共有前列腺抗原、编码所述抗原的核酸分子以及包含所述核酸分子的疫苗及其用途制造技术

本文中提供了能够在被靶向的物种中打断耐受性的前列腺抗原的共有氨基酸序列，包括PSA、PSMA、STEAP和PSCA抗原。还提供了编码前列腺抗原PSA、PSMA、STEAP和PSCA的一种或多种共有氨基酸序列的核酸序列以及表达所述序列的基因构建体/载体和疫苗。本文中还提供了通过施用提供的疫苗、蛋白质和/或核酸序列的一种或多种产生针对前列腺癌细胞的自身免疫反应的方法。

【技术实现步骤摘要】
专利
本专利技术涉及编码共有前列腺蛋白及其片段的核酸分子；改进的前列腺癌疫苗、改进的用于诱导针对前列腺癌细胞的免疫反应的方法、改进的用于预防性和/或治疗性免疫个体以抗前列腺癌的方法。专利技术背景前列腺癌是重要治疗免疫靶。免疫治疗法的发展非常复杂，因为需要开发能够诱导强免疫反应，包括优选CTL反应的免疫原。已研究了直接施用核酸序列以针对动物和人疾病接种疫苗，并且许多努力集中在核酸递送的有效和高效方法，以产生期望的抗原的必需表达，从而导致免疫原性反应和最终该技术的成功。DNA疫苗具有许多优于常规接种法例如活减毒病毒和基于重组蛋白质的疫苗的概念上的有利方面。DNA疫苗是安全的，稳定的，容易产生的，并且在人中可被良好地耐受的，临床前试验显示几乎无质粒整合的证据[Martin,T.,等人,质粒DNA疟疾疫苗:肌内注射后基因组整合的潜能.HumGeneTher,1999.10(5):第759-68页；Nichols,W.W.,等人,至宿主基因组内的潜在DNA疫苗整合.AnnNYAcadSci,1995.772:第30-9页]。此外，DNA疫苗因疫苗的效力不受预先存在的针对载体的抗体滴度的影响的事实而十分适合重复施用[Chattergoon,M.,J.Boyer和D.B.Weiner,基因免疫：疫苗和免疫治疗剂的新纪元.FASEBJ,1997.11(10):第753-63页]。然而，DNA疫苗的临床采用的一个主要障碍一直以来为当转移至更大的动物时平台的免疫原性减弱[Liu,M.A.和J.B.Ulmer,质粒DNA疫苗的人临床试验.AdvGenet,2005.55:第25-40页]。DNA疫苗免疫原的工程的最近技术进展例如密码子最优化、RNA最优化和免疫球蛋白前导序列的添加已提高了DNA疫苗的表达和免疫原性[Andre,S.,等人,通过利用具有最优化的密码子选择的合成gp120序列进行DNA接种引发的增强的免疫反应.JVirol,1998.72(2):第1497-503页；Deml,L.,等人,密码子选择最优化对编码人免疫缺陷病毒1型Gag蛋白DNA候选疫苗的表达和免疫原性的多重效应.JVirol,2001.75(22):第10991-1001页；Laddy,D.J.,等人,基于共有序列的抗禽流感新型DNA疫苗的免疫原性.Vaccine,2007.25(16):第2984-9页；Frelin,L.,等人,密码子最优化和mRNA扩增有效地增强丙型肝炎病毒非结构3/4A基因的免疫原性.GeneTher,2004.11(6):第522-33页]。质粒递送系统的最近技术进步已提高了DNA疫苗的表达和免疫原性，包括技术例如电穿孔[Hirao,L.A.,等人,通过电穿孔进行的真皮内/皮下免疫提高了质粒疫苗在猪和猕猴中的递送和潜能.Vaccine,2008.26(3):第440-8页；Luckay,A.,等人,质粒DNA疫苗设计和体内电穿孔对猕猴中所得的疫苗特异性免疫反应的效应.JVirol,2007.81(10):第5257-69页；Ahlen,G.,等人,体内电穿孔通过增加的局部DNA摄入增强丙型肝炎病毒非结构3/4ADNA的免疫原性、蛋白质表达、炎症和CD3+T细胞的浸润.JImmunol,2007.179(7):第4741-53页]。此外，研究已表明共有免疫原的使用可以能够相较于单独的天然抗原增加细胞免疫反应的宽度(breadth)[Yan,J.,等人,由基于工程HIV-1亚型B共有序列的包膜DAN疫苗引发的增强的细胞免疫反应.MolTher,2007.15(2):第411-21页；Rolland,M.,等人,人免疫缺陷病毒1型蛋白的祖先树中心的构建和功能.JVirol,2007.81(16):第8507-14页]。然而，应承认打破癌症抗原的免疫耐受性和产生自身免疫是癌症疫苗的主要障碍。仍然需要编码前列腺癌抗原的核酸构建体和用于诱导抗前列腺癌抗原的免疫反应，从而打破免疫耐受性的组合物。仍然存在对经济有效的抗前列腺癌的有效的预防性和治疗。