一种升麻总皂苷的制备方法技术

本发明专利技术提供一种利用微乳相界面萃取技术分离纯化制备升麻总皂苷的方法，达到了利用微乳萃取技术实现工业化大生产的目的，并且节约时间，减少有机溶剂的使用，且利用该方法得到的升麻总皂苷在临床使用上药效要优于传统分离纯化方法得到的升麻总皂苷。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种天然药物升麻中有效成分的制备方法，具体涉及一种升麻总皂苷的分离纯化方法。
技术介绍
升麻为毛莨科植物大三叶升麻Cimicifugaheracleifolia.Kom.、兴安升麻Cimicifugadahurica(Turcz.).Maxim.或升麻CimicifugafoetidaL的干燥根茎，味辛、微甘，微寒。归肺、脾、胃、大肠经。具有发表透疹，清热解毒，升举阳气功效。用于风热头痛，齿痛，口疮，咽喉肿痛，麻疹不透，阳毒发斑，脱肛，子宫脱垂。研究表明兴安升麻地上部分中总皂苷的药理作用明显，可用于治疗妇女更年期综合症和骨质疏松，并且具有抗病毒、抗炎、抗氧化、降血脂和记忆改善等作用。微乳相萃取技术，是利用溶液体系微相结构和特性的过程调控而发展起来的化工分离新技术，通常包括胶团萃取、反胶团萃取、双水相萃取及三相萃取等与微乳相结构有关的萃取、分离新技术的统称。实际上，国内外从事与微乳相有关的研究工作很多，但由于微乳相体系繁多，组成复杂，难于进行系统的研究。与传统的萃取技术相比，微乳相萃取技术发展尚不完善，至今仍没有大规模工业化应用的实例。传统的升麻总皂苷制备方法通常需要经过有机溶媒提取、脱脂、萃取、大孔树脂分离纯化等步骤，其中分离纯化步骤用时较长，需耗费大量有机溶剂，而且生产完毕后的废渣处理过程存在很高的爆炸风险。
技术实现思路
本专利技术提供一种利用微乳相界面萃取技术分离纯化制备升麻总皂苷的方法，达到了利用微乳萃取技术实现工业化大生产的目的，并且节约时间，减少有机溶剂的使用，且利用该方法得到的升麻总皂苷在临床使用上药效要优于传统分离纯化方法得到的升麻总皂苷。本专利技术提供的一种升麻总皂苷的分离纯化方法，其特征为：(1)制备微乳：水40-55％、乙酸乙酯23-39％、十二烷基硫酸钠或泊洛沙姆0.04-0.5％混合搅拌制成粗乳液，再加入无水乙醇19-25％制成微乳；(2)将脱脂后的升麻粗提物溶于微乳中，其中升麻粗提物与微乳的比例为1：30-45；(3)向步骤(2)所得的微乳体系中加入氯化钠和碳酸钠或碳酸氢钠，静置分层，其中，升麻粗提物与氯化钠比例为1:0.01-0.03，升麻粗提物与碳酸钠或碳酸氢钠的比例为1:0.01-0.03；(4)弃去水相，油相回收溶剂，干燥，即得升麻总皂苷。升麻粗提物可以采用本领域技术人员常用的提取方法，优选采用如下提取方法：将升麻粉碎成粗颗粒，用60-90％乙醇加热回流提取三次，过滤，合并滤液，回收溶剂，干燥，得到粗提物；将粗提物分散到正己烷中脱脂3次，过滤，回收正己烷。其中，每次提取用乙醇重量为升麻重量的5-10倍，每次用正己烷与粗提物的重量比为4-7:1。本专利技术提供的方法，其重点和难点在于不仅要成功制备微乳，用微乳萃取粗提物，更要通过有效手段破乳，实现水相与油相的完全分离，而后将油相蒸干，才能得到溶解在油相中的有效成分，实现升麻总皂苷的分离纯化。由于需要蒸干溶剂，故油相、助乳化剂等含量较高的成分必须为沸点较低具有挥发性的物质。常用的乳化剂及破乳剂一般不具有挥发性，因此会导致这些溶剂大量残留在升麻总皂苷中，以致产品质量不合格，无法满足工业化大生产的需要。由于受以上各种因素制约，常用的微乳体系无法满足本专利技术要求，因此专利技术人经过了大量的实验研究，最终确定出本专利技术提供的技术方案。1、油相筛选微乳制备方法如下：将0.3g十二烷基硫酸钠投入到50ml水中，加入50ml油相，搅拌形成粗乳液，向粗乳液中滴加无水乙醇至体系变澄清形成微乳，用微乳萃取升麻浸膏，用碳酸钠破乳，分层，收集油相并挥干溶剂，得到成品。其中，油相分别选取乙酸乙酯、正丁醇、环己烷、氯仿、二氯甲烷和石油醚中的一种，利用不同油相形成的微乳体系分离纯化升麻总皂苷得到的结果，见表1：表1不同油相形成微乳分离纯化的升麻总皂苷根据表1结果可知，通过选择乙酸乙酯作为油相分离纯化升麻总皂苷，升麻总皂苷的各项指标满足质量标准要求；选择正丁醇、氯仿或二氯甲烷作为油相进行分离纯化时，不但需要较多助乳化剂进行破乳，并且含量、外观不合格，不能满足质量标准要求，环己烷或石油醚作为油相无法形成微乳体系。2、乳化剂筛选因最终目标产物为固体，所以使用固体类的表面活性剂作为乳化剂。筛选十二烷基硫酸钠和泊洛沙姆两种固体表面活性剂，经实验发现二者效果相当，因此确定乳化剂为十二烷基硫酸钠或泊洛沙姆中的一种。3、助乳化剂筛选筛选了甲醇、无水乙醇、异丙醇三种易挥发的助乳化剂，微乳制备方法如下：将0.3g十二烷基硫酸钠投入到50ml水中，加入50ml乙酸乙酯，搅拌形成粗乳液，向粗乳液中滴加助乳化剂至体系变澄清形成微乳，用微乳萃取升麻浸膏，用碳酸钠破乳，分层，收集油相并挥干溶剂，得到成品。利用不同的助乳化剂形成的微乳体系分离纯化升麻总皂苷得到的结果，见表2：表2不同助乳化剂形成微乳分离纯化的升麻总皂苷由表2结果表明：无水乙醇作为助乳化剂制备的微乳，可有效分离升麻总皂苷，其余两种效果不佳，所得升麻总皂苷的含量均不符合要求。4、破乳剂筛选筛选铵盐、钠盐、钙盐、镁盐等多种碱性无机盐后，最终发现钠盐可以在用量较少的情况实现破乳，其余的盐类需加入较大量才能实现，因所筛选的无机盐不具有挥发性，需要严格控制用量，以免其大量残留在成品中，因此选择钠盐；同时由于在制备升麻总皂苷的过程中会有酸性杂质产生，选择碱性无机盐作为破乳剂和除酸剂，破乳同时除去酸性杂质。选择不同破乳剂(破乳剂用量均为粗提物的3％)制备微乳分离纯化的升麻总皂苷，得到的结果见表3：表3不同破乳剂制备微乳分离纯化的升麻总皂苷：破乳剂成分破乳效果碳酸钠水层呈黑色，乙酸乙酯层呈棕色，分层较慢碳酸氢钠水层呈黑色，乙酸乙酯层呈棕色，分层较慢磷酸氢二钠可以分层，但水油两层均呈黑色，难以看清分界，分离操作困难磷酸钠可以分层，但水油两层均呈黑色，难以看清分界，分离操作困难硫酸钠可以分层，但水油两层均呈黑色，难以看清分界，分离操作困难根据表3结果可知：碳酸钠和碳酸氢钠可以达到破乳效果，其他三种虽然可以分层，但水油两层难以分清界限致使分离操作困难。碳酸钠和碳酸氢钠虽然可以作为破乳剂使用，但由于其分层慢，带来一定的操作困难。专利技术人经过大量的实验研究发现，在助乳化剂中添加3％粗提物重量的氯化钠，结果发现分离速度比不加氯化钠提高2倍以上。最终确定破乳剂选择两种组分，其中组分一为氯化钠，组分二为碳酸钠或碳酸氢钠中的一种。...

