一种用番石榴叶提取物制备抑菌类生物农药的方法技术

本发明专利技术公开了一种用番石榴叶提取物制备抑菌类生物农药的方法，包括以下步骤：A、番石榴叶的初级加工；B、番石榴叶的提取物制备；C、番石榴叶提取液的浓缩；D、脱脂；E、烘干磨粉；F、将干粉配制成农药。该干粉可配置成15-150mg/ml的水溶液，用于防治植物尤其是蔬菜的病菌。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种生物农药
的制备方法，具体涉及一种用番石榴叶提取物制备抑菌类生物农药的方法。
技术介绍
番石榴(PsidiumguafaVBL。)俗称拔子、鸡矢果、芭乐、红心果、喇叭果等，为桃金娘科番石榴属植物，是常绿小乔木或灌木。原产热带美洲和东南亚，现广泛分布和种植于热带、亚热带地区。番石榴是厦门市近年来发展较快，经济效益较好的水果之一。番石榴鲜叶及带叶嫩茎的干燥叶在布朗语中称“麻果”。番石榴叶中含有丰富的黄酮类化合物、酚类化合物、多糖、无机元素、挥发油、皂苷及齐墩果酸与熊果酸等多种功能成分。我国民间常用番石榴叶及其提取物治疗急性或慢性肠炎、痢疾等疾病。中医认为：番石榴叶，性平，味干涩，入脾、胃、大肠、肝经，具有生津止渴、除烦、收敛止泻、消炎止血、止痒、驱虫等功用。现代医学研究认为：番石榴叶具有降血糖、抗氧化、抗病毒、抗菌、抗伤害感受等药理学作用。国内外对番石榴叶有效成分的研究大多集中于研究其在医学上的作用。雷琦等用牛津杯法做抑菌实验，结果表明番石榴叶和果实的水提、醇粗提液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、阴沟肠杆菌、血溶葡萄球等均有很好的抑菌效果；叶和果实总黄酮提取液的抑菌作用也很明显。番石榴果实和叶片的提取物可使食源性病原菌株系的存活量和生长量显著降低。蔡玲斐等应用琼脂打孔扩散实验和试管稀释法，测定番石榴叶提取物对11种常见细菌的抑菌效果，实验发现相同浓度的番石榴叶提取物比鱼腥草注射液抑菌效果强。番石榴叶在农业上作为植物源农药的应用未见报道。开发番石榴叶为新的植物源农药，能够减少有机农药残留给人们生活不良影响。植物源农药又称植物性农药。利用植物资源开发的农药。包括从植物中提取的活性成分、植物本身和按活性结构合成的化合物及衍生物。植物源农药来源于自然，能在自然界降解，一般不会污染环境及农产品，在环境和人体中积累毒性的可能性不大，对人和牲畜相对安全，病害虫对其难以产生抗体，具有低毒、低残留的特点，能够保持农产品的高品质，再加上使用成本低等，优点越来越受到人们的重视与青睐。在全世界面临人口迅速增长、环境污染压力日趋严重的今天，更深入、更广泛的研究和开发安全、无毒、来源广、成本低的植物源农药具有重要的经济意义、生态意义和社会意义。我国是研究应用植物源农药最早的国家，早在二十世纪30年代，我国曾对烟草、鱼藤、巴豆、百部等植物进行过广泛的研究。进入80年代后，更多的研究者投身于有应用前途的植物源农药的研究开发，其中许多种类具有杀虫(菌)作用或已被作为植物源农药利用。目前有烟碱、苦参碱、楝素、茴蒿素和茶皂素等18种植物源农药已登记注册，生产厂家达46家。在国外，根据EPA统计资料，至1999年末，美国已有187种生物源农药的活性成分约700个产品登记注册，微生物源农药居多，植物源农药较少；1999年接收生物农药登记的品种为21个，其中植物源农药5个；2001年接收了58种生物农药的登记，其中28种属于植物源农药，在品种比例上，植物源农药首次超过微生物源农药。