一种具有医药用途的黄酮类化合物及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种新的黄酮类化合物及其制备方法，属于药物领域，具体涉及从马鞭草的干燥地上部分中分离得到的一种新的黄酮类化合物、制备方法和该化合物的医药用途。该化合物为首次报道，可以从马鞭草的干燥地上部分中提取、分离纯化得到，纯度高。体外试验证明Aβ1-40的毒性损害神经细胞，引起PC12大量凋亡，细胞活性下降，化合物(Ⅰ)干预后凋亡情况得到改善，可以进一步研究开发成神经保护的药物。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于药物领域，具体涉及从马鞭草的干燥地上部分中分离得到的一种新的黄酮类化合物及其制备方法。
技术介绍
马鞭草，又名铁马鞭、野荆芥、紫顶龙芽草，始载于《名医别录》，为马鞭草科植物马鞭草(VerbenaofficinalisL.)的干燥地上部分。马鞭草味苦性凉，归肝、脾经，具有活血散瘀、利水退黄、解毒、截疟的功效，主治癥瘕积聚、痛经经闭、喉痹、痈肿、水肿、黄疸、疟疾。马鞭草原产于热带美洲，为多年收草本，常生于路边、山坡、溪边或林旁，国内广泛分布于中南、西南及山西、陕西、甘肃、新疆、江苏、安徽、浙江、江西等地，主产湖北、江苏、广西、贵州。花期6～8月，果期7～11月，通常采收季节为6～8月开花时，炮制过程仅去残根及杂质，洗净，稍润，切断，晒干即可。目前已从马鞭草中分离鉴定出百余种化学成分，包括环烯醚萜糖苷类、苯丙素糖苷类、三萜类、黄酮类、甾醇类、挥发油类、有机酸类等。现代医学研究表明马鞭草具有抗肿瘤、抗菌、抗早孕、消炎止痛、止血、小剂量兴奋、大剂量抑制交感神经末梢、促进乳汁分泌、拟副交感等作用。临床用于治疗外感发热，湿热黄疽，急性扁桃体炎、小儿急性肾炎、急性乳腺炎、流行性感冒、功能性子宫出血、牙周炎、霉菌性阴道炎、细菌性痢疾等病症。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种从马鞭草的干燥地上部分中分离得到的一种新的黄酮类化合物；本专利技术的另一目的在于提供该新化合物的制备方法；本专利技术的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：一种黄酮类化合物，具有下述结构式的化合物(Ⅰ)，所述的化合物(Ⅰ)的制备方法，包含以下操作步骤：(a)将马鞭草的干燥地上部分粉碎，用70～80％乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；(b)步骤(a)中乙酸乙酯萃取物用大孔树脂除杂，先用10％乙醇洗脱10个柱体积，再用75％乙醇洗脱12个柱体积，收集75％乙醇洗脱液，减压浓缩得75％乙醇洗脱物浸膏；(c)步骤(b)中75％乙醇洗脱浸膏用正相硅胶分离，依次用体积比为80:1、40:1、20:1、10:1和1:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到5个组分；(d)步骤(c)中组分3用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为25:1、20:1和10:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；(e)步骤(d)中组分2用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离，用体积百分浓度为70％的甲醇水溶液等度洗脱，收集9～13个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到纯的化合物(Ⅰ)。进一步地，所述大孔树脂为AB-8型大孔吸附树脂。进一步地，所述用乙醇热回流提取采用的乙醇浓度为75％。本专利技术化合物用作药物时，可以直接使用，或者以药物组合物的形式使用。该药物组合物含有治疗有效量的本专利技术化合物(Ⅰ)，其余为药物学上可接受的、对人和动物无毒和惰性的可药用载体和/或赋形剂。所述的可药用载体或赋形剂是一种或多种选自固体、半固体和液体稀释剂、填料以及药物制品辅剂。将本专利技术的药物组合物以单位体重服用量的形式使用。本专利技术药物可通过口服或注射的形式施用于需要治疗的患者。用于口服时，可将其制成片剂、缓释片、控释片、胶囊、滴丸、微丸、混悬剂、乳剂、散剂或颗粒剂、口服液等；用于注射时，可制成灭菌的水性或油性溶液、无菌粉针、脂质体或乳剂等。本专利技术提供的上述黄酮类化合物，在实验中证实Aβ1-40的毒性损害神经细胞，引起PC12大量凋亡，细胞活性下降，上述黄酮类化合物(Ⅰ)干预后凋亡情况得到改善，因此，上述黄酮类化合物(Ⅰ)具有医药用途，尤其是在制备保护神经的药物中。