UCKL1AS在制备前列腺癌诊断试剂或试剂盒中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种与前列腺癌相关的分子标记物，该分子标记物UCKL1AS在前列腺癌组织中表达下调。本发明专利技术还公开了UCKL1AS在制备前列腺癌诊断试剂或试剂盒中的应用。利用该分子标记物及含有该分子标记物的前列腺癌诊断试剂或试剂盒不仅能够快速有效的做到早期检测，而且为基因治疗、药物治疗等临床应用提供了治疗靶点和重要依据。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物
，具体涉及UCKL1AS在制备前列腺癌诊断试剂或试剂盒中的应用。
技术介绍
前列腺癌是发生于男性前列腺组织中的恶性肿瘤，在全球范围内已经成为男性第二大类常见肿瘤，位于癌症相关死亡率第六位。在欧美等发达国家和地区，它是男性最常见的恶性肿瘤，其死亡率居各种癌症的第二位；在亚洲，其发病率低于西方国家，但近年来呈迅速上升趋势，且增长比欧美发达国家更加迅速。我国前列腺癌发病率也在逐年提高，已位于男性泌尿生殖系统恶性肿瘤的第三位，仅次于膀胱癌和肾癌。前列腺癌一般在50岁以后发病，95％发生于60岁以上的老年男性，发生率持续地随着年龄增长而增加。前列腺癌早期多无任何症状，即使有所不适，也不足以引起病人的重视，当肿瘤增大压迫尿道时，又往往与前列腺增生相混淆。在我国约80％的病人首先发现远处转移病灶才发现前列腺癌。此时，病变已达晚期，预后不良。所以，前列腺癌的早期诊断对前列腺癌病人的治疗有极为重大的意义。目前前列腺癌的临床诊断方式目前主要有前列腺直肠指检(DRE)、血清前列腺特异性抗原(PSA)检测、直肠超声波检测、活组织病理检查等。直肠指检是前列腺癌诊断的经典技术，主要通过医生的食指触摸前列腺，以判断前列腺结节的大小和形状，从而判断是否患有前列腺癌。但直肠指检的局限性也很强：(1)患者前列腺肿块不大时，易漏诊；(2)部分患者前列腺癌肿大不明显，但已属于晚期；(3)患者直肠有疾患时不能使用此检测；(4)医生经验不足时可能有漏诊或者误诊的可能。前列腺超声波检测虽然操作简单直观、无损伤，但该方法容易与前列腺炎和前列腺肥大混同，已不再用于前列腺癌分期诊断。活组织病理检查因其创伤性、复杂性不能作为初筛的手段，但它是前列腺癌确诊的金标准，一般与其他方法技术连用。目前对前列腺癌的筛查诊断主要依靠血清PSA检测和前列腺穿刺病理活检相结合的方法。正常情况下血液中的PSA不高(不高于4ng/ml)，当处于前列腺癌及其他前列腺疾病患病状态时，PSA升高成为目前筛查前列腺癌最敏感的瘤标，但PSA增高也常见与非前列腺癌疾病，如前列腺炎症、前列腺增生等多重泌尿系统疾病有关，因此不易确诊，甚至可能导致疾病的误检、误诊或者病情的延误。此外，PSA增高确诊前列腺癌时，往往患者已经属于中后期，达不到早期诊断的目的。而穿刺活检的检出率与活体穿刺的次数、位置都有较大关系，不是非常稳定的诊断方案。因此，研究更有效的前列腺癌标记物对提高前列腺癌的早期诊断及为患者制定合理的个体化治疗方案，减少前列腺癌患者死亡率和改善生活质量有重要的意义，如果能有一种检测试剂盒，可以提高前列腺癌的检出率和准确率，对于前列腺癌的临床治疗有着重大的意义。lncRNA(longnon-codingRNA，长链非编码RNA)，是一类转录本长度超过200bp核苷酸的非编码RNA，近年研究发现它是一类具有重要生物学功能的RNA，参与基因组印记、染色体沉默、染色质修饰、转录激活、转录干扰、核内运输等多种重要的调控过程，在细胞分化和发育、基因转录和翻译、遗传和表观遗传等生命活动中均发挥重要的调控作用。近年来，越来越多的权威研究证实lncRNA在肿瘤的发生发展中起着抑制或促进肿瘤的作用，在调控肿瘤细胞增殖、凋亡、细胞周期、侵袭转移能力等方面，均具有十分重要作用。目前己有较多lncRNAs被证实在包括乳腺癌、前列腺、黑色素瘤、肝癌、结肠癌、膀胱癌等在内的人类多种肿瘤中存在差异表达并执行重要的调控功能。早期有效检测肿瘤的发生、发展及提高抗癌药物的疗效对于癌症的治疗尤为重要，专利技术新型肿瘤标志物作为诊断与治疗的靶点一直是肿瘤研究的热点。UCKL1AS属于lncRNA，全称是UCKL1antisenseRNA1，位于第20号染色体，全长3571bp，目前尚未发现它在前列腺癌发生发展和诊断中的相关报道。近年来的研究表明，lncRNA与前列腺癌密切相关，它们可能参与肿瘤的发生、发展和转移，所以对肿瘤的发病机制、早期诊断、个体化治疗、转移的检测和预后等可能有相应的作用。
技术实现思路
