一种中成药“益肾补骨液”HPLC特征图谱的构建方法，包括（1）供试品溶液的制备：（2）对照品溶液的制备：取柚皮苷照品适量，精密称定，分别加甲醇制成每1ml约含0.1mg的溶液，（3）测定：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5～15μl，注入高效液相色谱仪，记录120分钟内的色谱图，图谱数据导入《中药色谱指纹图谱相似度评价系统.》2004A版分析，即得“益肾补骨液”的特征图谱。本发明专利技术的积极效果是：建立的特征图谱技术含量高，避免了益肾补骨制剂质量控制的单一性和片面性，避免了近紫外杂质峰较大吸收情况减少了人为处理产品质量达标的可能性。图谱的峰多，峰形好，易于鉴别，相似性高，专属性强，稳定性好，准确可靠。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于中药
，具体涉及中成药的HPLC特征图谱的构建方法。
技术介绍
益肾补骨液(骨碎补、何首乌、茯苓、续断、白芍、当归、党参、熟地黄、黄精等十二味药材组成)标准收载于部颁标准中药成方制剂第十册，标准编号：(WS3-B-2020-95)，公开了益肾补骨液的质量控制方法。本品质量标准中仅有性状、检查、鉴别项，没有含量测定项，用于产品生产中的质量控制还难于精准。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种中成药“益肾补骨液”HPLC特征图谱的构建方法用于“益肾补骨液”生产中的质量控制，克服现有的质量控制方法存在的上述不足。本专利技术的HPLC特征图谱的构建方法包括以下步骤：(1)供试品溶液的制备：取本品5～15ml蒸至近干，加水25～35ml使溶解,加乙醚25～35ml振摇提取，弃去乙醚液，水液用乙酸乙酯振摇提取3次，每次25～35ml,合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇溶解定容至5ml量瓶中，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。(2)对照品溶液的制备：取柚皮苷照品适量，精密称定，分别加甲醇制成每1ml约含0.1mg的溶液，即得。(3)测定：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5～15μl，注入高效液相色谱仪，记录120分钟内的色谱图，图谱数据导入《中药色谱指纹图谱相似度评价系统.》2004A版分析，即得“益肾补骨液”的特征图谱。前述方法中，所述高效液相色谱测定的色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.02％磷酸溶液为流动相B，进行梯度洗脱；流速0.8～1.2ml·min-1，柱温30～40℃，检测波长225～235nm；理论塔板数按柚皮苷峰计算应不低于3000。优选的，所述的一种“益肾补骨液”的HPLC特征图谱的构建方法，包括以下步骤：(1)供试品溶液的制备：取本品10ml蒸至近干，加水30ml使溶解,加乙醚30ml振摇提取，弃去乙醚液，水液用乙酸乙酯振摇提取3次，每次30ml,合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇溶解定容至5ml量瓶中，摇匀，过0.22μm的微孔滤膜，取续滤液作为供试品溶液。(2)对照品溶液的制备：取柚皮苷照品适量，精密称定，分别加甲醇制成每1ml约含0.1mg的溶液，即得。(3)测定：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5～15μl，注入高效液相色谱仪，记录120分钟内的色谱图，图谱数据导入《中药色谱指纹图谱相似度评价系统.》2004A版分析，即得“益肾补骨液”的特征图谱。所述高效液相色谱测定的色谱条件优选为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以0.02％磷酸水溶液为流动相B，梯度洗脱，流速1.0ml·min-1，柱温35℃，检测波长230nm，理论塔板数按柚皮苷峰计算应不低于3000。梯度洗脱过程中，流动相A、B的比例变化为：0～10min，A相5％，B相95％；10～30min，A相14％-17％，B相80％-83％；30～65min，A相17％-20％，B相83％-80％；即梯度洗脱程序表1：如前述一种“益肾补骨液”的HPLC特征图谱的构建方法得到的特征图谱，所述图谱中有7个特征峰。对7个特征峰进行归属：1号特征峰归属为白芍药材、2号特征峰归属为何首乌药材、3号和5号(柚皮苷)特征峰归属为骨碎补药材、4号和7号特征峰归属为续断药材、6号特征峰归属为陈皮药材。有益效果：1.本专利技术建立了“益肾补骨液”HPLC特征图谱共有模式，标定了7个共有峰，建立的特征图谱技术含量高，避免了益肾补骨制剂质量控制的单一性和片面性，减少了人为处理产品质量达标的可能性。2.本专利技术选择在230nm波长处进行测定，其出峰较多，反映的信息较完全；各个峰吸收值良好，基线平稳，也避免了近紫外杂质峰较大吸收情况。3.本专利技术方法所得一种“益肾补骨液”的HPLC特征图谱的构建方法图谱的峰多，峰形好，易于鉴别，相似性高，专属性强，稳定性好，准确可靠。附图说明图1是本专利技术测得的益肾补骨液高效液相特征图谱；图2是11批益肾补骨液特征图谱叠加图；图3是益肾补骨液特征图谱共有峰归属图；具体实施方式实施例1一种益肾补骨液的HPLC特征图谱的构建方法，包括以下步骤：(1)供试品溶液的制备：供试品溶液的制备：取本品5ml蒸至近干，加水25ml使溶解,加乙醚25ml振摇提取，弃去乙醚液，水液用乙酸乙酯振摇提取3次，每次25ml,合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇溶解定容至5ml量瓶中，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。