灵芝萃取物协同两性霉素B的抗癌医药组合物制造技术

本发明专利技术提供一种抗癌医药组合物，其包含：一灵芝萃取物，其浓度为1-5mg/ml；以及一两性霉素B，其浓度为3-10μM，其中，该灵芝萃取物及该两性霉素B以分段方式给药，先以该灵芝萃取物投药一预定时间后再以该两性霉素B投药，以增进该两性霉素B的抑癌效力。本发明专利技术的抗癌医药组合物可抑制癌细胞生长，效果良好，且可降低两性霉素B的用药剂量。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术关于一种抗癌医药组合物，尤指一种灵芝萃取物协同两性霉素B的抗癌医药组合物。
技术介绍
根据近年来的统计，恶性肿瘤一直都位居国人十大死因之首，其中又以肺癌、肝癌、结肠直肠癌为癌症死亡的前三大癌症。因此，如何有效治疗癌症及降低癌症死亡率一直是医药界所致力努力的目标。由于文明快速发展，生活环境中含有许多无形的有害物质，长时间暴露在此种环境中将对身体有所伤害，而经过流行病学及统计学研究，显示大约有八成的癌症是由外在因素所引起，其中包括生活方式的改变、传染病造成的感染因素、职业及其环境造成的因素等，而当中又以化学致癌物为最危险因子，化学致癌物一旦经人体吸收进入体内经过代谢活化，将可能导致细胞内基因发生一连串的突变，使细胞失去控制而持续不断分裂生长，最终导致肿瘤细胞形成。也因此，各种针对癌症的治疗方法不断被研发，包含化疗、放射性治疗、免疫疗法、单株抗体疗法、及基因疗法等，然而其中亦突显出许多问题，例如化疗所产生一连串的副作用，或者病患对药物产生抗药性等。另一方面，癌症治疗也开始往天然食物研究，筛选出具有抗癌潜力的功能性食物或营养食物也变成一个重要的方向，在过去研究中，亦有许多中草药被推测具有抗癌效果。因此，本专利技术即在萃取灵芝中的有效成分，并研究其与两性霉素B的协同作用，以开发更具疗效的抗癌医药组合物。
技术实现思路
本专利技术的目的在于研究灵芝萃取物与两性霉素B的协同作用，以开发更具疗效的抗癌医药组合物。为达上述目的，本专利技术的一较佳实施方式为提供一种抗癌医药组合物，其包含：一灵芝萃取物，其浓度为1-5mg/ml；以及一两性霉素B，其浓度为3-10μM，其中，该灵芝萃取物及该两性霉素B以分段方式给药，先以该灵芝萃取物投药一预定时间后再以该两性霉素B投药，以增进该两性霉素B的抑癌效力。在一实施例中，该灵芝为赤芝(Ganodermalucidum)。在一实施例中，该灵芝萃取物为以酒精萃取法萃取而得，且萃取自灵芝的子实体。在一实施例中，该灵芝萃取物包含固醇及三萜类。在一实施例中，该两性霉素B的浓度为3-5μM。在一实施例中，该预定时间为12-48小时，且较佳为24小时。在一实施例中，该抗癌医药组合物为用于治疗肝癌。在一实施例中，该抗癌医药组合物为用于治疗肺癌。附图说明图1A及1B显示实施例1的HepG2细胞实验结果。图1C及1D显示实施例1的Hep3B细胞实验结果。图1E及1F显示实施例1的Hep5J细胞实验结果。图2A及2B显示实施例2的HepG2细胞实验结果。图2C及2D显示实施例2的Hep3B细胞实验结果。图2E及2F显示实施例2的Hep5J细胞实验结果。图3A显示实施例3的A549细胞实验结果。图3B显示实施例3的H460细胞实验结果。具体实施方式体现本专利技术特征与优点的一些典型实施例将在后段的说明中详细叙述。应理解的是本专利技术能够在不同的态样上具有各种的变化，然其皆不脱离本专利技术的范围，且其中的说明及附图在本质上当作说明之用，而非用以限制本专利技术。根据文献得知，有些药用真菌含有丰富的三萜类(triterpenoids)、多醣体(polysaccharides)及固醇(sterols)，其对于保护肝脏、促进肝细胞再生、对抗肝癌有相当程度的疗效。此外，两性霉素B(AmphotericinB，简称AmB)为一种多烯类抗霉菌药，藉由与真菌细胞膜上所嵌的麦角固醇(Ergosterol)结合产生孔洞，而造成细胞膜通透性的改变，使得真菌细胞产生裂解而死亡。因此，本专利技术进一步研究灵芝萃取物及两性霉素B的协同作用，以致力开发更具疗效的抗癌医药组合。本专利技术主要检测灵芝萃取物是否能促进两性霉素B抑制人类肝癌细胞的效力。本专利技术选用赤芝(Ganodermalucidum)进行酒精萃取，以取得灵芝酒精萃取物(简称灵芝酒萃物)，其将赤芝子实体切片打成粉末，取10克加入500ml的99％酒精，再置于回转式振荡器(200rpm)持续振荡24小时，再过滤收取滤液，并减压浓缩至干燥，秤重后计算回收率，于4℃避光保存。