本发明专利技术涉及Toll样受体TLR7和TLR9抑制性寡核苷酸在制备用于治疗B细胞淋巴瘤的药物中的应用，所述B细胞淋巴瘤具有MYD88L265P突变，所述寡核苷酸包含CCT重复序列[(CCT)n]，其中，C是胞嘧啶，T是胸腺嘧啶，n是8至12的整数，其中，所述寡核苷酸的序列选自：SEQ ID NO.1：5’-cctcctcctcctcctcctcctcct-3’；SEQ ID NO.2：5’-cctcctcctcctcctcctcctcctcct-3’；SEQ ID NO.3：5’-cctcctcctcctcctcctcctcctcctcct-3’；SEQ ID NO.4：5’-cctcctcctcctcctcctcctcctcctcctcct-3’；SEQ ID NO.5：5’-cctcctcctcctcctcctcctcctcctcctcctcct-3’；SEQ ID NO.6：5’-cctccTcctcctccTcctcctccTcctcctccTcct-3’；其中，小写字母t代表硫代修饰的碱基，大写字母T代表未修饰的碱基。本发明专利技术的寡核苷酸在具有MYD88L265P突变的B细胞淋巴瘤中可阻断TLR7和TLR9与MYD88L265P蛋白结合，阻断NF-κB信号通路的活化，从而抑制肿瘤细胞的增殖。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术总体上涉及一种Toll样受体TLR7和TLR9抑制性寡核苷酸及其应用，具体而言，本专利技术涉及包含CCT重复序列的TLR7和TLR9抑制性寡核苷酸在制备用于治疗B细胞淋巴瘤的药物方面的应用。
技术介绍
B细胞淋巴瘤是B细胞产生的实体瘤，其包括霍奇金淋巴瘤和非霍奇金淋巴瘤，其分型众多，霍奇金淋巴瘤包括经典霍奇金淋巴瘤和结节性淋巴细胞型霍奇金淋巴瘤，霍奇金淋巴瘤目前被认为是起源于B细胞的肿瘤。非霍奇金淋巴瘤主要包括弥漫性大B细胞淋巴瘤(diffuselargeB-celllymphoma，DLBCL)、滤泡性淋巴瘤、黏膜相关淋巴组织淋巴瘤(MALT)、小淋巴细胞淋巴瘤/慢性淋巴细胞白血病、套细胞淋巴瘤(MCL)，以上5种B细胞非霍奇金淋巴瘤较为常见，占非霍奇金淋巴瘤的3/4。弥漫性大B细胞淋巴瘤是最常见的一类淋巴瘤，约占非霍奇金淋巴瘤的30％左右。DLBCL的临床表现、形态学、免疫表型及遗传学特征极具异质性。根据基因表达谱将DLBCL分为生发中心来源B细胞样(germinalcentreB-cell-like，GCB)和活化B细胞样(activatedB-cell-like，ABC)两种亚型。生存分析显示GCB型的总生存期明显好于ABC型。就5年生存率来说，前者为76％，而后者仅为16％。近年来，越来越多的研究表明CD20分子靶向药物利妥昔单抗联合化疗方案可以明显提高CD20阳性DLBCL患者的完全缓解率和无病生存率，显著缩小GCB型与非-GCB型的预后差异。华氏巨球蛋白血症(macroglobulinemia，WM)属于罕见的B细胞淋巴瘤，又叫淋巴浆细胞淋巴瘤，年发病率为0.3/10万，在所有的B系淋巴瘤中占1％～2％，其主要特征为骨髓淋巴样浆细胞浸润、单克隆IgM血症。WM为惰性淋巴瘤，有临床症状的患者中位生存时间为5～6年。Treon等(TreonSP.NEnglMed2012；367(9):826-833)发现约90％的华氏巨球蛋白血症存在MYD88L265P突变。MYD88L265P突变可能是促进WM发生的早期致癌事件。近来研究表明，在多种B细胞肿瘤中发现MYD88的DNA序列因特定序位的碱基由T突变为C，导致蛋白编码区第265位氨基酸错义突变，即亮氨酸错变为脯氨酸(L→P)。