一种根霉菌胞内生理活性诱导物质的萃取方法及应用,包括菌体的培养、菌体的冲洗、菌体的纯化、菌体的破壁及生理活性诱导物质的萃取、纯化、冷冻喷雾干燥等,并应用于人体及动物产乳、肉、蛋的效益提升;菌体的培养,是将根霉菌培养于改良式液体的培养基中,置放于30℃恒温箱内回转振荡培养5日后,取菌液涂抹在一改良式固体培养基中,静置于30℃恒温箱中,再培养5日后,刮取白色菌落,并置入无菌磷酸缓冲溶液中,成悬浮液。本发明专利技术可诱导促进人及动物内分泌腺分泌多量内分泌素的生理活性诱导物质,以促使儿童的成长及成人的健康幸福及取代目前使用添加瘦肉精或合成贺尔蒙来增加乳、肉、蛋产量危害人类健康的新产品,以造福人类。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术是于一种根霉菌(RhizopusSPP)胞内生理活性诱导物质(Bio-activeInducematter:BAIM)的萃取方法及应用,其是将根霉菌(RhizopusSPP)培养于改良式液体(SabouraudDextroseAgar)的培养基中,置放于30℃恒温箱内回转振荡培养5日后,取0.2ml菌液涂抹在一改良式固体(SabouraudDextroseAgar)培养基中,静置于30℃恒温箱中培养5日,在未出现黑色菌落前刮取白色菌落,并置放于无菌磷酸缓冲溶液(PhosphateBufferSolution:PBS)10ml中,即成悬浮液后再进行根霉菌胞内萃取。其萃取是以根霉菌悬浮液10000xg转数进行离心分离10分钟(4℃)后再取其菌体沉淀物,再加入无菌磷酸缓冲溶液10ml再成悬浮液,再进行离心分离连续重复三次后,再将完成冲洗的菌体沉淀物以重量1∶9(菌体沉淀物:PBS缓冲溶液)比例再成悬浮,连续进行三次冷冻(-80℃)及解冻(37℃水浴)的处理程序,再以超音波细胞击碎器进行破壁(在水浴下每间隔5分钟破壁一次,连续进行五次)。后再将破壁完成的悬浮菌液再以10000xg转数的离心分离10分钟(4℃以下)后,取其上清液以0.45μm滤膜过滤,其最后滤液即含有根霉菌体胞内生理活性诱导物质(BAIM),经喷雾干燥即得本专利技术产品:BAIM(生理活性诱导分泌物质)。
技术介绍
孩童的成长、发育及女性的不育、月事的不调、男性的秃发、不举等异常现象及经济动物的产肉、产蛋、产乳及繁殖效率的良否等均受制于脑下垂体前叶(Anteriorpituitaryparsdistalis)所支配于周边腺体分泌特定激素(Hormones)的功能所致。而此特定的激素包括:生长激素(FSH)、黄体生成素(LH)及泌乳素(LactationH)三者,而脑下垂体控制周边腺体分泌特定激素的功用,则受制于下视丘(Hypothalamus)分泌特定激素所致。而下视丘分泌特定激素,可藉由生理活性物质(Bio-avtiveInducematter)来诱导刺激而得。1970年(44年前)日本牛越郁夫取得「应用于动物的生理活性物质」专利技术专利(昭45-12754号:间脑是を经由レて下垂体を刺激する物质多量含有する物质の制造法),其生理活性物质取得制程是以Rhizopus属(RhizopusSPP.)菌体培养及发酵产物的取得是采液态发酵低温干燥的制程,其培养过程繁杂,含不纯物高达8%,且浓缩干燥产品吸湿性强,保存不易,致效果不稳定。2014年中国台湾专利技术证号:1434932号(根霉菌RhizopusSPP及其培养方法与应用),其制程中培养菌体流程虽已简化且仅简易加工后,用于生医资材,因成本昂贵效果不彰未见推广,显见其制程技术犹有瑕疵、未臻完善。中国台湾专利技术专利公开号TW201343172A:是应用少孢根霉菌(RhizopusOligosporus)的发酵产物,以作为生产降血压活性成分的用途医药组合物及其食品添加物,其是以牛乳的培养基得到一发酵产物,其含有血管收缩素转化酶抑制剂(抑制ACE活性功能),作为降血压剂,以牛乳作为培养基的营养源,其发酵产物的成分目前被公认其成分最为不稳定,虽有小白鼠动物试验,但其临床试验未经确定。且目前治疗高血压的化学合成药剂因专利期已过,致成本非常便宜,且经无数临床试验效果确定。