本发明专利技术属于环境微生物技术领域,公开了大花蔷薇酮A在防治黄曲霉和/或黄曲霉毒素污染中的应用;将所述化合物加入到接种黄曲霉孢子的马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)或马铃薯葡萄糖肉汤培养基(PDB)中,均能抑制黄曲霉的生长,将所述的化合物加入到如饲料、涂料等样品中,能抑制黄曲霉的生长,降低黄曲霉和/或黄曲霉毒素污染;本化合物来自天然植物资源,将该化合物用于防治黄曲霉和/或黄曲霉毒素污染具有环境友好,作用效果明显,效果理想等优点。本发明专利技术对发展预防控制黄曲霉和/或黄曲霉毒素污染的有效方法与技术具有重要的理论和实际价值。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及环境微生物
,更具体地,涉及大花蔷薇酮A在防治黄曲霉和/或黄曲霉毒素污染中的应用。
技术介绍
黄曲霉(Aspergillusflavus)是一种常见的丝状土壤腐生真菌,也是一种危害极大的病原菌,易于侵染植物、动物和人。黄曲霉易导致许多重要农作物发病,如玉米穗腐病、花生曲霉病和棉花棉铃腐烂等,造成重大的经济损失。黄曲霉也易使人和动物患上曲霉病,影响健康,严重时还会导致死亡。黄曲霉毒素(Aflatoxins,AFs)是主要由黄曲霉和寄生曲霉等产生的次级代谢产物,具有急慢性毒性、致癌性、致突变性和致畸性,对人及动物肝脏组织具有破坏作用,严重时可导致肝癌甚至死亡,是迄今发现的各种真菌毒素中最稳定和最毒的一种。AFs为一类基本结构为二呋喃环和香豆素的聚酮化合物,目前分离鉴定的已超过20种,主要为AFB1(AflatoxinB1)、AFB2、AFG1、AFG2等,其中AFB1污染最为常见,毒性最强,是氰化钾的10倍,砒霜的68倍,被世界卫生组织定义为Ⅰ类可能致癌物,是世界公认的三大强致癌物之一。AFs污染是一个普遍的现象,主要污染花生、玉米、大米等粮食和粮食制品、坚果、植物油、乳制品、调味品、饲料及中药材等,其中以花生和玉米污染最为严重。AFs污染已对食品药品安全和农产品的经济价值产生严重影响,已成为一项全球性的社会和经济问题。为了保证食品药品安全,降低AFs对人类的危害,很多国家和地区都对AFs做出了严格的限量规定。黄曲霉毒素的污染源头在于产毒真菌,消除产毒真菌是控制黄曲霉毒素污染的关键。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是克服现有技术存在的缺陷,提供大花蔷薇酮A在防治黄曲霉和/或黄曲霉毒素污染中的应用。本专利技术的目的是通过以下技术方案予以实现的:式(I)所述化合物及其外消旋混合物、对映体、非对映体或者其药学上可接受的盐或酯在抑制和/或杀死黄曲霉中的应用,式(I)的结构式为:。本专利技术的化合物大花蔷薇A为假鹰爪属植物的叶片的醇提取物经柱层析后采用制备液相色谱分离制备获得,所述化合物为5-乙酰基-6-苯甲酰基氧甲基-5H-氧杂4-酮(大花蔷薇酮A),将所述化合物加入到接种黄曲霉孢子的马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)或马铃薯葡萄糖肉汤培养基(PDB)中,均能抑制黄曲霉的生长,将所述的化合物加入到如饲料等样品中,能抑制黄曲霉的生长,降低黄曲霉和/或黄曲霉毒素污染。优选地,所述假鹰爪属植物选自假鹰爪(Desmoschinensi)、毛叶假鹰爪(D.dumosus)、大叶假鹰爪(D.grandifolius)或云南假鹰爪(D.yunnanensis)。本专利技术还提供式(I)所述化合物及其外消旋混合物、对映体、非对映体或者其药学上可接受的盐或酯在制备抑制和/或杀死黄曲霉的药剂中的应用,式(I)的结构式为:。本专利技术还提供式(I)所述化合物及其外消旋混合物、对映体、非对映体或者其药学上可接受的盐或酯在防治黄曲霉毒素污染中的应用,式(I)的结构式为:。优选地,上述应用中,式(I)所述化合物的用量为不少于0.05mg/105个黄曲霉孢子。更优选地,当PDB中孢子浓度为105个/mL时,最小抑菌浓度为0.05mg/mL。更优选地,当PDB中孢子浓度为105个/mL时,最小杀菌浓度为0.4mg/mL。更优选地,当PDA中孢子浓度为105个/mL时,化合物起抑菌作用的最少用量为100μg。本专利技术还提供一种用于抑制黄曲霉生长和/或降低黄曲霉毒素污染的方法,即将式(I)所述化合物喷洒到需要进行黄曲霉防治的对象上。