FAN1基因在II型糖尿病诊断中的应用制造技术

本发明专利技术公开了FAN1基因在II型糖尿病诊断中的应用，FAN1基因在II型糖尿病患者的血液中表达水平高于健康人血液的表达水平，通过检测患者血液中FAN1基因的表达水平，可以诊断患者是否患有糖尿病，从而实现患者的早期治疗。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物
，具体地涉及FAN1基因在II型糖尿病诊断中的应用。
技术介绍
糖尿病是一组以高血糖为特征的代谢性疾病。高血糖则是由于胰岛素分泌缺陷或其生物作用受损，或两者兼有引起。糖尿病时长期存在的高血糖，导致各种组织，特别是眼、肾、心脏、血管、神经的慢性损害、功能障碍。随着全球范围内人们生活水平的不断提高，糖尿病患病人数也迅速增加。世界卫生组织(WHO)估计到2030年，全世界糖尿病患者人数将超过3.5亿。由于糖尿病的发病率不断上升，其无法最终治愈的慢性病本质，以及与其并发症(包括但不限于心血管疾病，肾衰竭，癌症，失明，截肢)相关的严重的健康隐患，迫切需要有新的、有效的方法来评估或预测个体今后可能患有糖尿病的风险，以便可以采取预防性措施来预防或延迟这些个体中糖尿病的发生或降低糖尿病相关症状/风险的严重程度。大多数糖尿病案例分成三大类：I型、II型和妊娠糖尿病。II型糖尿病比I型糖尿病更为常见，超过90％的糖尿病患者为II型糖尿病。后者与特征为肥胖和胰岛素抵抗(降低胰岛素敏感性)的现代病密切相关。现代研究表明II型糖尿病有很强的遗传成分，目前已发现20多个候选基因如胰岛素基因、胰岛素受体基因、胰岛素受体底物-1基因、葡萄糖转运蛋白基因、葡萄糖激酶基因、糖原合成酶基因、β3受体基因及线粒体基因等与II型糖尿病有关联，上述候选基因与II型糖尿病关联的研究为我们在群体中进行发病风险预测提供了分子生物学基础，目前世界许多国家都在致力于此方面的研究。目前，II型糖尿病的诊断主要依靠尿糖、尿酮、尿白蛋白、血电解质、血尿素氮和肌酐等实验室检查和各种辅助检查，但是临床上尚无可靠的生物标志物可以对II型糖尿病进行风险预测和早期诊断。
技术实现思路
为了弥补现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供与II型糖尿病相关的基因标志物，使用基因标志物来诊断疾病具有及时性、特异性和灵敏性，使患者在糖尿病早期就能知晓风险，针对风险高低，采取相应的预防和治疗措施。为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：本专利技术提供了检测FAN1基因表达水平的产品在制备诊断II型糖尿病工具中的应用。进一步，上面所述诊断产品包括：通过实时定量PCR、RT-PCR、免疫检测、原位杂交或芯片检测FAN1基因的表达水平。进一步，所述用实时定量PCR诊断II型糖尿病的产品至少包括一对特异扩增FAN1基因的引物；所述用RT-PCR诊断II型糖尿病的产品至少包括一对特异扩增FAN1基因的引物；所述用免疫检测诊断II型糖尿病的产品包括：与FAN1蛋白特异性结合的抗体；所述用原位杂交诊断II型糖尿病的产品包括：与FAN1基因的核酸序列杂交的探针；所述用芯片诊断II型糖尿病的产品包括：蛋白芯片和基因芯片；其中，蛋白芯片包括与FAN1蛋白特异性结合的抗体，基因芯片包括与FAN1基因的核酸序列杂交的探针。进一步，所述用实时定量PCR诊断II型糖尿病的产品至少包括的一对特异扩增FAN1基因的引物序列如SEQIDNO.5和SEQIDNO.6所示。进一步，所述产品包括芯片和/或试剂盒；其中所述芯片包括基因芯片、蛋白质芯片；所述试剂盒包括基因检测试剂盒和蛋白免疫检测试剂盒。所述基因检测试剂盒包括SYBRGreen聚合酶链式反应体系、用于扩增FAN1基因和管家基因的引物对；所述SYBRGreen聚合酶链式反应体系包含：PCR缓冲液、dNTPs、SYBRGreen荧光染料。本专利技术提供了一种诊断II型糖尿病的工具，所述工具能够通过检测FAN1基因的表达水平来诊断II型糖尿病。进一步，上面所述的工具包括芯片、或试剂盒。其中，所述芯片包括基因芯片、蛋白质芯片；所述基因芯片包括固相载体以及固定在固相载体上的寡核苷酸探针，所述寡核苷酸探针包括用于检测FAN1基因转录水平的针对FAN1基因的寡核苷酸探针；所述蛋白质芯片包括固相载体以及固定在固相载体上的FAN1蛋白的特异性抗体；所述试剂盒包括基因检测试剂盒和蛋白免疫检测试剂盒；所述基因检测试剂盒包括用于检测FAN1基因转录水平的试剂；所述蛋白免疫检测试剂盒包括FAN1蛋白的特异性抗体。其中，所述基因芯片可用于检测包括FAN1基因在内的多个基因(例如，与II型糖尿病相关的多个基因)的表达水平。所述蛋白质芯片可用于检测包括FAN1蛋白在内的多个蛋白质(例如与II型糖尿病相关的多个蛋白质)的表达水平。通过将多个与II型糖尿病的标志物同时检测，可大大提高II型糖尿病诊断的准确率。所述固相载体包括无机载体和有机载体，所述无机载体包括但不限于有硅载体、玻璃载体、陶瓷载体等；所述有机载体包括聚丙烯薄膜、尼龙膜等。进一步，上面所述试剂包括使用实时定量PCR、RT-PCR、免疫检测、原位杂交或芯片方法检测FAN1基因表达水平过程中所需的试剂。优选地，所述试剂包括针对FAN1基因的引物和/或探针。进一步，所述基因检测试剂盒包含SYBRGreen聚合酶链式反应体系、用于扩增FAN1基因和管家基因的引物对；所述SYBRGreen聚合酶链式反应体系包含：PCR缓冲液、dNTPs、SYBRGreen荧光染料。进一步，所述扩增FAN1基因的引物对序列包括正向引物SEQIDNO.5和反向引物SEQIDNO.6。上面所述的基因检测试剂盒可用于检测包括FAN1基因在内的多个基因(例如，与II型糖尿病相关的多个基因)的表达水平，所述蛋白免疫检测试剂盒可用于检测包括FAN1蛋白在内的多个蛋白质(例如，与II型糖尿病相关的多个蛋白质)的表达水平。本专利技术中与FAN1基因的核酸序列杂交的探针可以是DNA、RNA、DNA-RNA嵌合体、PNA或其它衍生物。所述探针的长度没有限制，只要完成特异性杂交、与目的核苷酸序列特异性结合，任何长度都可以。所述探针的长度可短至25、20、15、13或10个碱基长度。同样，所述探针的长度可长至60、80、100、150、300个碱基对或更长，甚至整个基因。由于不同的探针长度对杂交效率、信号特异性有不同的影响，所述探针的长度通常至少是14个碱基对，最长一般不超过30个碱基对，与目的核苷酸序列互补的长度以15-25个碱基对最佳。所述探针自身互补序列最好少于4个碱基对，以免影响杂交效率。本专利技术中所述FAN1蛋白的特异性抗体包括单克隆抗体、多克隆抗体。所述FAN1蛋白的特异性抗体包括完整的抗体分子、抗体的任何片段或修饰，例如，嵌合抗体、scFv、Fab、F(ab’)2、Fv等。只要所述片段能够保留与FAN1蛋白的结合能力即可。用于检测蛋白质水平的抗体的制备是本领域技术人员公知的，并且本专利技术可以使用任何方法来制备所述抗体，如所述的片段可以通过化学法从头合成或利用重组DNA技术合成。在本专利技术的上下文中，“FAN1基因”包括人FAN1基因以及人FAN1基因的任何功能等同物的多核苷酸。FAN1基因包括与目前国际公共核酸序列数据库GeneBank中FAN1基因(NC_000015.10)DNA序列具有70％以上同源性，且编码相同功能蛋白质的DNA序列；优选地，FA本文档来自技高网...

