一种木槿酵素的制备方法和用途技术

本发明专利技术涉及酵素制备技术领域，还涉及该酵素在护肤品领域的应用。一种木槿酵素的制备方法，以木槿花、木槿叶、木槿茎为原料，灭菌后发酵，在发酵时先用枯草芽孢杆菌发酵一段时间后再加入酵母菌和乳酸菌继续进行发酵，发酵过程加入氮源、碳源及无机盐，发酵后灭菌、过滤，超滤膜过滤，得到木槿酵素。本发明专利技术的制备方法能够明显提高产物中的氨基酸和黄酮的含量，具有更显著的抗衰老、保湿、以及恢复皮肤弹性的效果。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及酵素制备
，还涉及该酵素在护肤品领域的应用。
技术介绍
随着我国社会经济的健康发展，人们对个人形象方面愈发的关注，人类健康的肌肤是滋润、细腻、柔软、富有弹性和光泽，具有天然的保护功能，但随着年龄的增长，色素沉着自由基的积累，使得皮肤黯淡、衰老、失去光泽和弹性。因此抗氧化抗衰老的化妆品有着深远的市场前景。木槿，为锦葵科木槿属落叶灌木或小乔，其花、果、根、叶和皮均可入药。木槿花不仅有观赏价值，而且具有使用和药用价值，木槿叶的要用价值在我国早有记载。但木槿花在美容方面的应用较少，木槿花酵素在抗衰老抗自由基方面更少。根据文献记载，每100g木槿花中含水分92g蛋白质2.8g，脂肪0.3g，糖类3.26g，热量133.98kJ，灰分1.2g，粗纤维0.8g，钙14mg、磷56mg、铁1.2mg，此外还有胡萝卜素、氨基酸、黄酮类以及多种维生素等，具有优越的清除自由基、抗氧化、保湿抗皱等护肤作用，是极佳的护肤原材料。目前对于木槿花中活性成分的提取分离研究甚少，且提取方法中较多使用有机溶剂，提取物中有机溶剂的残留以及处理使其成为提取过程中一种缺陷，提取效率不甚理想，造成了原材料的浪费，不能充分提取木槿花中的抗衰老和护肤成分，同时污染环境；植物发酵在获得所需要发酵产物同时，保证能够发酵产物的安全性以及不产生对环境有害的物质，发酵产物也不会对人体产生危害。用发酵工艺对木槿花进行发酵处理，提高木槿花原料的利用率，避免了原材料的浪费，同时提高了氨基酸、黄酮类等活性物的产量，并且控制了木槿花酵素的分子量，有效提高了活性物成分在皮肤上吸收率。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供一种木槿酵素的制备方法，还提供该方法制备的木槿酵素的应用。本专利技术制备的木槿酵素能够明显提高产物中的氨基酸和黄酮的含量，具有更显著的抗衰老、保湿、以及恢复皮肤弹性的效果。本专利技术所要解决的技术问题通过以下技术方案予以实现：一种木槿酵素的制备方法，制备步骤为：（1）将木槿花、木槿叶、木槿茎按照30-50：10-20：10-20的重量份数比清洗后捣碎，烘干，过筛；（2）将步骤（1）所得物料采用紫外灯照射法进行灭菌处理，照射时常为30-60min；（3）将步骤（2）所得物料放入发酵桶中，加入无菌水，搅拌均匀，将温度控制在27℃-37℃，调节pH值至5-7；（4）加入枯草芽孢杆菌0.7-1.2份、氮源5-10份、碳源0.5-3份、质量百分比浓度为1%的无机盐溶液0.01-0.2份发酵；（5）将步骤（4）所得物料加入酵母菌0.2-0.4份，和乳酸菌1.3-1.8份继续进行发酵，发酵过程中避免光照，控制摇床转速150-200rpm，发酵7-10天，直至发酵桶内无新气泡产生；（6）发酵结束进行灭菌处理后，离心过滤出发酵液和滤渣，得到粗发酵液；（7）用超滤膜过滤粗发酵液，得到木槿酵素溶液。