当然，本专利技术的灵芝萃取物不限于以酒精萃取所得的萃取物，其他能萃取出灵芝的固醇及三萜类的萃取方法及萃取物皆适用于本专利技术，例如亦可利用具有不同极性的有机溶剂(如正己烷)来进行萃取，但不以此为限。以下以实验进一步说明本专利技术所开发的医药组合物实施例。实施例1：本实施例以HepG2、Hep3B及Hep5J等人类肝癌细胞的细胞株来进行实验，并以96格(well)细胞培养盘进行培养。试验方法主要分成两组，一组是先以灵芝酒萃物预处理24小时再以两性霉素B处理48小时，另一组则是以灵芝酒萃物及两性霉素B共同处理48小时。在预处理实验组中，细胞先以0、1、2.5及5mg/ml的灵芝酒萃物处理24小时之后，再以0～80μM递增浓度的两性霉素B处理48小时，之后进行细胞存活率分析(MTTassay)。在共同处理实验组中，细胞则以0、1、2.5及5mg/ml的灵芝酒萃物及0～80μM递增浓度的两性霉素B共同处理48小时，之后进行细胞存活率分析(MTTassay)。细胞存活率分析是将MTT染剂(3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazoliumbromide)加入每一培养格并继续培养45-60分钟，之后移除培养液并置换成DMSO(dimethylsulfoxide)，再检测溶液在550nm的吸光度(opticaldensity,OD)。图1A及1B显示实施例1的HepG2细胞实验结果。图1A为预处理实验组，图1B为共同处理实验组，其中横轴为两性霉素B浓度，纵轴为存活细胞比例，四条曲线则分别为灵芝酒萃物浓度为0、1、2.5及5mg/ml的曲线。由图1A的图示结果可知，相较于灵芝酒萃物浓度为0的曲线(亦即仅以两性霉素B处理)，预先处理灵芝酒萃物1、2.5及5mg/ml皆能明显促进两性霉素B抑制HepG2生长的能力，使得两性霉素B在用药浓度为5μM时即可抑制约75％的癌细胞生长，显现相当好的抑癌效果。然而由图1B的图示结果可知，共同处理灵芝酒萃物1、2.5及5mg/ml及两性霉素B皆明显拮抗两性霉素B抑制HepG2生长的能力，且此一拮抗能力与灵芝酒萃物剂量成正比。图1C及1D显示实施例1的Hep3B细胞实验结果。图1C为预处理实验组，图1D为共同处理实验组，其中横轴为两性霉素B浓度，纵轴为存活细胞比例，四条曲线则分别为灵芝酒萃物浓度为0、1、2.5及5mg/ml的曲线。由图1C的图示结果可知，相较于灵芝酒萃物浓度为0的曲线(亦即仅以两性霉素B处理)，预先处理灵芝酒萃物2.5及5mg/ml皆能明显促进两性霉素B抑制Hep3B生长的能力，且抑制能力与灵芝酒萃物剂量成正比，其中当灵芝酒萃物浓度为5mg/ml且两性霉素B浓度为10μM时可抑制约75％的癌细胞生长，显现相当好的抑癌效果。然而由图1D的图示结果可知，共同处理灵芝酒萃物及两性霉素B则无明显效果。图1E及1F显示实施例1的Hep5J细胞实验结果。图1E为预处理实验组，图1F为共同处理实验组，其中横轴为两性霉素B浓度，纵轴为存活细胞比例，四条曲线则分别为灵芝酒萃物浓度为0、1、2.5及5mg/m本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种抗癌医药组合物，其包含：一灵芝萃取物，其浓度为1‑5mg/ml；以及一两性霉素B，其浓度为3‑10μM；其中，该灵芝萃取物及该两性霉素B以分段方式给药，先以该灵芝萃取物投药一预定时间后再以该两性霉素B投药，以增进该两性霉素B的抑癌效力。

【技术特征摘要】
1.一种抗癌医药组合物，其包含：一灵芝萃取物，其浓度为1-5mg/ml；以及一两性霉素B，其浓度为3-10μM；其中，该灵芝萃取物及该两性霉素B以分段方式给药，先以该灵芝萃取物投药一预定时间后再以该两性霉素B投药，以增进该两性霉素B的抑癌效力。2.如权利要求1所述的抗癌医药组合物，其中该灵芝为赤芝。3.如权利要求1所述的抗癌医药组合物，其中该灵芝萃取物为以酒精萃取法萃取而得。4.如权利要求1所述的抗癌医药组合物，其中该灵芝萃取物为萃取自...

【专利技术属性】
技术研发人员：苏庆华，戴承正，
申请(专利权)人：苏庆华，戴承正，台湾原生药用植物股份有限公司，
类型：发明
国别省市：中国台湾;71