(2)对照品溶液的制备：取柚皮苷照品适量，精密称定，分别加甲醇制成每1ml约含0.1mg的溶液，即得。(3)测定：色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以0.02％磷酸水溶液为流动相B，按下表梯度洗脱程序进行梯度洗脱；流速1.0ml·min-1，柱温30℃，检测波长225nm，理论塔板数按柚皮苷峰计算应不低于3000；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，记录120分钟内的色谱图，图谱数据导入《中药色谱指纹图谱相似度评价系统.》2004A版分析，即得益肾补骨液的特征图谱。表2实施例2一种益肾补骨液的HPLC特征图谱的构建方法，包括以下步骤：(1)供试品溶液的制备：供试品溶液的制备：取本品10ml蒸至近干，加水30ml使溶解,加乙醚30ml振摇提取，弃去乙醚液，水液用乙酸乙酯振摇提取3次，每次30ml,合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇溶解定容至5ml量瓶中，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。(2)对照品溶液的制备：取柚皮苷照品适量，精密称定，分别加甲醇制成每1ml约含0.1mg的溶液，即得。(3)测定：色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以0.02％磷酸水溶液为流动相B，按下表梯度洗脱程序进行梯度洗脱；流速1.0ml·min-1，柱温35℃，检测波长230nm，理论塔板数按柚皮苷峰计算应不低于3000；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，记录120分钟内的色谱图，图谱数据导入《中药色谱指纹图谱相似度评价系统.》2004A版分析，即得益肾补骨液的特征图谱。实施例3一种益肾补骨液的HPLC特征图谱的构建方法，包括以下步骤：(1)供试品溶液的制备：供试品溶液的制备：取本品15ml蒸至近干，加水35ml使溶解,加乙醚35ml振摇提取，弃去乙醚液，水液用乙酸乙酯振摇提取3次，每次35ml,合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种中成药“益肾补骨液” HPLC特征图谱的构建方法，包括以下步骤：（1）供试品溶液的制备：取本品5～15ml蒸至近干，加水25 ～ 35ml使溶解,加乙醚25 ～ 35ml振摇提取，弃去乙醚液，水液用乙酸乙酯振摇提取3次，每次25 ～ 35ml,合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇溶解定容至5ml量瓶中，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；（2）对照品溶液的制备：取柚皮苷照品适量，精密称定，分别加甲醇制成每1ml约含0.1mg的溶液，即得；（3）测定：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5 ～ 15μl，注入高效液相色谱仪，记录120 分钟内的色谱图，图谱数据导入《中药色谱指纹图谱相似度评价系统.》2004A 版分析，即得“益肾补骨液”的特征图谱；步骤（3）中，所述高效液相色谱测定的色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.02%磷酸溶液为流动相B，进行梯度洗脱；流速0.8 ～1.2ml·min‑1，柱温30 ～ 40℃，检测波长225 ～ 235nm ；理论塔板数按柚皮苷峰计算应不低于3000。
【技术特征摘要】
1.一种中成药“益肾补骨液”HPLC特征图谱的构建方法，包括以下步骤：
（1）供试品溶液的制备：取本品5～15ml蒸至近干，加水25～35ml使溶解,加乙醚25
～35ml振摇提取，弃去乙醚液，水液用乙酸乙酯振摇提取3次，每次25～35ml,合并乙酸
乙酯液，蒸干，残渣加甲醇溶解定容至5ml量瓶中，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；
（2）对照品溶液的制备：取柚皮苷照品适量，精密称定，分别加甲醇制成每1ml约含
0.1mg的溶液，即得；
（3）测定：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5～15μl，注入高效液相色谱仪，
记录120分钟内的色谱图，图谱数据导入《中药色谱指纹图谱相似度评价系统.》2004A版
分析，即得“益肾补骨液”的特征图谱；
步骤（3）中，所述高效液相色谱测定的色谱条件为：
以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.02%磷酸溶液为流动相B，
进行梯度洗脱；流速0.8～1.2ml·min-1，柱温30～40℃，检测波长225～235nm；理论
塔板数按柚皮苷峰计算应不低于3000。
2.根据权利要求1所述的中成药“益肾补骨液”HPLC特征图谱的构建方法，包括以下步
骤：
（1...
【专利技术属性】
技术研发人员：徐云，王婷婷，白冰，徐建，赵源慧，李君海，
申请(专利权)人：吉林修正药业新药开发有限公司，
类型：发明
国别省市：吉林;22
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。