一种鸦胆子油乳、制备方法及应用技术

本发明专利技术涉及一种鸦胆子油乳、制备方法及应用，属于中药制剂技术领域。本发明专利技术通过改变辅料的种类和用量，设计了一种新型的鸦胆子油乳，该剂型选用的辅料价格低，辅料使用量小，且新剂型的抗肿瘤效果更好，其组成为：鸦胆子油0.5ml、吐温‑80 0.12ml、甘油0.125ml、余量为无菌水补足至5ml。本发明专利技术中的鸦胆子油乳，其抗肿瘤效果优于目前市场上常用的鸦胆子油乳注射剂，且吐温‑80作为辅料的使用量是现有产品中豆磷脂用量的一半，吐温‑80的用量极低，符合注射剂中关于吐温‑80用量的要求。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种鸦胆子油乳、制备方法及应用，属于中药制剂

技术介绍
鸦胆子是苦木科鸦胆子属植物Bruceajavanica(L.)Merr的成熟果实，又名老鸦胆，苦参子等，其味苦、性寒，有小毒，归大肠、肝经。鸦胆子具有清热解毒、截疟、止痢、腐蚀赘疵的功效。用于治疗热性赤痢或便血、疟疾、鸡眼等症。现代药理学研究证明鸦胆子中含有大量的苦木内酯类化合物，这类化合物具有抗疟疾、抗阿米巴痢疾、拒食素、杀虫剂、抗炎和抗癌等生物活性。鸦胆子油主要存在于鸦胆子仁中，由鸦胆子成熟过程中的糖类转化而成。鸦胆子含油量约为20％，其主要由油酸、亚油酸、硬脂酸和棕榈酸等组成。鸦胆子油在临床上主要用于辅助治疗癌症，对多种肿瘤均有较好的疗效，如肺癌、胃癌、肝癌、结肠癌、直肠癌、乳腺癌、食道癌等。目前，鸦胆子油作为注射液的主要剂型为鸦胆子油乳剂，其辅料主要为豆磷脂和甘油，其中豆磷脂的豆磷脂的价格高，且使用量较大，且该剂型的主要抗肿瘤有效成分为鸦胆子油，辅料的作用仅为保持剂型稳定性，对治疗作用无贡献。
技术实现思路
本专利技术的目的即是针对上述问题，通过改变辅料的种类和用量，设计了一种新型的鸦胆子油乳，该剂型选用的辅料价格低，辅料使用量小，且新剂型的抗肿瘤效果更好。本专利技术的
技术实现思路
一为一种鸦胆子油乳，其组成为：鸦胆子油0.5ml、吐温-800.12ml、甘油0.125ml、余量为无菌水补足至5ml。本专利技术的
技术实现思路
二为一种制备鸦胆子油乳的方法，具体步骤如下：鸦胆子油0.5ml中加入吐温-800.12ml、甘油0.125mL，搅拌均匀后，再逐渐加入无菌水至5mL，搅拌均匀经过滤后分装于10mL离心管中，封口。待用时经微孔滤膜灭菌即得10％鸦胆子油(mL/mL：1mL药液溶于1mL无菌蒸馏水中)油乳剂成品。本专利技术的
技术实现思路
三为鸦胆子油乳在制备抗肿瘤药物中的应用。所述的抗肿瘤药物，是指抑制原癌基因ras通路过度激活的抗肿瘤药物。有益效果通过体外抗肿瘤实验检测，本专利技术中的鸦胆子油乳，其抗肿瘤效果优于目前市场上常用的鸦胆子油乳注射剂，吐温-80的用量极低，符合注射剂中关于吐温-80用量的要求，保证了本专利技术中鸦胆子油乳的高效、安全、低价，有极大的应用开发前景。具体实施方式1仪器、试剂及实验材料1.1主要仪器XYJ80-2电动离心机(金坛市恒丰仪器厂)、THZ-80气浴恒温振荡器(金坛市恒丰仪器厂)、GR60DR型高温灭菌锅(致微仪器有限公司)、B2生物安全柜(力康生物医疗科技控股有限公司)、SY-2OOO型旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器有限公司)、倒置生物显微镜(重庆光电仪器总公司)、CHZQF(60A)型气浴恒温摇床、DZF-6020MBE型真空干燥箱、分析天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司)。1.2实验试剂石油醚(30％～60％)(天津市百世化工有限公司)、无水乙醇(分析纯)(天津市百世化工有限公司)、吐温-80(天津市光复精细化研究所)、丙三醇(烟台市双双化工有限公司)、磷酸二氢钾(天津市恒兴化学试剂制造有限公司)、磷酸氢二钠(烟台市双双化工有限公司)、磷酸氢二钾(烟台市双双化工有限公司)1.3实验材料：新鲜鸦胆子(2016年3月购于黄河药材市场，经甘肃中医药大学药学院王明伟鉴定为正品)；秀丽隐杆线虫：MT2124，基因型：Let-60(n1046sd，gf)IV，由HowardHughesMedicaLInstitute惠赠；大肠杆菌：E.coiLOP50，尿嘧啶渗漏突变株，作为秀丽隐杆线虫的食物，购于CGC(CaenorhabditisGeneticsCenter)。