一种大花月季组织培养的培养基及方法技术

本发明专利技术涉及组织培养技术领域，特别涉及一种大花月季组织培养的培养基及方法。该大花月季组织培养的培养基包括分化培养基、继代培养基和生根培养基；分化培养基为：含有0.5～2.0mg/L 6‑BA、0.1mg/L NAA、0.1～0.3mg/L TDZ的MS培养基；继代培养基为：含有1.0mg/L 6‑BA和0.1～0.5mg/L NAA的MS培养基；生根培养基为：含有0.2～1.0mg/L NAA的MS培养基。采用本发明专利技术提供的培养基配方可显著提高大花月季的诱导分化率、外植体增殖系数及生根率。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及组织培养
，特别涉及一种大花月季组织培养的培养基及方法。
技术介绍
大花月季，别名香水月季、壮花月季、观赏月季，是蔷薇属植物，适宜在阳光充足、空气流通的环境中生长，它对土壤要求不严。品种众多，是现代月季的主体部分。其特征是：植株健壮，单朵或群花，花朵大，花型高雅优美，花色众多、鲜艳明快，具有芳香气味，观赏性强。主产地为河南省南阳市，山东、云南、江苏、北京、上海等地也有生产。大花月季比较常见的繁殖方式是嫁接、扦插。月季嫁接苗的优点是月季嫁接苗一般比扦插苗生长快3倍以上，当年就可以发育成粗壮的大株，开出标准的花朵。缺点是寿命较短，5年以上植株开始衰老，而且经常萌发砧芽。月季扦插苗的优点是扦插苗属无性繁殖，取其枝条便可生根形成一个独立的个体，其性状与母本的花色，株形，习性表现一致。但有些品种的月季很难扦插生根，或根系不发达。大花月季的组织快繁技术，在保持母本的优良性状基础上，并能快速、大量成苗。大花月季组培的关键技术就是月季外植体的消毒杀菌，及不同阶段培养基的选择。公开号为CN102422815A的中国专利公开了一种以大花香水月季茎段为外植体的植株再生方法，通过对大花香水月季中部枝条，切段、灭菌后进行继代培养一个月，再将大花香水月季无菌苗的叶片横切数刀，接种到愈伤诱导培养基上，待长出胚性愈伤组织，再在分化培养基上培养待胚性愈伤组织分化出不定芽，然后接种到壮苗培养基上，长高后接种到生根培养基上培养即形成完整植株。公开号为CN105309306A的中国专利公开了一种香水月季扩繁技术，包括：剪取香水月季的健壮枝条中部，剪成带芽的小段1～3cm长；用牙刷粘洗衣粉轻轻刷去茎段表面的泥渍，置于流水冲洗45min，置于无菌环境下用75％酒精浸泡15～30s，并用无菌水冲洗一遍；次氯酸钠溶液消毒后，切去茎段头尾两端，接种于含有6-BA、NAA的MS培养基上，然后在增殖、壮苗、生根、开花培养基上培养。但采用上述分化、继代及生根培养基对大花月季进行组织培养的诱导分化率、外植体增殖系数及生根率较低。因此，研发一种可提高大花月季诱导分化率、外植体增殖系数及生根率的组织培养的培养基具有重要的现实意义。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术提供了一种大花月季组织培养的培养基及方法。该培养基配方可显著提高大花月季的诱导分化率、外植体增殖系数及生根率。为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：本专利技术提供了一种大花月季组织培养的培养基，包括分化培养基、继代培养基和生根培养基；分化培养基为：含有0.5～2.0mg/L6-BA、0.1mg/LNAA、0.1～0.3mg/LTDZ、20～30g/L蔗糖和7～8g/L琼脂的MS培养基，pH值为5.8；继代培养基为：含有1.0mg/L6-BA和0.1～0.5mg/LNAA、20～30g/L蔗糖和7～8g/L琼脂的MS培养基，pH值为5.8；生根培养基为：含有0.2～1.0mg/LNAA、20～30g/L蔗糖和7～8g/L琼脂的MS培养基，pH值为5.8。6-BA是6-苄氨基腺嘌呤，为人工合成细胞分裂素，具有抑制植物叶内叶绿素、核酸、蛋白质分解，保绿防老；氨基酸、生长素、无机盐等向处理部位调运等多种效能，广泛用农业、树和园艺作物从发芽收获各阶段。萘乙酸(1-Naphthylaceticacid)，简称NAA，是一种有机化合物，它是植物生长调节剂中的生长素类似物，常用于商用的发根粉或发根剂中，在植物使用扦插法繁殖时使用。它也可用于植物组织培养。其是广谱型植物生长调节剂，能促进细胞分裂与扩大，诱导形成不定根增加座果，防止落果，改变雌、雄花比率等。可经叶片、树枝的嫩表皮，种子进入到植株内，随营养流输导到全株。塞苯隆，英文通用名thidiazuron，其他名称：脱叶灵、脱叶脲、Dropp、TDZ，是一种新型高效的细胞分裂素用于组培能更好的促进植物的芽分化。本专利技术将上述3种激素以特定比例添加到MS培养基中，制得分化培养基、继代培养基和生根培养基，对大花月季外植体进行组织培养时，可显著提高大花月季的诱导分化率、增殖系数及生根率，效果好于现有报道的培养基种类。优选地，本专利技术提供的分化培养基为：含有1.0mg/L6-BA、0.1mg/LNAA、0.1～0.3mg/LTDZ、30g/L蔗糖和7g/L琼脂的MS培养基；继代培养基为：含有1.0mg/L6-BA、0.3mg/LNAA、30g/L蔗糖和7g/L琼脂的MS培养基；生根培养基为：含有0.6mg/LNAA、30g/L蔗糖和7g/L琼脂的MS培养基。更优选地，分化培养基为：含有1.0mg/L6-BA、0.1mg/LNAA、0.2mg/LTDZ、30g/L蔗糖和7g/L琼脂的MS培养基；继代培养基为：含有1.0mg/L6-BA、0.3mg/LNAA、30g/L蔗糖和7g/L琼脂的MS培养基；生根培养基为：含有0.6mg/LNAA、30g/L蔗糖和7g/L琼脂的MS培养基。本专利技术还提供了一种大花月季的组织培养方法，包括如下步骤：将大花月季外植体接种到分化培养基，诱导带腋芽的外植体分化；待腋芽长至4～6cm，切成带腋芽的茎段，转接到继代培养基进行继代培养；待外植体粗壮后转接到生根培养基进行生根培养，得到组培苗；分化培养基为：含有0.5～2.0mg/L6-BA、0.1mg/LNAA、0.1～0.3mg/LTDZ、20～30g/L蔗糖和7～8g/L琼脂的MS培养基，pH值为5.8；继代培养基为：含有1.0mg/L6-BA和0.1～0.5mg/LNAA、20～30g/L蔗糖和7～8g/L琼脂的MS培养基，pH值为5.8；生根培养基为：含有0.2～1.0mg/LNAA、20～30g/L蔗糖和7～8g/L琼脂的MS培养基，pH值为5.8。优选地，本专利技术提供的分化培养基为：含有1.0mg/L6-BA、0.1mg/LNAA、0.1～0.3mg/LTDZ、30g/L蔗糖和7g/L琼脂的MS培养基；继代培养基为：含有1.0mg/L6-BA、0.3mg/LNAA、30g/L蔗糖和7g/L琼脂的MS培养基；生根培养基为：含有0.6mg/LNAA、30g/L蔗糖和7g/L琼脂的MS培养基。更优选地，分化培养基为：含有1.0mg/L6-BA、0.1mg/LNAA、0.2mg/LTDZ、30g/L蔗糖和7g/L琼脂的MS培养基；继代培养基为：含有1.0mg/L6-BA、0.3mg/LNAA、30g/L蔗糖和7g/L琼脂的MS培养基；生根培养基为：含有0.6mg/LNAA、30g/L蔗糖和7g/L琼脂的MS培养基。在本专利技术提供的一些实施例中，将大花月季外植体接种到分化培养基之前还包括：采取大花月季枝条进行消毒处理，切成1～1.5cm的带腋芽的茎段，得到大花月季外植体。作为优选，大花月季外植体的采取时间为每年4月上旬至5月上旬。采摘的时间早，外植体太嫩，后期组培瓶苗长势弱，采摘时间晚，外植体木质化，接种后易长菌且生长缓慢。作为优选，大花月季外植体选择幼嫩的枝条，避免采取花芽、腋芽已经开始分化的外植体。作为优选，消毒处理具体为：将大花月季枝条本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种大花月季组织培养的培养基，其特征在于，包括分化培养基、继代培养基和生根培养基；所述分化培养基为：含有0.5～2.0mg/L 6‑BA、0.1mg/L NAA、0.1～0.3mg/L TDZ、20～30g/L蔗糖和7～8g/L琼脂的MS培养基，pH值为5.8；所述继代培养基为：含有1.0mg/L 6‑BA和0.1～0.5mg/L NAA、20～30g/L蔗糖和7～8g/L琼脂的MS培养基，pH值为5.8；所述生根培养基为：含有0.2～1.0mg/L NAA、20～30g/L蔗糖和7～8g/L琼脂的MS培养基，pH值为5.8。

