本发明专利技术公开了沙门氏菌噬菌体和噬菌体抗菌组合物及其应用，本发明专利技术提供的噬菌体为肠炎沙门氏菌噬菌体LPSE1和鼠伤寒沙门氏菌噬菌体LPST10，无论是噬菌体LPSE1还是LPST10，均可对沙门氏菌具有良好的抑制作用，同时其对pH和温度的耐受性均较好，在食品体系中的应用实例也证实，当其用做于抑菌剂时具备良好的效果。将该两种噬菌体混合后，发现噬菌体之间存在协同作用，较之于单个噬菌体具有更有益的抑制作用。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及食品安全领域，具体涉及沙门氏菌噬菌体和噬菌体抗菌组合物及其应用。
技术介绍
根据我国的食源性疾病检测体系数据显示，由食源性微生物引起的食品安全问题所占构成比达43％。而其中由沙门氏菌引起的食源性疾病爆发数量占70％-80％。近十年(2004-2015)美国食源性疾病监测网各地区食源性疾病暴发报告显示，全球沙门氏菌引起食源性疾病暴发率逐年上升，暴发位列第一。而世界卫生组织(WHO)则将沙门氏菌列入具有严重危害和中等危害的食物传播性病原菌并已组建全球沙门氏菌监测网(WHO-GSS)，加强了对沙门氏菌污染的监控。沙门氏菌分布广泛，血清型多达2500余种，以鼠伤寒沙门氏菌和肠炎沙门氏菌这2种对人和动物均有致病性的沙门氏菌引发沙门氏菌病的病例最多，多发于夏秋季。可通过肠道上皮细胞进入血液引发败血症，并产生内毒素，引发急性肠胃炎，食物中毒等疾病。肉与肉制品，蛋制品，乳制品，水产品及速冻食品是食源性沙门氏菌在食品体系中污染的主要来源。此外，由以上原材料或制品可能在食品运输、储藏和加工操作过程给其他产品如果蔬带来交叉污染，增加病原扩散和引起感染的风险。目前对于食源性病原的控制，可以大致在两个阶段进行控制：对于“收获前”阶段，也就是对于生产肉禽制品，乳制品的动物，主要采用化学药物(抗生素和抑菌化合物)、疫苗免疫，或剔除隔离病原阳性畜禽的方法来起到预防和控制病原的作用；对于“收获后”阶段的产品，也就是食品原材料和制品，主要通过化学方法(如：消毒剂、抗生素和抑菌物质)和物理方法(如：加热、射线和低温)来消除或控制病原。添加化合物进行抑菌的化学方法目前在全世界范围内已经收到极大的质疑和甚至禁止。如，2006年，欧盟全面禁用抗生素和生长促进剂在畜禽饲料中使用。物理方法中通过射线进行杀菌的方法的安全性一直存在争议，同时需要特殊设备，其应用也遭受质疑。最常用的热杀菌方法在某些食品原料、半成品或者制品中却无法应用，例如需要保持生鲜的原料畜禽肉、生鲜果蔬，以及生鲜鸡蛋和液蛋，他们在送达消费者和加工地之前不合适通过热处理杀菌。通过保持低温处理以上食品原料或成品的方法仅仅只能一定程度上抑制病原生长增殖，却不能杀灭病原，在合适的条件下，他们依然具有感染和导致交叉污染的风险。目前国际上开始尝试使用噬菌体来预防和控制食源性病原菌。例如，2006年，美国食品药品监督管理局(FDA)批准ListShieldTM噬菌体产品可作为食品添加剂，用于即食食品和禽肉制品中控制单核细胞增生李斯特菌污染。噬菌体是一类能特异性感染细菌且增殖速度快的病毒。其中烈性噬菌体通过特异性识别宿主菌细菌，在宿主菌体内大量繁殖并最终裂解释放大量子代噬菌体起到抑菌的效果。本研究小组研发了一种利用噬菌体防控的方法来预防和控制沙门氏菌。噬菌体具有以下优点，使得其能够在预防沙门氏菌传播过程中发挥作用：(1)其特异性强，不影响机体正常菌群；(2)绿色环保，噬菌体是由蛋白质及核酸组成的小分子，对人或动物来讲并非异源物质，其进入人或动物体内的代谢过程可被视为自然过程，对环境无污染；(3)一次使用可实现多次预防，噬菌体可以实现自我繁殖，无论在动物还是在产品上均可实现一次使用可以实现多次预防；(4)可携带性强。制备成制剂之后，不需要依赖特殊仪器设备和条件，不需要特殊保存环境。(5)应用范围广，不受应用对象和场所限制。可应用于畜禽养殖过程和场所、畜禽屠宰加工设备和场所、食品原材料运输设备、食品加工设备、食品原材料、半成品和成品。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供了一种沙门氏菌噬菌体LPSE1，所述的沙门氏菌噬菌体已送至中国典型培养物保藏中心保藏，分类命名：肠炎沙门氏菌噬菌体(Salmonellaenteritidisbacteriophage)LPSE1，保藏编号为：CCTCCNO：M2016472，保藏日期为2016年9月9日，地址：中国武汉武汉大学。