甲素作为内标物， 混匀后，进LCQ质谱半本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种增加乌头属植物提取物中单酯型生物碱含量的方法，其步骤和条件如下：将乌头类植物的干燥粉末浸于体积分数为５０－９５％的乙醇溶液中，乌头类植物的干燥粉末质量（ｇ）∶５０－９５％的乙醇溶液的体积（ｍｌ）比为１∶１－３；超声提取１．５－４小时后滤出乙醇提取液；按上述方法再处理两次；合并三次滤出的乙醇提取液，４０℃－６０℃下减压蒸出溶剂，得到提取物；该提取物用蒸馏水稀释成以乌头类植物的干燥粉末质量（ｇ）和蒸馏水的体积（ｍｌ）比为３－６ｇ／ｍｌ的溶液，加氨水调ｐＨ值到６．０－１０．０，置高压反应釜中于１００℃－１２０℃加热，加热时间４０－８０ｍｉｎ，得到一种增加乌头属植物提取物中单酯型生物碱含量的提取液。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：皮子凤，孙莉佳，宋凤瑞，刘志强，
申请(专利权)人：中国科学院长春应用化学研究所，
类型：发明
国别省市：82[中国|长春]
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