【技术保护点】
检测FAN1基因表达水平的产品在制备诊断II型糖尿病工具中的应用。

【技术特征摘要】
1.检测FAN1基因表达水平的产品在制备诊断II型糖尿病工具中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述产品包括：通过实时定
量PCR、RT-PCR、免疫检测、原位杂交或芯片检测FAN1基因的表达水平。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述用实时定量PCR诊断II型
糖尿病的产品至少包括一对特异扩增FAN1基因的引物；所述用RT-PCR诊断II型
糖尿病的产品至少包括一对特异扩增FAN1基因的引物；所述用免疫检测诊断II
型糖尿病的产品包括：与FAN1蛋白特异性结合的抗体；所述用原位杂交诊断II
型糖尿病的产品包括：与FAN1基因的核酸序列杂交的探针；所述用芯片诊断II
型糖尿病的产品包括：蛋白芯片和基因芯片；其中，蛋白芯片包括与FAN1蛋白
特异性结合的抗体，基因芯片包括与FAN1基因的核酸序列杂交的探针。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述用实时定量PCR诊断II型
糖尿病的产品至少包括的一对特异扩增FAN1基因的引物序列如SEQIDNO.5和
SEQIDNO.6所示。
5.根据权利要求1-4任一项所述的应用，其特征在于，所述产品包括芯片和
/或试剂盒；其中所述芯片包括基因芯片、蛋白质芯片；所述试剂盒包括基因检
测试剂盒和蛋白免疫检测试剂盒。
6.一种诊断II...

【专利技术属性】
技术研发人员：宋宏涛，肖枫，
申请(专利权)人：北京泱深生物信息技术有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11