本发明专利技术公开了一种在裂壶藻生长过程中添加2,4-二氯苯氧乙酸以提高裂壶藻DHA产量及裂壶藻油脂积累的方法，属于微藻生物技术领域。具体操作步骤为：(1)在裂壶藻生长的调整期，添加不同浓度的2,4-二氯苯氧乙酸；(2)分析加入不同浓度的2,4-二氯苯氧乙酸对油脂积累及DHA含量的影响。本发明专利技术首次提出在裂壶藻的生长过程中添加2,4-二氯苯氧乙酸提高裂壶藻油脂积累以及DHA的含量，为使用化学方法促进裂壶藻油脂积累以及DHA含量提高提供了一条新思路。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于微藻生物
，具体涉及一种2,4-二氯苯氧乙酸在提高裂壶藻DHA产量及及促进裂壶藻油脂积累中的应用。
技术介绍
DHA是ω-3多不饱和脂肪酸，在脑和视网膜发育中起到重要作用，已经引起人们的广泛关注。膳食中缺少ω-3多不饱和脂肪酸，会增加癌症、抑郁症、老年痴呆症、糖尿病、高血压和心血管疾病、脑血管意外、关节炎和动脉粥样硬化的风险。目前，鱼被证明是DHA的主要来源，但统计数据显示鱼在市场上的数量从1950年的100万吨增加到大约2000万吨，1990年之后并没有增加，随后证实了鱼的数量已接近市场最大潜力这一事实，这就促使人们去寻找新的DHA来源。而人们在微藻中如甲藻、Prymnesiophyceae、Euglenophyceae和Thraustochytriaceae发现有大量的DHA。目前公认的裂壶藻因含有大量的DHA已经引起了人们的关注，这类海洋微藻已经用作商业来源进行生产的DHA并添加到婴幼儿配方奶粉或其他食品。裂壶藻具有增长快，产率高，不饱和脂肪酸尤其是DHA含量较高，生物量大，方便采收等的优点，已成为生产DHA的优质来源。目前关于DHA的生产专利主要集中在如何提高提取的效率上，而在如何提高微藻中DHA含量上鲜有报道。因此我们需要寻找一种新的方法，来提高裂壶藻中DHA含量。生物活性小分子是一类分子量低，能够主动运输到细胞内目标位置的化学物质，因此它们对大多数的生物合成途径具有重要影响，最终影响细胞的生长。小分子植物激素是植物生长发育的重要调节器。虽然在微藻也发现有植物激素存在，但它们的功能和作用方式，特别是在微藻领域的应用未见报道。2,4-二氯苯氧乙酸(简称2,4-D)，是一种无臭晶体，难溶于水，易溶于有机溶剂。2,4-二氯苯氧乙酸是植物生长调节剂和除草剂，现已广泛应用于农业生产。在植物体内激素与细胞内相应的激素受体的蛋白质结合后即表现出调节代谢的功能，激素受体与激素有很强的专一性和亲和力。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是，提供一种2,4-二氯苯氧乙酸在提高微藻DHA产量及油脂积累中的应用。为解决以上技术问题，本专利技术采用如下技术方案：2,4-二氯苯氧乙酸在提高裂壶藻DHA产量中的应用在本专利技术的保护范围之内。其中，在裂壶藻培养基中添加植物为2,4-二氯苯氧乙酸，添加时间为裂壶藻生长的调整期，优选在裂壶藻OD680值为0～0.5时(调整期)添加2,4-二氯苯氧乙酸，最优选在裂壶藻OD680值为0.5时(调整期)添加2,4-二氯苯氧乙酸。其中，2,4-二氯苯氧乙酸的添加量为0.5～12μg/L，优选为1.5～12mg/L，最优选6mg/L。其中，裂壶藻培养的温度为22～30℃，优选30℃；光照强度为2000～4000lux，优选3000lux。2,4-二氯苯氧乙酸在提高裂壶藻DHA产量和促进裂壶藻油脂积累中的应用在本发明的保护范围之内。其中，在裂壶藻的培养基中添加的植物为2,4-二氯苯氧乙酸，添加时间为裂壶藻生长的调整期，优选在微藻OD680值为0～0.5时(调整期)添加2,4-二氯苯氧乙酸，最优选在微藻OD680值为0.5时(调整期)添加2,4-二氯苯氧乙酸。其中，2,4-二氯苯氧乙酸在裂壶藻生长的调整期的添加量为0.5～3mg/L，优选1.5mg/L。其中，裂壶藻培养温度为25～30℃，优选30℃；培养光照强度为2000～4000lux，优选为3000lux。2,4-二氯苯氧乙酸在促进裂壶藻油脂积累中的应用在本专利技术的保护范围之内。