一种基于环糊精及卵磷脂为载体的番荔素纳米粒及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及一种以环糊精以及卵磷脂为载体制备的番荔素纳米粒及其制备方法和应用。所述的番荔素(番荔素总内酯或其单体成分)纳米粒采用溶剂沉淀法制备，番荔素、环糊精、卵磷脂三者之间质量比为1∶0.02～20∶0.02～20，其最优的处方组成为番荔素、环糊精、卵磷脂的组合比例为4∶2∶1(质量比)。所述番荔素纳米粒的平均粒径20‑1000nm，分散性良好；在胃肠液中及血浆中均稳定，即可口服给药，也可以静脉注射；该纳米粒显著地提高了番荔素对肿瘤细胞抑制作用，同时大大提高了体内抗肿瘤药效，具有广阔的开发前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及药物制剂领域，具体涉及一种用环糊精以及卵磷脂为载体制备的番荔素纳米粒、其制备方法及应用。
技术介绍
番荔素包括番荔素内酯(简称ACGs)及其单体bullatacin、squamostatin、annosquacin等。番荔素是从番荔枝科植物种子中提取的一系列含有35或37个碳的长链脂肪酸，并含有0到3个四氢呋喃(THF)环类似的结构。番荔枝总内酯和单体大多数展示出来很强的抗肿瘤活性，其中活性最好的单体bullatacin对肺癌A549细胞、人肝癌HepG2细胞、人宫颈癌HeLa细胞、人乳腺癌MCF-7细胞、人结肠癌Lovo细胞、肉瘤S180细胞等具有显著疗效。同时，ACGs对多药耐药的肿瘤细胞株也有较好活性。ACGs水溶性差，小于1ug/mL，难于给药，导致体内研究大大受限。已有的体内研究多采用悬浮灌胃，或者分散在植物油中口服给药，由于生物利用度低导致其疗效难以最大程度发挥。并且ACGs毒副作用大，治疗窗口窄，对大鼠的肝和肾有一定毒性。纳米粒是将药物通过不同的方法制备成纳米大小的颗粒，包括胶束、聚合物纳米粒、纳米混悬剂等。由于具有较大的表面积，药物溶出速度和程度均较高，纳米粒已成为解决难溶性药物的给药问题的主要方法之一。同时，药物多包封在纳米粒内部，进入体内之后可以在一定时间内与外界环境隔离，从而在一定程度上保护不稳定的药物，延缓代谢。如果纳米粒的粒径较小(如300nm以内)，还可由于EPR(enhancedpermeationandretention)效应而被动靶向肿瘤。因此，纳米给药系统是解决难溶性药物，尤其是难溶性抗肿瘤药物的临床应用的有效手段。
技术实现思路
为实现上述目的，本专利技术提供一种制备方法简便、稳定性高，能同时实现番荔素静脉注射和口服给药，并增强抗癌疗效的纳米粒。一种基于环糊精及卵磷脂为载体的番荔素纳米粒，由番荔素、环糊精和磷脂组成，其质量比为1∶0.02～20∶0.02～20。在本专利技术的一个优选的实施方案中，所述番荔素选自番荔素内酯、bullatacin、squamostatin或annosquacin中的一种或者两种及以上的组合。在本专利技术的一个优选的实施方案中，番荔素、环糊精和磷脂的质量比为4∶2∶1。在本专利技术的一个优选的实施方案中，所述纳米粒的平均粒径为10-1000nm，优选平均粒径为20-200nm；所述纳米粒包括但不限于纳米混悬剂、纳米晶、纳米粒、纳米聚集体等。在本专利技术的一个优选的实施方案中，所述纳米粒可制成口服制剂或静脉给药制剂。在本专利技术的一个优选的实施方案中，所述环糊精选自α-环糊精、β-环糊精或γ-环糊精中的一种或者两种及以上的组合。在本专利技术的另一个优选的实施方案中，所述环糊精选自羟丙基-β-环糊精。在本专利技术的另一个优选的实施方案中，所述环糊精选自PEG修饰的α-、β-或γ-环糊精，其中PEG的分子量范围是200-10000，优选分子量范围是400-5000，更优选分子量范围是600-2000。在本专利技术的另一个优选的实施方案中，所述卵磷脂选自大豆卵磷脂，蛋黄卵磷脂中的一种或两种的组合，其中优选大豆卵磷脂。在本专利技术的另一个优选的实施方案中，为进一步改善载药纳米粒的性质，还可以加入有其他药剂上可以接受的各种辅料作为非必需的辅助稳定剂，这些辅料包括但不限于PCL-PEG、ChoI-PEG、聚乙烯醇等。另一方面，本专利技术提供了一种基于环糊精及卵磷脂为载体的番荔素纳米粒的制备方法，所述方法为溶剂沉淀法或反溶剂法，包括搅拌注入或者超声注入或者二者结合来制备。在本专利技术的一个优选的实施方案中，所述方法具体步骤包括：(1)将卵磷脂溶于能与水互溶的有机溶剂中，搅拌条件下将所述含有卵磷脂的溶液加入到含有环糊精的水溶液中，减压旋蒸法除去有机溶剂；(2)将番荔素溶于能与水互溶的有机溶剂中，搅拌条件下，将所述含有番荔素的溶液加入到上一步的溶液中，减压旋蒸除去有机溶剂，即得所述的纳米粒。在本专利技术的一个更优选的实施方案中，所述能与水互溶的有机溶剂选自DMSO、DMF、甲醇、乙醇、丙醇、乙腈、异丙醇、PEG400、PEG600中的一种或两种及以上的混合体系；或者以上溶剂与乙酸乙酯、二氯甲烷、三氯甲烷等与水不相混溶的有机溶剂的混合体系，只要混合体系能和水混溶同时能很好地溶解药物和辅料即可。