优选实施方案的概述本专利技术的方面包括包含编码一种或多种蛋白质的编码序列的核酸分子，所述蛋白质选自：a)SEQIDNO:2；与SEQIDNO:2具有98％的同源性的蛋白质，只要SEQIDNO:2的氨基酸69、78、80、82、102、110、137、139、165、189、203、220、232和248是保守的；或包含相应于SEQIDNO:2的至少256个氨基酸残基的氨基酸的SEQIDNO:2的免疫原性片段，只要SEQIDNO:2的氨基酸69、78、80、82、102、110、137、139、165、189、203、220、232和248是保守的；b)SEQIDNO:4；与SEQIDNO:4具有98％的同源性的蛋白质，只要SEQIDNO:4的氨基酸21、86、127、129、154、156、182、195、206、218、220、237、249、255、265、271和275是保守的；或包含相应于SEQIDNO:4的至少274个氨基酸残基的氨基酸的SEQIDNO:4的免疫原性片段，只要SEQIDNO:4的氨基酸21、86、127、129、154、156、182、195、206、218、220、237、249、255、265、271和275保守的；c)SEQIDNO:6；与SEQIDNO:6具有98％的同源性的蛋白质，只要SEQIDNO:6的氨基酸14、15、32、47、58、79、111、157、223、320、350、475、499、569、613、624、653、660、663、733和734是保守的；或包含相应于SEQIDNO:6的至少735个氨基酸残基的氨基酸的SEQIDNO:6的免疫原性片段，只要SEQIDNO:6的氨基酸14、15、32、47、58、79、111、157、223、320、350、475、499、569、613、624、653、660、663、733和734是保守的；d)SEQIDNO:8；与SEQIDNO:8具有至少98％的同源性的蛋白质，只要SEQIDNO:8的氨基酸21、31、32、49、64、75、96、128、174、240、337、367、492、516、565、586、630、641、670、677、680、750和751是保守的；或包含相应于SEQIDNO:8的至少752个氨基酸残基的氨基酸的SEQIDNO:8的免疫原性片段，只要SEQIDNO:8的氨基酸21、31、32、49、64、75、96、128、174、240、337、367、492、516、565、586、630、641、670、677、680、750和751是保守的；e)SEQIDNO:10；与SEQIDNO:10具有98％的同源性的蛋白质；或包含相应于SEQIDNO:10的至少333个氨基酸残基的氨基酸的SEQIDNO:10的免疫原性片段；f)SEQIDNO:12；与SEQIDNO:12具有98％的同源性的蛋白质；或包含相应于SEQIDNO:12的至少349个氨基酸残基的氨基酸的SEQIDNO:12的免疫原性片段；g)SEQIDNO:14；与SEQIDNO:14具有98％本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种核酸分子，其包含编码一种或多种蛋白质的编码序列，所述蛋白质选自：a)SEQ ID NO:6，与SEQ ID NO:6具有98％的同源性的蛋白质，只要SEQ ID NO:6的氨基酸14、15、32、47、58、79、111、157、223、320、350、475、499、569、613、624、653、660、663、733和734是保守的，或包含相应于SEQ ID NO:6的至少735个氨基酸残基的氨基酸的SEQ ID NO:6的免疫原性片段，只要SEQ ID NO:6的氨基酸14、15、32、47、58、79、111、157、223、320、350、475、499、569、613、624、653、660、663、733和734是保守的；b)SEQ ID NO:8，与SEQ ID NO:8具有至少98％的同源性的蛋白质，只要SEQ ID NO:8的氨基酸21、31、32、49、64、75、96、128、174、240、337、367、492、516、565、586、630、641、670、677、680、750和751是保守的，或包含相应于SEQ ID NO:8的至少752个氨基酸残基的氨基酸的SEQ ID NO:8的免疫原性片段，只要SEQ ID NO:8的氨基酸21、31、32、49、64、75、96、128、174、240、337、367、492、516、565、586、630、641、670、677、680、750和751是保守的。...

