一种药用二萜化合物及其制备方法技术

本发明专利技术涉及从裸花紫珠的干燥地上部分中分离得到的一种二萜类化合物及其制备方法。该化合物为首次报道，是一种结构新颖的二萜类化合物，可以从裸花紫珠的干燥地上部分中提取、分离纯化得到。体外试验证明该化合物通过抑制细胞增殖及诱导细胞凋亡发挥对人脑恶性胶质母细胞瘤U251细胞的抑制作用，可以用来开发成治疗神经胶质瘤的药物。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于药物
，具体涉及从裸花紫珠的干燥地上部分中分离得到的一种二萜类化合物及其制备方法。
技术介绍
裸花紫珠CallicarpanudifloraHook.etArn.为马鞭草科紫珠属植物，生于平地至海拔1200m的山坡、路旁、谷地、溪边或灌木林丛中，在年平均温度15～25℃、湿度较大的环境生长良好，国内主要分布于广东、广西、海南等地，在海南产于定安、儋州、澄迈、白沙、昌江、东方、三亚、陵水、保亭、琼中等地，其中以海南五指山的为上品；国外主要分布于印度、中南半岛、马来半岛及新加坡等。裸花紫珠药用部位为地上干燥部分，是一种海南大宗性地道药材，同时也是海南黎族医生常用药材之一。裸花紫珠全年均可采收，除去杂质，晒干，枝叶有抗菌止血、消炎解毒、散瘀消肿、驱风祛湿之功效，主治化脓性炎症、急性传染性肝炎、呼吸道及消化道出血、创伤出血等症，外用治烧、烫伤及外伤出血等。近年来，国内外对裸花紫珠化学成分的研究报道较少，从中分离的成分主要有黄酮类、萜类、挥发油和酚类等。裸花紫珠中黄酮类化合物主要有木犀草素及其配糖体。裸花紫珠所含萜类化合物主要有：环烯醚萜类化合物，二萜类化合物和三萜类化合物等。裸花紫珠的药理活性有止血、抗炎、抑菌、细胞毒活性、增强免疫等。我国医药市场上有裸花紫珠片、裸花紫珠栓剂等制剂，在皮肤科、妇科炎症的治疗和术后止血等方面具有较好的治疗效果。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种从裸花紫珠的干燥地上部分中分离得到的一种二萜类化合物，含其的药物组合物及其制备方法和应用。本专利技术的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：一种药用二萜化合物，它具有下述结构式的化合物(Ⅰ)：所述的化合物(Ⅰ)的制备方法，包含以下操作步骤：(a)将裸花紫珠的干燥地上部分粉碎，用70～80％乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；(b)步骤(a)中乙酸乙酯萃取物用大孔树脂除杂，先用10％乙醇洗脱6个柱体积，再用70％乙醇洗脱8个柱体积，收集70％洗脱液，减压浓缩得70％乙醇洗脱浓缩物；(c)步骤(b)中70％乙醇洗脱浓缩物用正相硅胶分离，依次用体积比为40:1、20:1、10:1和5:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到4个组分；(d)步骤(c)中组分4用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为8:1、5:1和2:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；(e)步骤(d)中组分2用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离，用体积百分浓度为70％的甲醇水溶液等度洗脱，收集8～12个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到纯的化合物(Ⅰ)。进一步地，所述用乙醇热回流提取采用的乙醇浓度为75％。进一步地，所述大孔树脂为AB-8型大孔吸附树脂。本专利技术化合物用作药物时，可以直接使用，或者以药物组合物的形式使用。直接使用时，化合物(Ⅰ)通过抑制细胞增殖及诱导细胞凋亡发挥对人脑恶性胶质母细胞瘤U251细胞的抑制作用。以药物组合物的形式使用时，该药物组合物含有治疗有效量的本专利技术化合物(Ⅰ)，其余为药物学上可接受的、对人和动物无毒和惰性的可药用载体和/或赋形剂。所述的可药用载体或赋形剂是一种或多种选自固体、半固体和液体稀释剂、填料以及药物制品辅剂。将本专利技术的药物组合物以单位体重服用量的形式使用。本专利技术药物可通过口服或注射的形式施用于需要治疗的患者。用于口服时，可将其制成片剂、缓释片、控释片、胶囊、滴丸、微丸、混悬剂、乳剂、散剂或颗粒剂、口服液等；用于注射时，可制成灭菌的水性或油性溶液、无菌粉针、脂质体或乳剂等。研究表明，化合物(Ⅰ)作为有效成分制备的药物组合物副作用将大大减小，而且在治疗胶质瘤的临床药物提供一种新的选择。