【技术保护点】
一种升麻总皂苷的分离纯化方法，其特征为：(1)制备微乳：水40‑55％、乙酸乙酯23‑39％、十二烷基硫酸钠或泊洛沙姆0.04‑0.5％混合搅拌制成粗乳液，再加入无水乙醇19‑25％制成微乳；(2)将脱脂后的升麻粗提物溶于微乳中，其中升麻粗提物与微乳的比例为1：30‑45；(3)向步骤(2)所得的微乳体系中加入氯化钠和碳酸钠或碳酸氢钠，静置分层，其中，升麻粗提物与氯化钠比例为1:0.01‑0.03，升麻粗提物与碳酸钠或碳酸氢钠的比例为1:0.01‑0.03；(4)弃去水相，油相回收溶剂，干燥，即得升麻总皂苷。

【技术特征摘要】
1.一种升麻总皂苷的分离纯化方法，其特征为：(1)制备微乳：水40-55％、乙酸乙酯23-39％、
十二烷基硫酸钠或泊洛沙姆0.04-0.5％混合搅拌制成粗乳液，再加入无水乙醇19-25％制成
微乳；(2)将脱脂后的升麻粗提物溶于微乳中，其中升麻粗提物与微乳的比例为1：30-45；
(3)向步骤(2)所得的微乳体系中加入氯化钠和碳酸钠或碳酸氢钠，静置分层，其中，
升麻粗提物与氯化钠比例为1:0.01-0.03，升麻粗提物与碳酸钠或碳酸氢钠的比例为1:
0.01-0.0...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙启泉，张婷婷，孟莹，徐敬，王君莲，范艳丽，曲静，
申请(专利权)人：山东绿叶制药有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37