进一步的，所述木槿花为花瓣完整，色泽艳丽新鲜并且盛开期的木槿花。进一步的，步骤（4）所述碳源为葡萄糖、乳糖、蔗糖中的一种或多种。进一步的，步骤（4）所述氮源为尿素、NH4Cl中的一种或两种。进一步的，步骤（4）中的无机盐溶液为下列溶液的1%水溶液：MgSO4溶液、Na2HPO4溶液,K2SO4溶液,MnSO4溶液中的一种或几种。进一步的，步骤（4）中枯草芽孢杆菌发酵时长为12-28小时。进一步的，步骤（4）中发酵时长优选为20小时。进一步的，步骤（6）所述灭菌处理，是将超声波细胞粉碎仪的超声波发生器置于混合液中，超声功率400-600w，频率为50-100KHz，工作10-20秒，间隔时间10秒，总超声时间为20-30min，进行细胞破壁。步骤（7）所述的超滤膜截流分子量小于10000Da。一种上述制备方法制备的木槿酵素在个人护理组合物中的应用。本专利技术具有如下有益效果：1.选取选用盛开期的木槿花，花瓣中还原糖以及黄酮的含量最高，能够有效提高制备木槿酵素的质量。同时使用木槿叶、木槿茎作为发酵原料，是因为木槿叶、木槿茎中也含有丰富的氨基酸、黄酮等营养物质。2．发酵步骤中加入枯草芽孢杆菌能为后续的加入的乳酸菌、酵母菌发酵提供蛋白酶，优选了枯草芽孢杆菌的发酵时长，提高了枯草芽孢杆菌存活率减少了菌种用量以及增加了蛋白酶的产率，从而提高木槿酵素中氨基酸和黄酮的含量。3．无机盐、碳源、氮源的加入提高了菌种的存活时间，提高了酵素的活性物含量。通过超声波进行细胞破壁，保留了发酵过程中合成分泌的活肤成分以及胞内活性产物。其中，无机盐是微生物生命物质的必要成分，适量添加无机盐可以促进微生物的生长，同时也可以促进微生物分泌多种酶类和营养物质。4.通过用超滤膜控制通过产物的分子量范围，优化了木槿酵素质量，使产物更易被皮肤吸收利用。5.在生产工艺上利用生物发酵技术，不使用任何有机溶剂，同时避免了发酵过程和提取工程中对环境的污染问题。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术进行详细的说明，实施例仅是本专利技术的优选实施方式，不是对本专利技术的限定。实施例1一种木槿酵素的制备方法，制备步骤为：（1）将木槿花、木槿叶、木槿茎按照35：18：13的重量份数比清洗后捣碎，烘干，过200m筛网；其中木槿花选用花瓣完整，色泽艳丽新鲜并且盛开期的木槿花；（2）将步骤（1）所得物料采用紫外灯照射法进行灭菌处理，照射时常为30-60min；（3）将步骤（2）所得物料放入发酵桶中，加入无菌水，搅拌均匀，将温度控制在27℃-37℃，调节pH值至5-7；（4）加入枯草芽孢杆菌0.9重量份、氮源（尿素）5重量份、碳源（葡萄糖）0.5重量份、质量百分比浓度为1%的无机盐溶液（MgSO4溶液）0.01重量份发酵20h；（5）将步骤（4）所得物料加入酵母菌0.3重量份和乳酸菌1.5重量份继续进行发酵，发酵过程中避免光照，控制摇床转速150-200rpm，发酵7-10天，直至发酵桶内无新气泡产生；（6）发酵结束进行灭菌处理后，离心过滤出发酵液和滤渣，得到粗发酵液；其中灭菌处理，具体是将超声波细胞粉碎仪的超声波发生器置于混合液中，超声功率400-600w，频率为50-100KHz，工作10-20秒，间隔时间10秒，总超声时间为20-30min，进行细胞破壁。（7）用截流分子量小于10000Da的超滤膜过滤粗发酵液，得到木槿酵素溶液。