与现有技术相比,本专利技术具有以下有益效果:本专利技术所述化合物加入到接种黄曲霉孢子的马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)或马铃薯葡萄糖肉汤培养基(PDB)中,均能抑制黄曲霉的生长,将所述的化合物加入到如饲料、涂料等样品中,能抑制黄曲霉的生长,降低黄曲霉和/或黄曲霉毒素污染;本化合物来自天然植物资源,将该化合物用于防治黄曲霉和/或黄曲霉毒素污染具有环境友好,作用效果明显,效果理想等优点。本专利技术对发展预防控制AFs污染的有效方法与技术具有重要的理论和实际价值。附图说明图1是化合物的化学结构式。图2是化合物的紫外光谱图。图3是化合物的一级质谱图。图4是化合物铵加合离子峰的二级质谱图。图5是化合物的1H-NMR图谱(CD3OD)。图6是化合物的13C-NMR图谱(CD3OD)。图7是化合物的DEPT图谱(CD3OD)。图8是化合物的COSY图谱(CD3OD)。图9是化合物的HSQC图谱(CD3OD)。图10是化合物的HMBC图谱(CD3OD)。图11是化合物的圆二色谱图(甲醇)。图12是化合物的最小抑菌浓度实验图。图13是化合物在PDB培养基中黄曲霉的生长情况图。图14是取化合物在PDB培养基上培养黄曲霉2天后的溶液涂布在PDA培养基上菌的生长情况。图15是化合物在PDA培养基上的抑菌情况。图16是化合物在饲料中的抑菌情况。具体实施方式下面结合说明书附图和具体实施例进一步说明本专利技术的内容,但不应理解为对本专利技术的限制。在不背离本专利技术精神和实质的情况下,对本专利技术方法、步骤或条件所作的简单修改或替换,均属于本专利技术的范围;若未特别指明,实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。实施例1化合物的提取分离(1)取假鹰爪植物叶片洗净,晾干,用高速万能粉碎机粉碎。(2)取植物叶片粉末500g,加无水乙醇4L,超声处理2h,过滤,滤液用旋转蒸发仪蒸干后加少量二氯甲烷溶解;经硅胶(200~300目)柱层析,以石油醚:乙酸乙酯(4:1)为洗脱剂洗脱,洗脱液循环使用。(3)取硅胶柱层析的洗脱液用旋转蒸发仪蒸干,加少量甲醇溶解并用制备液相分离。(4)以甲醇:水(50:50)为流动相;采用MarshC18制备柱(50×700mm,5μm)为固定相。(5)保持流速为80mL/min;检测波长为233nm;色谱柱温度为室温;取0.3mL待制备样品注入制备液相仪。(6)收集化合物所对应色谱峰的洗脱液,用旋转蒸发仪蒸干,置-20℃保存(紫外光谱如图2)。实施例2化合物的鉴定(1)取实施例1提取到的化合物用甲醇溶解,采用液相色谱-飞行时间质谱联用仪进行一级质谱分析(图3),并取铵加合离子峰进行二级质谱分析(图4)。(2)根据液相色谱-飞行时间质谱联用仪实验结果推测化合物的分子式为C16H14O6,分子量为302。(3)取化合物采用元素分析仪进行元素分析,确认化合物分子结构中没有N元素和S元素,且C元素和H元素的比例结果和高分辨质谱推断结果一致。(4)取化合物,采用CD3OD作为溶解,进行1H-NMR、1H-1HCOSY、13C-NMR、DEPT、HSQC和HMBC等核磁共振试验(图5~10),化合物的1H-NMR,13C-NMR,HMBC和COSY核磁共振谱结果(CD3OD)见表1,推测其化学结构式如图1。(5)取化合物的甲醇溶液,用圆二色光谱仪测定其圆二色光谱值(图11)。实施例3化合物的最小抑菌浓度(1)在马铃薯葡萄糖肉汤培养基(PDB)溶液(2.4g/100mL,pH值为5.1)中加入黄曲霉孢子,终浓度为105个/mL,往24孔板中加入含孢子的PDB,每孔为2mL。(2)在24孔板微孔中分别加入2mg/m本文档来自技高网...
【技术保护点】
式(I)所述化合物及其外消旋混合物、对映体、非对映体或者其药学上可接受的盐或酯在抑制和/或杀死黄曲霉中的应用,其特征在于,式(I)的结构式为:(I)。
【技术特征摘要】
1.式(I)所述化合物及其外消旋混合物、对映体、非对映体或者其药学上可接受的盐或酯在抑制和/或杀死黄曲霉中的应用,其特征在于,式(I)的结构式为:(I)。2.式(I)所述化合物及其外消旋混合物、对映体、非对映体或者其药学上可接受的盐或酯在制备抑制和/或杀死黄曲霉的药剂中的应用,其特征在于,式(...
【专利技术属性】
技术研发人员:贺竹梅,严全鸿,王琼,孙朋飞,罗艳凤,
申请(专利权)人:中山大学,
类型:发明
国别省市:广东;44
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