日本着重研究植物源农药的化学成分如苦参的分离、提纯、分子结构的鉴定，从而找到新品种的植物源农药。因此，对植物源农药的有效化学成分的提纯、分子结构的鉴定和理化性质的研究是重要的研究方向。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提出一种用番石榴叶提取物制备抑菌类生物农药的方法，使其对蔬菜常见真菌病害有较高的预防效果，且具有无公害、无污染和无残毒的特点，避免了化学农药的危害。本专利技术提供的技术方案如下：一种用番石榴叶提取物制备抑菌类生物农药的方法，包括以下步骤：A、番石榴叶的初级加工，将番石榴叶干燥并粉碎；B、番石榴叶的提取物制备(1)粗提：将经过初级加工后的番石榴叶粉，70-90℃加热，10-90％乙醇为提取剂，料液比为10-30倍，加热回流提取2-4h；制取番石榴叶黄酮的提取液；(2)精提：按以上提取工艺反复提取2-3次，直至基本将番石榴叶粉中的有效成分提取完毕；C、番石榴叶提取液的浓缩(1)离心：将番石榴叶提取液倒入离心仪，用3000-6000转，离心5-15分钟，收集上清液；(2)浓缩：将上步获得的上清液倒入真空浓缩旋蒸仪中，水浴40-60℃；将其浓缩至膏状，即得番石榴叶膏状提取物；D、脱脂(1)将番石榴叶膏加入0.5-3倍体积的石油醚，经过20-40分钟超声，再用摇床震荡50-70分钟，最后离心，移去石油醚层；(2)重复(1)步操作2-3次，得到脱脂番石榴叶膏；E、烘干磨粉将脱脂番石榴叶膏用烘箱，烘干至水分小于10％。研磨得番石榴叶提取液干粉；F、将干粉配制成农药。在本专利技术的较佳实施例中，步骤A包括如下步骤：(1)干燥：取收集来的成熟番石榴叶采用日光晾晒或烘干方法进行干燥至含水分≤10％；(2)去杂：将经过干燥后的番石榴叶经振动分拣筛处理、分离，滤去杂质；(3)粉碎：将经过以上工艺加工的符合标准的番石榴叶进行粉碎，粉碎过80目筛。在本专利技术的较佳实施例中，步骤C还包括：(3)回收：采用浓缩设备上的酒精回收装置，将酒精回收后经酒精检测仪检测≥80％时，可作为提取溶剂继续待用，如果达不到以上标准，可以单独用浓缩设备将其浓缩，达到标准以后收集待用。在本专利技术的较佳实施例中，步骤D还包括：(3)将(1)移去的石油醚层收集后，用真空浓缩旋蒸仪回收石油醚。在本专利技术的较佳实施例中，步骤E的烘干温度为40-70℃。在本专利技术的较佳实施例中，步骤F为将干粉配置为大于15mg/ml的水溶液，优选为20-150mg/ml的水溶液。由上述描述可知，本专利技术提供了一种番石榴叶提取物制备抑菌类生物农药的方法，番石榴叶通过初级加工、制备提取物、浓缩。制粉等步骤，获得干粉。该干粉可配置成15-150mg/ml的水溶液，用于防治植物尤其是蔬菜的病菌。附图说明图1为番石榴叶提取液干粉5mg/ml对4种病原菌物菌丝生长的毒力；A茄子白绢病菌；B甘蓝黑斑病菌；C白菜炭疽病菌；D黄瓜枯萎病菌；图片中左为对照。图2为番石榴叶提取液干粉10mg/ml对4种病原菌物菌丝生长的毒力；A茄子白绢病菌；B甘蓝黑斑病菌；C白菜炭疽病菌；D黄瓜枯萎病菌，图片中左为对照。图3为番石榴叶提取液干粉20mg/ml对4种病原菌物菌丝生长的毒力；A茄子白绢病菌；B甘蓝黑斑病菌；C白菜炭疽病菌；D黄瓜枯萎病菌，图片中左为对照。