今地球人口已逾七十亿,且日益严重地球的暖化现象,气候激变,不是大涝即大旱,导致人类的粮食日渐匮乏,尤其是对健康关系颇大的动物性蛋白质(乳、肉及蛋)的需求更为迫切,经济动物的生产因饲养方式、营养及饲养的气候影响导致内分泌激素(Hormones)的分泌异常,而造成产肉、产蛋、产乳等产量的低下及繁殖上的障碍,致如何解决孩童的成长及成人贺尔蒙的失调及提升乳、肉及蛋的生产为目前重要研究探讨课题。今专利技术人经多年来的深入探讨及研究,终于研发一种制程严谨、质量稳定及效果佳,可诱导促进人及动物内分泌腺分泌多量内分泌素(如生长激素(GH)及激性腺素如:FSH、LH&LactationH等)的生理活性诱导物质(Bio-activeInducematter)简称BAIM,以促使人类的健康幸福及取代目前使用添加瘦肉精或合成贺尔蒙来增加乳、肉、蛋产量危害人类健康的替代方案以造福人类。
技术实现思路
本专利技术所要解决的主要技术问题在于,克服现有技术存在的上述缺陷,而提供一种根霉菌胞内生理活性诱导物质的萃取方法及应用,供诱导促进人及动物体内分泌腺分泌多量内分泌素,如生长激素(GH)及激性腺素(FSH,LH&LactationH等)的生理活性诱导物质(BAIM)以促进人类的健康及取代目前使用添加瘦肉精或合成荷尔蒙来增加乳、肉、蛋产量危害人类健康的替代方案,并造福人群。本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案是:一种根霉菌胞内生理活性诱导物质的萃取方法及应用,包括:根霉菌的培养。马铃薯萃取液及培养基制备。马铃薯萃取液制备。将马铃薯以自来水洗净及削皮后,将每粒马铃薯粗切成8块,再以蒸馏水与马铃薯重量混合(2∶1)。放入蒸煮锅中100℃加热60分钟,使其总重量剩为2公斤。经不锈钢细网目过滤及取滤液,将滤液经6,000xg离心分离15分钟,取其上清液。前述步骤上清液经0.45μm过滤膜过滤,其滤液分装置放于-20℃冰柜保存备用。改良式固体SabouraudDextroseAgar培养基配制:50g/LDextrose、15g/LPeptone、15g/LBactoagar、10%马铃薯萃取液、10g/Lyeastextractpower及2%脱脂奶粉等充份搅拌混合。经高压蒸汽灭菌釜灭菌121℃、15磅压力、15分钟。液化培养基在50℃水浴后分装于90X15mm培养皿中使其固化。改良式液体SabouraudDextroseAgar培养基配制:50g/LDextrose、15g/LPeptone、10%马铃薯萃取液、10g/Lyeastextractpower及2%脱脂奶粉等充份搅拌混合。经高压蒸汽灭菌釜灭菌121℃、15磅压力、15分钟。液化培养基灭菌完成后放置于4℃冷藏保存。培养技术。将根霉菌培养于改良式液体SabouraudDextroseAgar培养基中,放置在恒温箱30℃回转式振荡培养5日。取0.2mL菌液涂抹在一改良本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种根霉菌胞内生理活性诱导物质的萃取方法及应用,其特征在于:包括菌体的培养、菌体的冲洗、菌体的纯化、菌体的破壁及生理活性诱导物质的萃取、纯化、冷冻喷雾干燥等,并应用于人体及动物产乳、肉、蛋的效益提升。
【技术特征摘要】
1.一种根霉菌胞内生理活性诱导物质的萃取方法及应用,其特征在
于:包括菌体的培养、菌体的冲洗、菌体的纯化、菌体的破壁及生理活
性诱导物质的萃取、纯化、冷冻喷雾干燥等,并应用于人体及动物产乳、
肉、蛋的效益提升。
2.根据权利要求1所述的一种根霉菌胞内生理活性诱导物质的萃取
方法及应用,其特征在于,所述菌体的培养,是将根霉菌培养于改良式
液体的培养基中,置放于30℃恒温箱内回转振荡培养5日后,取菌液涂
抹在一改良式固体培养基中,静置于30℃恒温箱中,再培养5日后,刮
取白色菌落,并置入无菌磷酸缓冲溶液中,成悬浮液。
3.根据权利要求1所述的一种根霉菌胞内生理活性诱导物质的萃取
方法及应用,其特征在于,所述菌体胞内生理活性诱导物质的萃取是将
根霉菌悬浮液10000xg转数离心机进行4℃以下的离心10分钟,后再取
其菌体沉淀物,再连续进行离心...
【专利技术属性】
技术研发人员:施宗雄,郑长义,林德田,
申请(专利权)人:施宗雄,
类型:发明
国别省市:中国台湾;71
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