其中，在裂壶藻培养基中添加植物为2,4-二氯苯氧乙酸，添加时间为裂壶藻生长的调整期，优选在裂壶藻OD680值为0～0.5时(调整期)添加2,4-二氯苯氧乙酸，最优选在裂壶藻OD680值为0.5时(调整期)添加2,4-二氯苯氧乙酸。其中，2,4-二氯苯氧乙酸在裂壶藻生长的调整期的添加量为0.5～3mg/L，1.5mg/L。其中，裂壶藻培养温度为25～30℃，优选30℃；培养光照强度为2000～4000lux，优选为3000lux。有益效果：本专利技术具有如下显著特点和效果：(1)本专利技术首次提出在裂壶藻的生长过程中添加2,4-二氯苯氧乙酸，为促进裂壶藻中油脂积累及提高裂壶藻DHA提供了一条新思路。(2)通过补充2,4-二氯苯氧乙酸，可以明显促进裂壶藻中油脂积累及DHA的积累，积累量是未添加时的1.13倍和1.35倍，为使用2,4-二氯苯氧乙酸提高裂壶藻中油脂积累和DHA积累提供了实验基础。附图说明图1在裂壶藻生长的调整期，加入不同浓度的2,4-二氯苯氧乙酸，裂壶藻DHA含量的变化。其中，横坐标为2,4-二氯苯氧乙酸添加的不同浓度，纵坐标为裂壶藻DHA含量的变化，数据为3次平行取样的平均值。图2在裂壶藻生长的调整期，加入不同浓度的2,4-二氯苯氧乙酸，裂壶藻油脂积累的变化。其中，横坐标为2,4-二氯苯氧乙酸添加的不同浓度，纵坐标为裂壶藻油脂积累的变化，数据为3次平行取样的平均值。具体实施方式根据下述实施例，可以更好地理解本专利技术。然而，本领域的技术人员容易理解，实施例所描述的内容仅用于说明本专利技术，而不应当也不会限制权利要求书中所详细描述的本专利技术。以下实施例中所使用的微藻为裂壶藻SR21(Schizochytrium limacinum SR21)，该菌株购自美国模式菌种收集中心(ATCC，American type culture collection)，编号为ATCC MYA-1381。以下实施例中2,4-二氯苯氧乙酸简写为2,4-D。以下实施例中裂壶藻按照以下方式培养：将新鲜裂壶藻细胞按照5％的体积分数接种到装有100ml新鲜的基础Tap培养基的250ml三角瓶中，静置培养，并在裂壶藻生长的调整期添加2,4-D，其间每天摇动三角瓶3～5次，当裂壶藻细胞增殖到最大密度的稳定期时采收裂壶藻细胞，藻液离心浓缩，用去离子水洗涤、离心，去除裂壶藻细胞培养盐，制备成无培养盐的湿藻，作为萃取油脂之用。以下实施例中所用的基础培养基(每升)配方如下：400.00mg NH4Cl，50.00mgCaCl2·2H2O，100.00mg MgSO4·7H2O，98.80mgNa2HPO4，61.73mg KH2PO4，50.00mgNa2EDTA·2H2O，22.00mg ZnSO4·7H2O，11.40mg H3BO3，5.10mg MnCl2·4H2O，5.00mgFeSO4·7H2O，1.60本文档来自技高网...
【技术保护点】
2,4‑二氯苯氧乙酸在提高裂壶藻DHA产量中的应用。
【技术特征摘要】
1.2,4-二氯苯氧乙酸在提高裂壶藻DHA产量中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，在裂壶藻生长的调整期向其培养基
中加入2,4-二氯苯氧乙酸。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，2,4-二氯苯氧乙酸的添加量为
0.5～12μg/L。
4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，裂壶藻培养的温度为22～30℃，光照
强度为2000～4000lux。
5.2,4-二氯苯氧乙酸在提高裂壶藻DHA产量和促进裂壶藻油脂积累中的应用。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，在裂壶藻生长的调整期向其培养基
中加入2,4-二氯苯氧乙酸。
7.根据权利要求5...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈以峰，何冰，阿里·帕萨爱默尔，
申请(专利权)人：江苏省农业科学院，
类型：发明
国别省市：江苏;32
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