M9缓冲液：每升缓冲液中含15gNa2HPO4·12H2O，3gKH2PO4，5gNaCl，0.25gMgSO4·7H2O。实施例1鸦胆子油的制备根据鸦胆子提取物主要成分油酸为油性物质，一般采用有机溶剂提取法提取，常用的溶剂主要是石油醚。将鸦胆子原料严格挑选，由于鸦胆子果皮坚硬而致密，而其脂肪油含于鸦胆子仁中，提取前需将鸦胆子果皮及种子破碎。精密称取500g，置于浸药锅内，以1:6(Kg/L,其中“1”为鸦胆子粉末重量Kg，“6”为溶剂体积L)的溶剂体积比例加入3000mL石油醚，在室温下进行密封浸泡24h，期间需定期搅拌以利于有效成分充分溶解，然后进行真空抽滤得到滤液和滤渣，滤液备用，滤渣再加入原溶剂(石油醚)同体积3000mL，浸泡24h，抽滤，合并2次滤液，并分别回收溶剂得棕色的油状物，即为鸦胆子油，称重，并将其放置于-18℃冰箱中保存。通过提取，共获得鸦胆子油提取46.25g，鸦胆子油含量为9.25％，提取物颜色为棕色澄明。实施例2鸦胆子油乳的制备鸦胆子油为棕黄色、澄明的油状物液体，易溶于氯仿、乙醚，微溶于乙醇，不溶于水，其主要成份为油酸，临床制成鸦胆子油乳剂(为水包油型O/W乳剂)，乳剂粒为1μm左右，成品外观呈乳白色的均匀乳状液体。根据文献及经过筛选得到鸦胆子油乳处方鸦胆子油0.5mL，吐温-800.12mL，甘油0.125mL，无菌蒸馏水加至5mL。具体制法：鸦胆子油0.5mL加入吐温-800.12mL，甘油0.125mL，搅拌均匀后，再逐渐加入注射水至5mL，搅拌均匀经过滤后分装于10mL离心管中，封口，待用时经微孔滤膜灭菌即得10％鸦胆子油(mL/mL：1mL药液溶于1mL无菌蒸馏水中)油乳剂成品。具体筛选过程：在每一个离心管里均加入0.5mL鸦胆子油，其余试剂加入量见表1。表1鸦胆子油乳的制备试剂加入量以上制备得到的油乳的外观性状如下：鸦胆子油乳剂(为水包油型O/W乳剂)，经分析，C号鸦胆子油乳剂溶解度较好，乳剂粒为1μm左右，成品外观呈乳白色的均匀乳状液体，故本实验中所用鸦胆子油乳剂采用C号制备方法制得，即鸦胆子油0.5ml，吐温-800.12ml，甘油0.125ml，无菌水加至5ml。实施例3鸦胆子油0.5mL加入吐温-800.12mL、盐酸半胱氨酸0.05g、甘油0.125mL，搅拌均匀后，再逐渐加入注射水至5mL，搅拌均匀经过滤后分装于10mL离心管中，封口，待用时经微孔滤膜灭菌即得10％鸦胆子油(mL/mL：1mL药液溶于1mL无菌蒸馏水中)油乳剂成品。对照例1为了与现有技术对照，采用了豆磷脂作为替换吐温-80的原料，对照试验如下表2采用常规辅料制备鸦胆子油乳的加入量以上制备得到的油乳的外观性状如下：实施例4秀丽隐杆线虫1.大肠杆菌OP50培养将大肠杆菌(OP50)涂布于LB固体培养基上，置于培养箱中培养24h，后从培养箱中取出OP50培养基，用移液枪挑出1～2个单克隆菌落于LB液体培养基中，将该LB液体培养基放置于摇床中，转速180r/min37℃培养24h。2.线虫大量培养从－80℃超低温冰箱中取出一个冻存管MT2124株系线虫迅速解冻，倒于涂布了大肠杆菌OP50并已长成菌苔的培养皿(NGM)上，在20℃生化培养箱中培养至成虫。3.秀丽隐杆线虫的同步化处理用M9缓冲液将处于产卵阶段的秀丽隐杆线虫从培养皿上冲洗下来，转至10mL离心管中，静置约5min左右，待线虫沉降后，吸出上清液，弃去。加入8mL秀丽隐杆线虫裂解液(1moL/mLNaOH∶3.2％NaClO＝1:1，V/V，可根据实际情况加减)，漩涡震荡4～本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种鸦胆子油乳，其特征在于，组成为：鸦胆子油0.5ml、吐温‑80 0.12ml、甘油0.125ml、余量为无菌水补足至5ml。

【技术特征摘要】
1.一种鸦胆子油乳，其特征在于，组成为：鸦胆子油0.5ml、吐温-800.12ml、甘油0.125ml、余量为无菌水补足至5ml。2.权利要求1所述的鸦胆子油乳的制备方法，包括如下步骤：鸦胆子油0.5ml中加入吐温-800.12ml、甘油0.125m...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘东玲，吴国泰，王瑞琼，包婧婧，刘雪枫，马骏，
申请(专利权)人：甘肃中医药大学，
类型：发明
国别省市：甘肃;62