附图说明图1为化合物(Ⅰ)结构式；图2为化合物(Ⅰ)计算ECD和实验ECD图；图3为化合物(Ⅰ)处理后U251细胞洞凋亡率的变化。具体实施方式下面结合实施例进一步说明本专利技术的实质性内容，但并不以此限定本专利技术保护范围。尽管参照较佳实施例对本专利技术作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本专利技术的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本专利技术技术方案的实质和范围。主要材料、试剂来源及仪器类型：乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷为分析纯，购自上海凌峰化学试剂有限公司，甲醇，分析纯，购自江苏汉邦化学试剂有限公司。实施例1：化合物(Ⅰ)分离制备及结构确证(a)裸花紫珠的干燥地上部分(10kg)粉碎，用75％乙醇热回流提取(25L×3次)，合并提取液，浓缩至无醇味(6L)，依次用石油醚(6L×3次)、乙酸乙酯(6L×3次)和水饱和的正丁醇(6L×3次)萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物(377g)和正丁醇萃取物；(b)步骤(a)中乙酸乙酯萃取物用AB-8大孔树脂除杂，先用10％乙醇洗脱6个柱体积，再用70％乙醇洗脱8个柱体积，收集70％洗脱液，减压浓缩得70％乙醇洗脱浓缩物(129g)；(c)步骤(b)中70％乙醇洗脱浓缩物用正相硅胶分离，依次用体积比为40:1(8个柱体积)、20:1(8个柱体积)、10:1(8个柱体积)和5:1(10个柱体积)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到4个组分；(d)步骤(c)中组分4(24g)用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为8:1(8个柱体积)、5:1(10个柱体积)和2:1(8个柱体积)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；(e)步骤(d)中组分2(15g)用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离，用体积百分浓度为70％的甲醇水溶液等度洗脱，收集8～12个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到纯的化合物(Ⅰ)(42mg)。结构确证：HR-ESIMS显示[M+Na]+为m/z449.1608，结合核磁特征可得分子式为C24H26O7，不饱和度为12。核磁共振氢谱数据δH(ppm，DMSO-d6，600MHz)：H-1(5.58，s)，H-3(2.18，m)，H-3(1.96，m)，H-6(5.47，d，J＝6.0)，H-7(5.12，d，J＝6.0)，H-11(6.92，s)，H-15(6.74，d，J＝2.4)，H-16(7.58，d，J＝2.4)，H-17(2.45，s)，H-18(1.11，s)，H-19(1.11，s)，H-20(1.47，s)，1-OCOCH3(1.91，s)，6-OCOCH3(2.14，s)；核磁共振碳谱数据δC(ppm，DMSO-d6，125MHz)：91.7(CH，1-C)，201.3(C，2-C)，43本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种药用二萜化合物，其特征在于：具有下述结构式的化合物(Ⅰ)：

【技术特征摘要】
1.一种药用二萜化合物，其特征在于：具有下述结构式的化合物(Ⅰ)：
2.权利要求1所述的药用二萜化合物的制备方法，其特征在于包含以下操作步骤：(a)
将裸花紫珠的干燥地上部分粉碎，用70～80％乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，
依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物
和正丁醇萃取物；(b)步骤(a)中正丁醇取物用大孔树脂除杂，先用10％乙醇洗脱6个柱体
积，再用70％乙醇洗脱8个柱体积，收集70％洗脱液，减压浓缩得70％乙醇洗脱浓缩物；(c)
步骤(b)中70％乙醇洗脱浓缩物用正相硅胶分离，依次用体积比为40:1、20:1...

【专利技术属性】
技术研发人员：王赛波，
申请(专利权)人：温州统益生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33