附图说明图1为化合物(Ⅰ)结构式；图2为化合物(Ⅰ)理论ECD值与实验ECD值比较。具体实施方式下面结合实施例进一步说明本专利技术的实质性内容，但并不以此限定本专利技术保护范围。尽管参照较佳实施例对本专利技术作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本专利技术的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本专利技术技术方案的实质和范围。实施例1：化合物(Ⅰ)分离制备及结构确证药材和试剂来源：乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷为分析纯，购自上海凌峰化学试剂有限公司，甲醇，分析纯，购自江苏汉邦化学试剂有限公司。马鞭草的干燥地上部分购于安徽亳州中药材市场，产地广东。制备方法：(a)将马鞭草的干燥地上部分(8kg)粉碎，用75％乙醇热回流提取(25L×3次)，合并提取液，浓缩至无醇味(6L)，依次用石油醚(6L×3次)、乙酸乙酯(6L×3次)和水饱和的正丁醇(6L×3次)萃取，浓缩，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物(315g)和正丁醇萃取物；(b)步骤(a)中乙酸乙酯萃取物用纯净水溶解至2L，医用脱脂棉过滤，滤液用AB-8型大孔树脂(1.5kg)分离，依次用10％乙醇(10L)和75％(12L)乙醇洗脱，收集75％乙醇洗脱液，减压浓缩得75％乙醇洗脱物浸膏(155g)；(c)步骤(b)中75％乙醇洗脱浸膏用200-300目正相硅胶分离，依次用体积比为80:1(10个柱体积)、40:1(8个柱体积)、20:1(8个柱体积)、10:1(8个柱体积)和1:1(5个柱体积)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到5个组分；(d)步骤(c)中组分3(36g)用200-300目正相硅胶进一步分离，依次用体积比为25:1(8个柱体积)、20:1(8个柱体积)和10:1(5个柱体积)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；(e)步骤(d)中组分2(12g)用十八烷基硅烷键合的反相硅胶ODS-C18分离，用体积百分浓度为70％的甲醇水溶液等度洗脱，收集9～13个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到纯的化合物(Ⅰ)(25mg)。结构确证：HR-ESIMS显示[M+Na]+为m/z401.1006，结合核磁特征可得分子式为C22H18O6，不饱和度为14。核磁共振氢谱数据δH(ppm，DMSO-d6，400MHz)：H-5(7.99，d，J＝8.7)，H-6(6.65，d，J＝8.5)，H-2’,6’(7.31，m)，H-3’,5’(7.27，m)，H-4’(7.31，m)，H-5”(8.01，s)，2”-Me(1.31，s)，2”-Me(1.31，s)，7-OMe(3.89，s)；核磁共振碳谱数据δC(ppm，DMSO-d6，100MHz)：131.8(C，2-C)，193.7(C，3-C)，190.3(C，4-C)，113.1(C，4a-C)，126.9(CH，5-C)，104.7(CH，6-C)，163.7本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种具有医药用途的黄酮类化合物，具有下述结构式的化合物(Ⅰ)，

【技术特征摘要】
1.一种具有医药用途的黄酮类化合物，具有下述结构式的化合物(Ⅰ)，
2.权利要求1所述的化合物(Ⅰ)的制备方法，其特征在于包含以下操作步骤：(a)将马鞭
草的干燥地上部分粉碎，用70～80％乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用
石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁
醇萃取物；(b)步骤(a)中乙酸乙酯萃取物用大孔树脂除杂，先用10％乙醇洗脱10个柱体积，
再用75％乙醇洗脱12个柱体积，收集75％乙醇洗脱液，减压浓缩得75％乙醇洗脱物浸膏；
(c)步骤(b)中75％乙醇洗脱浸膏用正相硅胶分离，依次用体积比为80:1、40:1、2...

【专利技术属性】
技术研发人员：王赛波，
申请(专利权)人：温州统益生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33