此突变位点正好处于TIR(Toll-interleukin1receptor，TIR)结构域，在没有TLR及IL-1R信号刺激的情况下MYD88也能发生二聚化，引发白介素-1受体相关激酶(interleukin-1receptor-associatedkinase，IRAK)介导的NF-κB信号的激活，促进细胞增殖。在携带MYD88L265P的AB型弥漫性大B细胞淋巴瘤细胞株中敲除IRAK4后，恶性细胞生长受限，而这种生长抑制可以通过引入野生型IRAK4纠正，对失活型IRAK4无效，IRAK4抑制剂可导致携带MYD88L265P突变的ABC-DLBCL细胞株死亡，对携带野生型MYD88的GCB-DLBCL细胞株无致死作用。抑制MYD88/IRAK信号通路可以抑制NF-κB信号，并使具有MYD88L265P突变的ABC-DLBCL肿瘤细胞生长受到抑制。Ngo等(NgoVN.Nature2011；470(7332):115-119)通过RNA干扰、高通量测序发现29％ABC-DLBCL存在MYD88L265P突变，而在其他类型的弥漫性大B细胞淋巴瘤，如GCB-DLBCL和伯基特淋巴瘤中极少或者没有MYD88L265P突变。NF-κB信号途径的持续激活是ABC-DLBCL的特征。基于此发现，本领域一直在致力于寻找能够靶向治疗具有MYD88L265P突变的弥漫性大B细胞淋巴瘤。
技术实现思路
本专利技术总体上涉及Toll样受体TLR7和TLR9抑制性寡核苷酸在治疗B细胞淋巴瘤中的应用，具体而言，本专利技术涉及Toll样受体TLR7和TLR9抑制性寡核苷酸在制备用于治疗B细胞淋巴瘤的药物中的应用，其中，所述B细胞淋巴瘤具有MYD88L265P突变，优选地，所述B细胞淋巴瘤是弥漫性大B细胞淋巴瘤，并且所述弥漫性大B细胞淋巴瘤是活化B细胞样亚型。本专利技术的寡核苷酸包含CCT重复序列[(CCT)n]，其中，C是胞嘧啶，T是胸腺嘧啶，n是8至12的整数，其中，所述寡核苷酸的序列选自：SEQIDNO.1：5’-cctcctcctcctcctcctcctcct-3’；SEQIDNO.2：5’-cctcctcctcctcctcctcctcctcct-3’；SEQIDNO.3：5’-cctcctcctcctcctcctcctcctcctcct-3’；SEQIDNO.4：5’-cctcctcctcctcctcctcctcctcctcctcct-3’；SEQIDNO.5：5’-cctcctcctcctcctcctcctcctcctcctcctcct-3’；SEQIDNO.6：5’-cctccTcctcctccTcctcctccTcctcctccTcct-3’；其中，小写字母t代表硫代修饰的碱基，大写字母T代表未修饰的碱基。本专利技术的Toll样受体TLR7和TLR9抑制性寡核苷酸对具有MYD88L265P突变的B细胞淋巴瘤产生剂量依赖性抑制作用。总体而言，所述Toll样受体TLR7和TLR9抑制性寡核苷酸以1.25mg/kg体重至500mg/kg体重的剂量对具有MYD88L265P突变的B细胞淋巴瘤产生抑制作用。在一种实施方式中，对具有MYD88L265P突变的B细胞淋巴瘤产生抑制作用的Toll样受体TLR7和TLR9抑制性寡核苷酸的剂量为1.25mg/kg体重至12.5mg/kg体重，或12.5mg/kg体重至25mg/kg体重，或25mg/kg体重至50mg/kg体重，或50mg/kg体重至125mg/kg体重，或125mg/kg体重至250mg/kg体重，或250mg/kg体重至500mg/kg体重。在优选的实施方式中，对具有MYD88L265P突变的B细胞淋巴瘤产生抑制作用的Toll样受体TLR7和TLR9抑制性寡核苷酸的剂量为5mg/kg体重，或12.5mg/kg体重，或25mg/kg体重，或50mg/kg体重。在本专利技术的一种实施方式中，所述药物还包括药学上可接受的载体，其选自：溶液、稀释剂、溶剂、分散剂、脂质体、乳剂、糖衣、抗菌剂、抗真菌剂、等渗的和延缓吸收的试剂。