图4为番石榴叶提取液干粉40mg/ml对4种病原菌物菌丝生长的毒力；A茄子白绢病菌；B甘蓝黑斑病菌；C白菜炭疽病菌；D黄瓜枯萎病菌，图片中左为对照。图5为番石榴叶提取液干粉80mg/ml对4种病原菌物菌丝生长的毒力；A茄子白绢病菌；B甘蓝黑斑病菌；C白菜炭疽病菌；D黄瓜枯萎病菌，图片中左为对照。具体实施方式制备例1A、番石榴叶的初级加工(1)干燥：取收集来的成熟番石榴叶采用日光晾晒方法进行干燥至含水分≤10％；(2)去杂：将经过干燥后的番石榴叶经振动分拣筛处理、分离，滤去杂质；(3)粉碎：将经过以上工艺加工的符合标准的番石榴叶进行粉碎，粉碎过80目筛；B、番石榴叶的提取物制备(1)粗提：将经过初级加工后的番石榴叶粉，80℃加热，80％乙醇为提取剂，料液比为20倍，加热回流提取3h。制取番石榴叶黄酮的提取液；(2)精提：按以上提取工艺反复提取2次本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用番石榴叶提取物制备抑菌类生物农药的方法，包括以下步骤：A、番石榴叶的初级加工，将番石榴叶干燥并粉碎；B、番石榴叶的提取物制备(1)粗提：将经过初级加工后的番石榴叶粉，70‑90℃加热，10‑90％乙醇为提取剂，料液比为10‑30倍，加热回流提取2‑4h；制取番石榴叶黄酮的提取液；(2)精提：按以上提取工艺反复提取2‑3次；C、番石榴叶提取液的浓缩(1)离心：将番石榴叶提取液倒入离心仪，用3000‑6000转，离心5‑15分钟，收集上清液；(2)浓缩：将上步获得的上清液倒入真空浓缩旋蒸仪中，水浴40‑60℃；将其浓缩至膏状，即得番石榴叶膏状提取物；D、脱脂(1)将番石榴叶膏状提取物加入0.5‑3倍体积的石油醚，经过20‑40分钟超声，再用摇床震荡50‑70分钟，最后离心，移去石油醚层；(2)重复(1)步操作2‑3次，得到脱脂番石榴叶膏；E、烘干磨粉将脱脂番石榴叶膏用烘箱，烘干至水分小于10％，研磨得番石榴叶提取液干粉；F、将干粉配制成农药。

【技术特征摘要】
1.一种用番石榴叶提取物制备抑菌类生物农药的方法，包括以下步骤：A、番石榴叶的初级加工，将番石榴叶干燥并粉碎；B、番石榴叶的提取物制备(1)粗提：将经过初级加工后的番石榴叶粉，70-90℃加热，10-90％乙醇为提取剂，料液比为10-30倍，加热回流提取2-4h；制取番石榴叶黄酮的提取液；(2)精提：按以上提取工艺反复提取2-3次；C、番石榴叶提取液的浓缩(1)离心：将番石榴叶提取液倒入离心仪，用3000-6000转，离心5-15分钟，收集上清液；(2)浓缩：将上步获得的上清液倒入真空浓缩旋蒸仪中，水浴40-60℃；将其浓缩至膏状，即得番石榴叶膏状提取物；D、脱脂(1)将番石榴叶膏状提取物加入0.5-3倍体积的石油醚，经过20-40分钟超声，再用摇床震荡50-70分钟，最后离心，移去石油醚层；(2)重复(1)步操作2-3次，得到脱脂番石榴叶膏；E、烘干磨粉将脱脂番石榴叶膏用烘箱，烘干至水分小于10％，研磨得番石榴叶提取液干粉；F、将干粉配制成农药。2.如权利要求1所述的一种用番石榴叶提取物制备抑菌类生物农药的方法，其特...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈淳，林清洪，刘黎卿，陈菲，陈丽璇，林志楷，刘鸿洲，
申请(专利权)人：福建省亚热带植物研究所，
类型：发明
国别省市：福建;35