一种桑黄菌种复壮的方法技术

本发明专利技术涉及一种桑黄菌种复壮的方法，采用培养料内菌丝分离的方法，在桑黄栽培棚内选择子实体典型、色质纯、菇形正、无病虫害的单朵芝栽培袋；之后用3‑5%的高锰酸钾溶液擦拭栽培袋的表面；将栽培袋移入到接种箱或超净工作台内，用灭菌过的解剖刀或单刀片去掉袋子中下部0.5cm见方的袋膜；用消毒过的接种针去掉表面老菌丝，在培养料内挑取米粒大小带有菌丝的培养基，通过酒精灯火焰的无菌区接入到斜面试管的中央；最后在避光，温度25℃下培养2‑3天，选取无污染、菌丝生长健壮的试管，在无菌条件下，挑取边缘的新生菌丝转接到新的斜面培养基上培养所获的纯菌丝体。采用本发明专利技术分离得到的菌丝生长较快，抗性强，成菇率高，丰产性好。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及退化食用菌菌株的复壮，具体的讲是一种桑黄菌种复壮的方法。
技术介绍
桑黄，中药名，见《中药大辞典》。分类上属于真菌界(Fungi)、担子菌门(Basigiomycota)、刺革菌目(Hymenochaxtales)，是硬质的多孔菌，为中、日、韩等地著名的药用真菌。现代研究证实桑黄能够提高人体的免疫力，减轻抗癌剂的副作用，所以可用来辅助肿瘤病人的放疗和化疗，另外，桑黄对女性月经不调等妇科疾病也有疗效。我国人工栽培桑黄的关键技术得以突破，使得大规模人工培养桑黄得以实现，然而在生产栽培和实践过程中，必然会遇到菌种的衰退或退化问题，使菌种的优良性状在一定程度上衰退或丧失。桑黄菌株的衰退主要表现在，菌丝生长速度减慢，子实体产生率低或子实体个体矮小，畸变等。导致微生物菌株的衰退是多方面原因引起，可以是由自发突变的量变到质变的产生，可以是由环境因素不适宜导致发生变异，或者是由它种微生物的侵袭所导致，或者保藏方式不当，一味的移接、传代，而使群体中的负变异不断扩大等诸方面原因所造成。微生物菌株衰退后，需要采取复壮的方法来恢复其原有的优良性状，通常采用的方法是进行纯种分离后测定其典型性状、生产性能等指标，从已衰退的群体中筛选出少数尚未退化的个体，或通过其它的实验手段进行复壮，使退化菌株恢复原有优良性状的相应措施。在生产中桑黄菌种的提纯、复壮一般是分离子实体幼嫩边缘部分和原基进行纯化培养，此方法操作简便，但分离的菌种菌丝生长较慢，在PDA母种斜面试管培养基上需10-12天才能长满。在桑黄栽培的过程中如何解决菌种衰退，菌丝体生长速度减慢，子实体较小，畸形以及发酵过程中，所需代谢产物的产量大幅降低等问题，已经成为桑黄栽培的关键问题。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种桑黄菌种复壮的方法，利用新的方法对桑黄菌株进行复壮和提高子实体生长速度、产量。为实现上述技术目的，本专利技术采用如下技术方案：采用培养料内菌丝分离法，此方法分离得到的菌丝生长较快，抗性强，成菇率高，丰产性好。所述培养料内菌丝分离法具体操作步骤如下：（1）用栽培袋收集桑黄菌，栽培袋内有培养料；（2）用消毒液擦拭栽培袋的表面；（3）将栽培袋移入到接种箱或超净工作台内，用灭菌过的解剖刀或单刀片去掉袋子中下部0.5cm见方的袋膜；（4）从步骤（3）的切口中，用消毒过的接种针去掉桑黄菌表面老菌丝，在培养料内挑取米粒大小带有菌丝的培养料，通过酒精灯火焰的无菌区接入到斜面试管的中央；（5）在避光，温度25℃下培养2-3天，选取无污染、菌丝生长健壮的试管，在无菌条件下，挑取边缘的新生菌丝转接到新的斜面培养基上培养所获的纯菌丝体，即作为桑黄再生产用菌种。其中，所述步骤（1）中，所述收集的桑黄菌选择子实体典型、色质纯、菇形正、无病虫害的单朵桑黄菌。所述步骤（2）中，消毒液选择质量浓度为3-5%的高锰酸钾溶液。所述步骤（4）中，菌丝挑取自桑黄菌的菌管、基质、子嫩或原基部位，优选基质部位。本专利技术的培养料内菌丝分离法，分离得到的菌丝生长较快，抗性强，成菇率高，丰产性好。