为了实现前列腺癌的早期发现，早期干预，本专利技术的目的在于提供一种与前列腺癌相关的新的分子标记物。本专利技术的还一目的是提供该分子标记物在制备前列腺癌诊断试剂或试剂盒中的应用。为实现上述目的，本专利技术首先提供UCKL1AS作为检测前列腺癌的分子标记物的应用。优选的，所述分子标记物UCKL1AS包含如SEQIDNO:2所示的特异核苷酸序列。本专利技术经研究发现UCKL1AS在前列腺癌生物学样品中表达下调，显示UCKL1AS与前列腺癌的肿瘤发生、发展存在着密切的相关性。进一步地，本专利技术提供了UCKL1AS在制备前列腺癌诊断试剂或试剂盒中的应用。优选的，所述的试剂是指检测所述的UCKL1AS表达量的寡聚核苷酸，所述的试剂盒是指包含检测所述的UCKL1AS表达量的寡聚核苷酸。进一步地，本专利技术提供了检测UCKL1AS表达量的寡聚核苷酸序列在制备前列腺癌诊断试剂或试剂盒中的应用，其特征在于，所述寡聚核苷酸包含如SEQIDNO:3-6的组合。更进一步地，本专利技术提供了一种前列腺癌诊断试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括以下组分：(1)组织样本、血液或尿液中总RNA提取试剂：Trizol、氯仿、异丙醇和75％乙醇等。(2)反转录试剂：逆转录缓冲液、M-MLV逆转录酶、热稳定DNA聚合酶活性的酶、RNA酶抑制剂和T重复寡核苷酸OligodT。(3)定量PCR试剂：PCR缓冲液、SYBRGreen荧光染料、dNTPs组成的SYBRGreen聚合酶链式反应体系，引物和RNaseFreeH2O。(4)前列腺正常组织cDNA：作为阴性对照与检测样本cDNA共同定量PCR检测，每个反应体系使用与检测样本cDNA相同量。优选的，所述试剂盒中的定量PCR试剂中的引物为SEQIDNO:3-6的组合。本专利技术的有益效果如下：本专利技术公开了一种与前列腺癌相关的新的分子标记物UCKL1AS，并进一步证实UCKL1AS在前列腺癌组织中表达下调，可在制备检测前列腺癌的试剂或工具中应用。利用该分子标记物可以在肿瘤发生的早期进行诊断，快速有效，不仅对肿瘤的早期治疗和医疗成本的节约有重要意义，而且为基因治疗、药物治疗等临床应用提供了治疗靶点和重要依据。附图说明图1本专利技术中实施例2中前列腺癌组织样本中UCKL1AS表达下调。具体实施方式以下实施例用于说明本专利技术，但不用来限制本专利技术的范围。若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段，所用的试剂可以商业购买得到。本专利技术的专利技术人对10例前列腺癌组织样本及对应癌旁组织样本进行高通量测序，结合生物信息学方法进行基因筛选，挑选出候选lncRNAUCKL1AS，现有研究中并没有UCKL1AS和前列腺癌相关的报道，进一步，专利技术人进行了分子生物学方法验证，证实了UCKL1AS在前列腺癌组织中表达下调，其相关制剂可用于治疗前列腺癌。本专利技术的UCKL1AS是在本专利技术之前的已知lncRNA，其基本信息如下：Genbank登录号：GeneID:100113386，来源于人类基因组，其核苷酸序列如SEQIDNO.1所示。本专利技术采用RT-PCR方法检测上述lncRNA在前列腺癌患者和正常人群中的表达，并验证了该lncRNA在本文档来自技高网...

【技术保护点】
UCKL1AS作为前列腺癌分子标记物的应用，其特征在于，所述UCKL1AS的核苷酸序列为SEQ ID NO:1所示。

【技术特征摘要】
1.UCKL1AS作为前列腺癌分子标记物的应用，其特征在于，所述UCKL1AS的核苷酸序列为SEQIDNO:1所示。2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述前列腺癌分子标记物UCKL1AS包含如SEQIDNO:2所示的特异核苷酸序列。3.如权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述前列腺癌分子标记物UCKL1AS在前列腺癌组织中表达下调。4.UCKL1AS在制备前列腺癌诊断试剂或试剂盒中的应用。5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述的试剂是指检测所述的UCKL1AS表达量的寡聚核苷酸，所述的试剂盒...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘昊，
申请(专利权)人：北京致成生物医学科技有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11