一种氯霉素检测方法及检测卡技术

本发明专利技术公开了一种氯霉素检测方法及检测卡，取5‑10g样品放入粉碎机中，加入提取液和10‑15ml蒸馏水，粉碎2‑3min后取出；将粉碎完全后的样品加入离心管中，加入2‑5ml乙酸乙酯，以2000‑2300r/min离心3‑7min，静置10‑15min后去除上层溶液备用；取除去上层溶液的样品加入离心管中，加入0.5ml缓冲液，以3000‑4000r/min离心5‑10min，利用0.22um微孔滤膜过滤后取滤液待检。该氯霉素检测方法及检测卡，能有效保证氯霉素的提取率，有效保证了检测结果的准确性，步骤简单，操作方便，灵敏度高，操作人员能迅速掌握检测方法，适于推广，能直观清楚的将实验结果表达出来，方便检测人员的检测，实用性强。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及检测卡
，具体为一种氯霉素检测方法及检测卡。
技术介绍
氯霉素是由委内瑞拉链丝菌产生的抗生素。氯霉素是世界上首种完全由合成方法大量制造的广谱抗生素，对很多不同种类的微生物均起著作用。因价钱低廉的关系，氯霉素仍然盛行于一些低收入国家，但在其他西方国家经已甚少使用，这是由于它的副作用的关系。氯霉素会引起致命的再生不良性贫血。氯霉素主要是用在医治细菌性结膜炎的眼药水或药膏上。氯霉素酶联免疫检测试剂盒，主要是利用抗原与抗体的特异性免疫化学反应的基本原理来进行的，换句话说，就是利用酶标记物与样品中的氯霉素与微孔中的抗体进行竞争反应。在整个反应当中，如果样品中的氯霉素残留的越多，相对地就会竞争反应越多的酶标记物，使得能结合上抗体的酶标记物相对地减少，用TMB底物显色，样品中的氯霉素含量与样品的吸光度值呈反比，与标准曲线比较即可得出氯霉素含量。氯霉素虽然是一种有效的抗生素，但是毒副作用较大，不仅会带来严重的食品安全问题，还会对人类的健康带来严重的威胁。因此对氯霉素的准确快速检测具有重要的意义。
技术实现思路
（一）解决的技术问题针对现有技术的不足，本专利技术提供了一种氯霉素检测方法及检测卡，能对食品中的氯霉素进行检测，解决了氯霉素会带来严重的食品安全问题，还会对人类的健康带来严重的威胁的问题。（二）技术方案为实现以上目的，本专利技术通过以下技术方案予以实现：一种氯霉素检测方法，包括以下步骤：S1、取5-10g样品放入粉碎机中，加入提取液和10-15ml蒸馏水，粉碎2-3min后取出。S2、将粉碎完全后的样品加入离心管中，加入2-5ml乙酸乙酯，以2000-2300r/min离心3-7min，静置10-15min后去除上层溶液备用。S3、取除去上层溶液的样品加入离心管中，加入0.5ml缓冲液，以3000-4000r/min离心5-10min，利用0.22um微孔滤膜过滤后取滤液待检。优选的，所述样品可以为鸡、鸭、鱼、牛、猪、羊、兔等动物的肌肉、脂肪、肝和肾。优选的，将所述待检测液放置在28℃的环境下静置8-10h。优选的，所述提取液中含有乙醇和丙三醇中的一种或两种，所述乙醇和丙三醇的浓度为60％-70％。优选的，所述缓冲液为0.05-0.08MPBS。一种氯霉素检测卡，包括检测卡本体，所述检测卡本体的一端设置有手柄，所述检测卡远离手柄的一端设置有标准比色卡，所述检测卡本体包括底板，所述底板上设置有上盖，所述上盖上开设有加样孔和检测区，所述上盖与底板之间设置有样品垫、保护膜、试纸条和吸水垫，所述样品垫上设置有检测线和控制线。优选的，所述样品垫、试纸条、吸水垫和保护膜依次粘贴在底板上。优选的，其制备方法包括以下步骤：1）试纸条上包被有胶体金标记抗氯霉素单克隆体。2）检测线为氯霉素与BSA的偶联物，质控线为羊抗鼠IgG。（三）有益效果本专利技术提供了一种氯霉素检测方法及检测卡，具备以下有益效果：（1）本专利技术能有效保证氯霉素的提取率，有效保证了检测结果的准确性。（2）本专利技术步骤简单，操作方便，灵敏度高，操作人员能迅速掌握检测方法，适于推广。（3）本专利技术能直观清楚的将实验结果表达出来，方便检测人员的检测，实用性强。附图说明图1为本专利技术氯霉素检测卡的结构示意图；图2为本专利技术氯霉素检测卡的结构剖面图。图中：1检测卡本体、2手柄、3标准比色卡、4底板、5上盖、6加样孔、7检测区、8样品垫、9保护膜、10试纸条、11吸水垫、12检测线、13控制线。具体实施方式下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。实施例1一种氯霉素检测方法，包括以下步骤：S1、取5g样品放入粉碎机中，样品可以为鸡、鸭、鱼、牛、猪、羊、兔等动物的肌肉、脂肪、肝和肾，加入提取液和10ml蒸馏水，提取液中含有乙醇和丙三醇中的一种或两种，乙醇和丙三醇的浓度为64％，粉碎2.2min后取出；S2、将粉碎完全后的样品加入离心管中，加入2.3ml乙酸乙酯，以2060r/min离心3min，静置10min后去除上层溶液备用；S3、取除去上层溶液的样品加入离心管中，加入0.5ml缓冲液，缓冲液为0.05MPBS，以3000r/min离心7min，利用0.22um微孔滤膜过滤后取滤液待检，将待检测液放置在28℃的环境下静置8.2h。