在本专利技术的优选实施方式中，所述药物被配制成口服给药剂型、静脉注射剂型、肌肉注射剂型、吸入给药剂型、局部施用剂型。本专利技术的寡核苷酸表现出Toll样受体TLR7和TLR9抑制性，其对于治疗具有MYD88L265P突变的ABC型DLBCL尤其有效，将本专利技术的寡核苷酸作用于具有MYD88L265P突变的ABC型DLBCL，其可阻断TLR7和TLR9与MYD88L265P蛋白结合，从而阻断NF-κB信号通路的活化，抑制ABC-DLBCL细胞生存，进而有效抑制淋巴瘤细胞增殖。由此，本专利技术的具有Toll样受体TLR7和TLR9抑制性的寡核苷酸可用于靶向治疗具有MYD88L265P突变的B细胞淋巴瘤并可用于制备治疗具有MYD88L265本文档来自技高网...
【技术保护点】
Toll样受体TLR7和TLR9抑制性寡核苷酸在制备用于治疗B细胞淋巴瘤的药物中的应用，所述B细胞淋巴瘤具有MYD88 L265P突变，所述寡核苷酸包含CCT重复序列[(CCT)n]，其中，C是胞嘧啶，T是胸腺嘧啶，n是8至12的整数，其中，所述寡核苷酸的序列选自：SEQ ID NO.1：5’‑cctcctcctcctcctcctcctcct‑3’；SEQ ID NO.2：5’‑cctcctcctcctcctcctcctcctcct‑3’；SEQ ID NO.3：5’‑cctcctcctcctcctcctcctcctcctcct‑3’；SEQ ID NO.4：5’‑cctcctcctcctcctcctcctcctcctcctcct‑3’；SEQ ID NO.5：5’‑cctcctcctcctcctcctcctcctcctcctcctcct‑3’；SEQ ID NO.6：5’‑cctccTcctcctccTcctcctccTcctcctccTcct‑3’；其中，小写字母t代表硫代修饰的碱基，大写字母T代表未修饰的碱基。
【技术特征摘要】
1.Toll样受体TLR7和TLR9抑制性寡核苷酸在制备用于治疗B细胞淋巴瘤的药物中的应用，所述B细胞淋巴瘤具有MYD88L265P突变，所述寡核苷酸包含CCT重复序列[(CCT)n]，其中，C是胞嘧啶，T是胸腺嘧啶，n是8至12的整数，其中，所述寡核苷酸的序列选自：SEQIDNO.1：5’-cctcctcctcctcctcctcctcct-3’；SEQIDNO.2：5’-cctcctcctcctcctcctcctcctcct-3’；SEQIDNO.3：5’-cctcctcctcctcctcctcctcctcctcct-3’；SEQIDNO.4：5’-cctcctcctcctcctcctcctcctcctcctcct-3’；SEQIDNO.5：5’-cctcctcctcctcctcctcctcctcctcctcctcct-3’；SEQIDNO.6：5’-cctccTcctcctccTcctcctccTcctcctccTcct-3’；其中，小写字母t代表硫代修饰的碱基，大写字母T代表未修饰的碱基。2.如权利要求1所述的应用，其中，所述B细胞淋巴瘤是弥漫性大B细胞淋巴瘤。3.如权利要求2所述的应用，其中，所述弥漫性大B细胞淋巴瘤是活化B细胞样亚型。4.如权利要求1至3中任一项所述的应用，其中，所述Toll样受体TLR7和TLR9抑制性寡核苷酸对具有MYD88L265P突变的B...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈京涛，安倍莹，
申请(专利权)人：长春华普生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11
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