具体实施方式实施例1本实施例说明本专利技术培养料内菌丝分离的方法：其操作步骤如下：（1）在桑黄栽培棚内选择子实体典型、色质纯、菇形正、无病虫害的单朵用芝菌栽培袋收集桑黄菌，栽培袋内有培养料。（2）用3-5%的高锰酸钾溶液擦拭栽培袋的表面。（3）将栽培袋移入到接种箱或超净工作台内，用灭菌过的解剖刀或单刀片去掉袋子中下部0.5cm见方的袋膜。（4）用消毒过的接种针去掉表面老菌丝，在培养料内挑取米粒大小带有菌丝的培养基，通过酒精灯火焰的无菌区接入到斜面试管的中央。（5）在避光，温度25℃下培养2-3天，选取无污染、菌丝生长健壮的试管，在无菌条件下，挑取边缘的新生菌丝转接到新的斜面培养基上培养所获的纯菌丝体，即作为桑黄再生产用菌种。实施例2本实施例说明了用实施例1的方法分离出的菌种相比于常规的子实体组织分离法所获的菌种的优越之处。该菌种按常规菌种生产程序和方法，制作再生母种、原种，在相同的培养基和生长条件下进行出菇试验比较，结果表明该方法分离、纯化的菌种要优于常规的子实体组织分离法所获的菌种，试验结果如下：表1说明了不同分离部位菌种菌丝在相同平板培养基上菌丝生长情况。表1不同分离部位菌丝生长情况分离部位萌发时间（h）菌丝长速（m2/d）菌丝长势污染率（%）菌管4016.6413++1基质3617.3485++1子嫩4015.7969++3.3原基4014.1179+0由表1可见，同一栽培袋子实体的不同分离部位的菌种，经转管，接入到相同PDA平面培养基中，在相同的条件下培养，结果表明，由基质中分离获得的菌种菌丝在日生长量、菌丝活力、抗性、长势方面均明显优于其它部位分离的菌种。表2说明了不同分离部位菌种在相同栽培条件下生长发育的情况。表2不同分离部位菌种生长发育情况由表2可见，同一栽培袋子实体的不同分离部位的菌种，菌种按常规菌种生产程序及方法，经再生母种、原种，再栽培到相同培养料中，在相同的条件下培养，结果表明，由基质中分离获得的菌种菌丝长满栽培袋较快，子实体菌盖最大，但菌盖比较薄，可能是由于子实体生长较快，在栽培中若适当降低棚温，即可使菌盖加厚，生物转化率最高，说明在相同条件下，基质中分离的菌种菌丝分解与利用基质中的营养较强。通过试验结果可见，基质中分离的菌种无论是菌丝的日生长量、抗污染性，还是子实体的产量均明显优于其它的分离部位的菌种。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种桑黄菌种复壮的方法，其特征在于，采用培养料内菌丝分离法，具体步骤如下：（1）用栽培袋收集桑黄菌，栽培袋内有培养料；（2）用消毒液擦拭栽培袋的表面；（3）将栽培袋移入到接种箱或超净工作台内，用灭菌过的解剖刀或单刀片去掉袋子中下部0.5cm见方的袋膜；（4）从步骤（3）的切口中，用消毒过的接种针去掉桑黄菌表面老菌丝，在培养料内挑取米粒大小带有菌丝的培养料，通过酒精灯火焰的无菌区接入到斜面试管的中央；（5）在避光，温度25℃下培养2‑3天，选取无污染、菌丝生长健壮的试管，在无菌条件下，挑取边缘的新生菌丝转接到新的斜面培养基上培养所获的纯菌丝体，即作为桑黄再生产用菌种。

【技术特征摘要】
2016.05.16 CN 20161032056761.一种桑黄菌种复壮的方法，其特征在于，采用培养料内菌丝分离法，具体步骤如下：（1）用栽培袋收集桑黄菌，栽培袋内有培养料；（2）用消毒液擦拭栽培袋的表面；（3）将栽培袋移入到接种箱或超净工作台内，用灭菌过的解剖刀或单刀片去掉袋子中下部0.5cm见方的袋膜；（4）从步骤（3）的切口中，用消毒过的接种针去掉桑黄菌表面老菌丝，在培养料内挑取米粒大小带有菌丝的培养料，通过酒精灯火焰的无菌区接入到斜面试管的中央；（5）在避光，温度25℃下培养2-3天，选取...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴琴燕，庄义庆，陈宏洲，
申请(专利权)人：镇江市农业科学技术实业公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32