实施例2一种氯霉素检测方法，包括以下步骤：S1、取7g样品放入粉碎机中，样品可以为鸡、鸭、鱼、牛、猪、羊、兔等动物的肌肉、脂肪、肝和肾，加入提取液和12ml蒸馏水，提取液中含有乙醇和丙三醇中的一种或两种，乙醇和丙三醇的浓度为66％，粉碎2.6min后取出；S2、将粉碎完全后的样品加入离心管中，加入3.5ml乙酸乙酯，以2180r/min离心4.2min，静置12.5min后去除上层溶液备用；S3、取除去上层溶液的样品加入离心管中，加入0.5ml缓冲液，缓冲液为0.066MPBS，以3400r/min离心8min，利用0.22um微孔滤膜过滤后取滤液待检，将待检测液放置在28℃的环境下静置8.8h。实施例3一种氯霉素检测方法，包括以下步骤：S1、取9g样品放入粉碎机中，样品可以为鸡、鸭、鱼、牛、猪、羊、兔等动物的肌肉、脂肪、肝和肾，加入提取液和14ml蒸馏水，提取液中含有乙醇和丙三醇中的一种或两种，乙醇和丙三醇的浓度为70％，粉碎3min后取出；S2、将粉碎完全后的样品加入离心管中，加入5ml乙酸乙酯，以2300r/min离心6.6min，静置14min后去除上层溶液备用；S3、取除去上层溶液的样品加入离心管中，加入0.5ml缓冲液，缓冲液为0.08MPBS，以3800r/min离心5min，利用0.22um微孔滤膜过滤后取滤液待检，将待检测液放置在28℃的环境下静置9.4h.详情见附表：一种氯霉素检测卡，请参阅图1-2，包括检测卡本体1，检测卡本体1的一端设置有手柄2，检测卡远离手柄2的一端设置有标准比色卡3，检测卡本体1包括底板4，底板4上设置有上盖5，上盖5上开设有加样孔6和检测区7，上盖5与底板4之间设置有样品垫8、保护膜9、试纸条10和吸水垫11，样品垫8上设置有检测线12和控制线13。氯霉素检测卡结果判断：阴性（－）：T线显色（检测线，靠近加样孔一端）C线（对照线）显色，表示样品中待检药物浓度低于检测限或不含待检药物。阳性（＋）：C线显色，T线不显色，表示样品中待检药物浓度高于检测限。无效：未出现C线，可能是操作不当或试剂板已失效。需要说明的是，在本文中，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。在没有更多限制的情况下。由语句“包括一个......限定的要素，并不排除在包括所述要素的过程、方法、物品或者设备中还存在另外的相同要素”。尽管已经示出和描述了本专利技术的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本专利技术的原理和本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种氯霉素检测方法，其特征在于：包括以下步骤：S1、取5‑10g样品放入粉碎机中，加入提取液和10‑15ml蒸馏水，粉碎2‑3min后取出；S2、将粉碎完全后的样品加入离心管中，加入2‑5ml乙酸乙酯，以2000‑2300r/min离心3‑7min，静置10‑15min后去除上层溶液备用；S3、取除去上层溶液的样品加入离心管中，加入0.5ml缓冲液，以3000‑4000r/min离心5‑10min，利用0.22um微孔滤膜过滤后取滤液待检。

【技术特征摘要】
1.一种氯霉素检测方法，其特征在于：包括以下步骤：S1、取5-10g样品放入粉碎机中，加入提取液和10-15ml蒸馏水，粉碎2-3min后取出；S2、将粉碎完全后的样品加入离心管中，加入2-5ml乙酸乙酯，以2000-2300r/min离心3-7min，静置10-15min后去除上层溶液备用；S3、取除去上层溶液的样品加入离心管中，加入0.5ml缓冲液，以3000-4000r/min离心5-10min，利用0.22um微孔滤膜过滤后取滤液待检。2.根据权利要求1所述的一种氯霉素检测方法，其特征在于：所述样品可以为鸡、鸭、鱼、牛、猪、羊、兔等动物的肌肉、脂肪、肝和肾。3.根据权利要求1所述的一种氯霉素检测方法，其特征在于：将所述待检测液放置在28℃的环境下静置8-10h。4.根据权利要求1所述的一种氯霉素检测方法，其特征在于：所述提取液中含有乙醇和丙三醇中的一种或两种，所述乙醇和丙三醇的浓度为60％-70％。5.根据权利要求1所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：周合，张根义，张进，周朱晨，胡彬，吴念绮，杨敏，
申请(专利权)人：百奥森江苏食品安全科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32