在本专利技术的另一个更优选的实施方案中，所述方法中番荔素在有机溶剂中的浓度为0.001％～20％(w/v)，载体的浓度为0.001％～50％(w/v)。在本专利技术的另一个更优选的实施方案中，步骤(2)中有机溶剂与水相的体积比为1∶2～100(v/v)。在本专利技术的另一个更优选的实施方案中，步骤(1)和(2)中的搅拌条件为搅拌温度20-60℃；搅拌速度100～1000rpm；搅拌时间1～60min，优选的搅拌条件为25℃，500rpm，搅拌20min。在本专利技术的另一个更优选的实施方案中，还包括步骤(3)还可以通过冷冻干燥进一步固化。所用冻干保护剂可以是海藻糖、麦芽糖、半乳糖、乳糖、β-环糊精、羟丙基-β-环糊精中的一种或两种及两种以上的组合中的一种或两种及以上的组合，优选乳糖为冻干保护剂；冻干保护剂的用量为0.1％-5％(g/100mL)，冻干保护剂的用量优选为0.5-2.5％。另一方面，本专利技术提供了提供一种番荔素纳米粒在制备用于治疗肝癌的注射剂中的应用。在本专利技术的一个优选的实施方案中，所述的注射剂选自注射液或无菌冻干粉针。在本专利技术的一个优选的实施方案中，所述纳米粒注射剂的水相分散介质可用高浓度的氯化钠或葡萄糖水溶液调成0.9％氯化钠或者5％葡萄糖生理等渗体系，适应临床应用。在本专利技术的另一个优选的实施方案中，所述纳米粒无菌冻干粉针可加入适量的无菌药用0.9％氯化钠或者5％葡萄糖水溶液稀释，重建成供静脉给药用的分散体系，适应临床使用。本专利技术的纳米粒的优点在于：(1)处方简单，所用的载体对人体无毒副作用，并且经济易得；(2)载药量可高达50％以上，平均粒径小，具有较高的药物传输效率，同时易实现对肿瘤的被动靶向；(3)体外释放没有突释；(4)在人工胃肠液和血浆当中均稳定，既可以口服给药，也可以静脉注射。本专利技术的纳米粒经体外细胞毒实验表明，与番荔素DMSO溶液相比，表现出更显著的肿瘤细胞抑制率。本专利技术的纳米粒经荷瘤小鼠药效实验证明，与市售喜树碱注射液(阳性药)相比，具体更显著的抗肿瘤药效，在肿瘤治疗方面，是一种非常有前景的药物递送系统。本专利技术的纳米粒工艺简单，辅料经济安全易得，有广阔的产业化前景。附图说明图1为实施例1中ACGs纳米粒的平均粒径分布图。图2为实施例1中透射电镜照片(×19000)。图3为实施例1中ACGs纳米粒在人工胃肠液中的稳定性考察(n＝3)。图4为实施例1中ACGs纳米粒在血浆中的稳定性考察(n＝3)。图5为实施例1中ACGs纳米粒的溶血考察(n＝3)。图6为实施例1中ACGs纳米粒在PBS中的体外释放曲线(n＝3)。图7为实施例1中ACGs纳米粒对HepG2、Hela细胞毒考察(n＝6)。图8为实施例1中荷瘤小鼠体重随时间变化曲线(n＝10)。图9为实施例1中荷瘤小鼠肿瘤体积随时间变化曲线(n＝10)。具体实施方式通过以下实施方式进一步详细说明本专利技术的技术方案。需要指出的是，以下说明本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种基于环糊精及卵磷脂为载体的番荔素纳米粒，其特征在于，由番荔素、环糊精和磷脂组成，其质量比为1∶0.02～20∶0.02～20。

【技术特征摘要】
1.一种基于环糊精及卵磷脂为载体的番荔素纳米粒，其特征在于，由番荔素、环糊精和磷脂组成，其质量比为1∶0.02～20∶0.02～20。2.如权利要求1所述的纳米粒，其特征在于，所述番荔素选自番荔素内酯、bullatacin、squamostatin或annosquacin中的一种或者两种及以上的组合；所述纳米粒的平均粒径为10-1000nm；所述环糊精选自α-环糊精、β-环糊精、γ-环糊精或者PEG修饰的α-、β-或γ-环糊精中的一种或者两种及以上的组合，其中PEG的分子量范围是200-10000；所述卵磷脂选自大豆卵磷脂，蛋黄卵磷脂中的一种或两种的组合。3.如权利要求2所述的纳米粒，其特征在于，番荔素、环糊精和磷脂的质量比为4∶2∶1；所述纳米粒的平均粒径为20-200nm；所述环糊精为羟丙基-β-环糊精；所述卵磷脂为大豆卵磷脂。4.如权利要求1所述的纳米粒，其特征在于，所述纳米粒可制成口服制剂或静脉给药制剂。5.一种如权利要求1-4中任一项所述的纳米粒的制备方法，其特征在于，所述方法为溶剂沉淀法或者反溶剂法。6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述方法的具体步骤包括：(1)将卵磷脂溶于能与水互溶的有机溶剂中，搅拌条件下将所述含有卵磷脂的溶液加入到含有环糊精的水溶液中，减压旋蒸法除去有机溶剂；(2)将番荔素溶于能与水互溶的有机溶剂中，搅拌条件下，将所述含有番荔素的溶液加入到上一步的溶液中，减压旋蒸除去有机溶剂，即得所述的纳米粒。7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：王向涛，洪靖怡，刘营营，
申请(专利权)人：中国医学科学院药用植物研究所，
类型：发明
国别省市：北京;11