【技术特征摘要】
2010.11.12 US 61/413,176;2010.11.29 US 61/417,8171.一种核酸分子，其包含编码一种或多种蛋白质的编码序列，所述蛋白质选自：a)SEQIDNO:6，与SEQIDNO:6具有98％的同源性的蛋白质，只要SEQIDNO:6的氨基酸14、15、32、47、58、79、111、157、223、320、350、475、499、569、613、624、653、660、663、733和734是保守的，或包含相应于SEQIDNO:6的至少735个氨基酸残基的氨基酸的SEQIDNO:6的免疫原性片段，只要SEQIDNO:6的氨基酸14、15、32、47、58、79、111、157、223、320、350、475、499、569、613、624、653、660、663、733和734是保守的；b)SEQIDNO:8，与SEQIDNO:8具有至少98％的同源性的蛋白质，只要SEQIDNO:8的氨基酸21、31、32、49、64、75、96、128、174、240、337、367、492、516、565、586、630、641、670、677、680、750和751是保守的，或包含相应于SEQIDNO:8的至少752个氨基酸残基的氨基酸的SEQIDNO:8的免疫原性片段，只要SEQIDNO:8的氨基酸21、31、32、49、64、75、96、128、174、240、337、367、492、516、565、586、630、641、670、677、680、750和751是保守的。2.如权利要求1所述的核酸分子，其特征在于，该分子还编码至少一种选自下组的氨基酸序列：c)SEQIDNO:2，与SEQIDNO:2具有98％的同源性的蛋白质，只要SEQIDNO:2的氨基酸69、78、80、82、102、110、137、139、165、189、203、220、232和248是保守的，或包含相应于SEQIDNO:2的至少256个氨基酸残基的氨基酸的SEQIDNO:2的免疫原性片段，只要SEQIDNO:2的氨基酸69、78、80、82、102、110、137、139、165、189、203、220、232和248是保守的；和d)SEQIDNO:4，与SEQIDNO:4具有98％的同源性的蛋白质，只要SEQIDNO:4的氨基酸21、86、127、129、154、156、182、195、206、218、220、237、249、255、265、271或275是保守的，或包含相应于SEQIDNO:4的至少274个氨基酸残基的氨基酸的SEQIDNO:4的免疫原性片段，只要SEQIDNO:4的氨基酸21、86、127、129、154、156、182、195、206、218、220、237、249、255、265、271或275是保守的。3.如权利要求1-2任一所述的核酸分子，其特征在于，编码一种或多种选自SEQIDNO:6和SEQIDNO:8的蛋白质。4.根据权利要求1所述的核酸分子，其包含一种或多种核苷酸序列，所述序列选自：a)SEQIDNO:5的核苷酸1-2250，或与SEQIDNO:5的核苷酸1-2250具有98％的同源性的编码序列；和b)SEQIDNO:7的核苷酸1-2301，或与SEQIDNO:7的核苷酸1-2301具有98％的同源性的编码序列。5.如权利要求4所述的核酸分子，其特征在于，还包含至少一种选自以下的序列：c)SEQIDNO:1，或与SEQIDNO:1具有98％的同源...

【专利技术属性】
技术研发人员：D·B·韦纳，严健，B·费拉罗，N·Y·萨德赛，M·P·拉马纳坦，
申请(专利权)人：宾夕法尼亚大学托管会，英诺维欧药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：美国;US