对比例1对比例1的制备工艺与实施例1相同，但对比例1过程中不添加无机盐溶液。对比例2对比例2的制备工艺与实施例1相同，但对比例2过程中枯草芽孢杆菌与乳酸菌、酵母菌是同时加入，即步骤（4）和（5）合并，三种菌同时加入，同时发酵。表1为实施例和对比例所的酵素的氨基酸和黄酮含量测试结果。试验编号氨基酸含量（mg/g）黄酮含量（mg/g）实施例11.230.608对比例10.850.481对比例21.020.340可见，实施例1所得酵素种的氨基酸含量和黄酮含量明显高于对比例1和对比例2，可见，在发酵过程中加入无机盐和在发酵过程中先加入枯草芽孢杆菌先发酵一段时间再加入酵母菌和乳酸菌，能够显著提高所得酵素种的氨基酸含量和黄酮含量。实施例2一种添加有实施例1制备的木槿酵素的膏霜，其制备方法如下：1.将油相：硬脂酸甘油酯/PEG-100硬脂酸酯、辛酸/癸酸甘油三酯、乳木果油，称量，加热至75-80℃；2.将水相：本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种木槿酵素的制备方法，其特征在于，制备步骤为：（1）将木槿花、木槿叶、木槿茎按照30‑50：10‑20：10‑20的重量份数比清洗后捣碎，烘干，过筛；（2）将步骤（1）所得物料采用紫外灯照射法进行灭菌处理，照射时常为30‑60min；（3）将步骤（2）所得物料放入发酵桶中，加入无菌水，搅拌均匀，将温度控制在27℃‑37℃，调节pH值至5‑7；（4）加入枯草芽孢杆菌0.7‑1.2份、氮源5‑10份、碳源0.5‑3份、质量百分比浓度为1%的无机盐溶液0.01‑0.2份发酵；（5）将步骤（4）所得物料加入酵母菌0.2‑0.4份，和乳酸菌1.3‑1.8份继续进行发酵，发酵过程中避免光照，控制摇床转速150‑200rpm，发酵7‑10天，直至发酵桶内无新气泡产生；发酵结束进行灭菌处理后，离心过滤出发酵液和滤渣，得到粗发酵液；（7）用超滤膜过滤粗发酵液，得到木槿酵素溶液。

【技术特征摘要】
1.一种木槿酵素的制备方法，其特征在于，制备步骤为：（1）将木槿花、木槿叶、木槿茎按照30-50：10-20：10-20的重量份数比清洗后捣碎，烘干，过筛；（2）将步骤（1）所得物料采用紫外灯照射法进行灭菌处理，照射时常为30-60min；（3）将步骤（2）所得物料放入发酵桶中，加入无菌水，搅拌均匀，将温度控制在27℃-37℃，调节pH值至5-7；（4）加入枯草芽孢杆菌0.7-1.2份、氮源5-10份、碳源0.5-3份、质量百分比浓度为1%的无机盐溶液0.01-0.2份发酵；（5）将步骤（4）所得物料加入酵母菌0.2-0.4份，和乳酸菌1.3-1.8份继续进行发酵，发酵过程中避免光照，控制摇床转速150-200rpm，发酵7-10天，直至发酵桶内无新气泡产生；发酵结束进行灭菌处理后，离心过滤出发酵液和滤渣，得到粗发酵液；（7）用超滤膜过滤粗发酵液，得到木槿酵素溶液。2.根据权利要求1所述的木槿酵素的制备方法，其特征在于：木槿花为花瓣完整，色泽艳丽新鲜并且盛开期的木槿花。3.根据权利要求1所述的木槿酵素的制备方法，其特征在于：步骤（4）所述碳源为葡萄糖、...

【专利技术属性】
技术研发人员：练英铎，彭春燕，
申请(专利权)人：澳宝化妆品惠州有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44