本专利技术的目的在于提供了一种沙门氏菌噬菌体LPST10，所述的沙门氏菌噬菌体已送至中国典型培养物保藏中心保藏，分类命名：鼠伤寒沙门氏菌噬菌体(Salmonellatyphimuriumbacteriophage)LPST10，保藏编号为：CCTCCNO：M2016473，保藏日期为2016年9月9日，地址：中国武汉武汉大学。本专利技术还有一个目的在于提供了一种沙门氏菌噬菌体混合物，该混合物包括沙门氏菌噬菌体LPSE1和LPST10，该组合物的两种噬菌体之间存在协同作用，对沙门氏菌有良好的抑制作用。本专利技术还有一个目的在于提供了一种沙门氏菌噬菌体LPSE1的应用，包括将该噬菌体用于抑制食品中沙门氏菌的污染，或制备用于抑制沙门氏菌的药物。本专利技术还有一个目的在于提供了一种沙门氏菌噬菌体LPST10的应用；包括将该噬菌体用于抑制食品中沙门氏菌的污染，或制备用于抑制沙门氏菌的药物。本专利技术最后一个目的在于提供了一种沙门氏菌噬菌体混合物的应用，包括将该噬菌体用于抑制食品中沙门氏菌的污染，或制备用于抑制沙门氏菌的药物。为了达到上述目的，本专利技术采取以下技术措施：专利技术人自污水中分离得到两株沙门氏菌噬菌体，分别命名为沙门氏菌噬菌体LPSE1和沙门氏菌噬菌体LPST10。所述的沙门氏菌噬菌体LPSE1已送至中国典型培养物保藏中心保藏，分类命名：肠炎沙门氏菌噬菌体(Salmonellaenteritidisbacteriophage)LPSE1，保藏编号为：CCTCCNO：M2016472，保藏日期为2016年9月9日，地址：中国武汉武汉大学。所述的沙门氏菌噬菌体LPST10已送至中国典型培养物保藏中心保藏，分类命名：鼠伤寒沙门氏菌噬菌体(Salmonellatyphimuriumbacteriophage)LPST10保藏号为：CCTCCNO：M2016473，保藏日期为2016年9月9日，地址：中国武汉武汉大学。两种噬菌体在固体平板上均可以形成较大透亮空斑，边缘清晰规则。其中噬菌体LPSE1可形成具有2mm噬菌斑,而噬菌体LPST10在固体平板上直径在0.5mm左右。所述的噬菌体LPSE1和LPST10无论是单独使用还是混合使用，均能用于制备食品抑菌剂或沙门氏菌抑制剂。具体方案详见具体实施方式。与现有技术相比，本专利技术具有以下优点：(1)经富集后的噬菌体原液效价高。在本专利技术中，噬菌体LPSE1和LPST10的效价≥109pfu/mL。(2)在不同条件下，裂菌能力强。在本专利技术中，分别比较了噬菌体LPSE1和LPST10在MOI＝10，MOI＝1，MOI＝0.1，MOI＝0.01，MOI＝0.001的条件下对肠炎沙门氏菌ATCC13076和鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028的抑菌作用，并发现在不同的MOI条件下均具有一定的活性。(3)pH范围更广。在本专利技术中，噬菌体LPST10的pH稳定性范围3-13；噬菌体LPSE1的pH稳定性4-12，无论是LPST10单独使用还是两者联合使具有较宽的pH适用范围。(4)热稳定性好。在本专利技术中，噬菌体LPST10和LPSE1在30-60℃效价基本不变。综上所述，本生物制剂包含能有效抑制、裂解沙门氏菌的噬菌体，该制剂不仅能在动物处于活体状态的时候使用以预防沙门氏菌，也可以在动物成为食品原料或产品进行应用，还可以应用于养殖、和本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种沙门氏菌噬菌体，所述的沙门氏菌噬菌体为肠炎沙门氏菌噬菌体（Salmonella enteritidis bacteriophage）LPSE1，保藏编号为：CCTCC NO：M 2016472。
【技术特征摘要】
1.一种沙门氏菌噬菌体，所述的沙门氏菌噬菌体为肠炎沙门氏菌噬菌体（Salmonellaenteritidisbacteriophage）LPSE1，保藏编号为：CCTCCNO：M2016472。2.一种沙门氏菌噬菌体，所述的沙门氏菌噬菌体为鼠伤寒沙门氏菌噬菌体（Salmonellatyphimuriumbacteriophage）LPST10，保藏编号为：CCTCCNO：M2016473。3.一种沙门氏菌噬菌体混合物，该混合物包括权...
【专利技术属性】
技术研发人员：李锦铨，黄晨曦，王小红，董星星，周洋，牛晓娜，陈福生，石健春，
申请(专利权)人：华中农业大学，
类型：发明
国别省市：湖北;42
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