【技术特征摘要】
1.一种大花月季组织培养的培养基，其特征在于，包括分化培养基、继代培养基和生根培养基；所述分化培养基为：含有0.5～2.0mg/L6-BA、0.1mg/LNAA、0.1～0.3mg/LTDZ、20～30g/L蔗糖和7～8g/L琼脂的MS培养基，pH值为5.8；所述继代培养基为：含有1.0mg/L6-BA和0.1～0.5mg/LNAA、20～30g/L蔗糖和7～8g/L琼脂的MS培养基，pH值为5.8；所述生根培养基为：含有0.2～1.0mg/LNAA、20～30g/L蔗糖和7～8g/L琼脂的MS培养基，pH值为5.8。2.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述分化培养基为：含有1.0mg/L6-BA、0.1mg/LNAA、0.1～0.3mg/LTDZ、30g/L蔗糖和7g/L琼脂的MS培养基；所述继代培养基为：含有1.0mg/L6-BA和0.3mg/LNAA、30g/L蔗糖和7g/L琼脂的MS培养基；所述生根培养基为：含有0.6mg/LNAA、30g/L蔗糖和7g/L琼脂的MS培养基。3.一种大花月季的组织培养方法，其特征在于，包括如下步骤：将大花月季外植体接种到分化培养基，诱导带腋芽的外植体分化；待腋芽长至4～6cm，切成带腋芽的茎段，转接到继代培养基进行继代培养；待外植体粗壮后转接到生根培养基进行生根培养，得到组培苗；所述分化培养基为：含有0.5～2.0mg/L6-BA、0.1mg/LNAA、0.1～0.3mg/LTDZ、20～30g/L蔗糖和7～8g/L琼脂的MS培养基；所述继代培养基为：含有1.0mg/L6-BA和0.1～0.5mg/...

【专利技术属性】
技术研发人员：张丹，张茂，孟伟芳，赵志汝，王东超，
申请(专利权)人：河南红枫种苗股份有限公司，
类型：发明
国别省市：河南;41