一种蜜柚叶提取物及其制备方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种蜜柚叶提取物及其制备方法与应用。制备方法包括如下步骤：（1）将蜜柚叶烘干去梗，粉碎后过筛；（2）过筛后的蜜柚叶粉末用乙醇进行热提取，得到蜜柚叶乙醇提取液；（3）将蜜柚叶乙醇提取液浓缩后冻干，得到蜜柚叶提取物。该蜜柚叶提取物中主要活性成分为黄酮和多酚。本发明专利技术采用简单的乙醇热提取方法得到蜜柚叶提取物。本发明专利技术提取的蜜柚叶提取物具有明显的抗氧化和降尿酸活性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及柚子叶的开发利用，具体涉及一种蜜柚叶提取物及其制备方法和应用。
技术介绍
我国柚子资源丰富，分布广泛，主要分布于广东、广西、福建、云南等地，因其清爽的口感，独特的芳香而倍受人们青睐。目前，人们对柚子叶的研究主要集中于柚子叶精油的提取，对柚子叶多酚、黄酮的研究鲜有报道。多酚、黄酮是广泛存在于植物皮、根、叶、果实中的一类天然有机化合物，具有广泛的生物活性，如抗氧化、抗肿瘤、抑菌、调节免疫、抗炎抗过敏、止血镇痛等，已被列为保健食品的一类功能因子。自由基导致的氧化损伤与许多疾病的发生有密切的关系，植物中安全有效的抗氧化剂是现阶段研究的热点，但柚子叶抗氧化性还鲜有报道。黄嘌呤氧化酶(XanthineOxidase,XOD)是体内核酸代谢中重要的酶，可催化黄嘌呤和次黄嘌呤氧化生成尿酸，同时产生过氧化物自由基，尿酸浓度过高会引起高尿酸血症，导致痛风发作，因此，抑制XOD的活性可有效减少体内尿酸的生成，阻止或延缓痛风的发作，减少机体损伤。随着人们生活方式的改变，大量高嘌呤食物被摄入，导致痛风发病率呈逐年上升趋势，已成为我国次于糖尿病的第二大代谢类疾病。但目前其治疗药物往往治标不治本，且伴有不良反应，因此天然安全有效的抗痛风药物越来越受到人们的关注。近年来，诸多研究关注中草药提取物对黄嘌呤氧化酶抑制的效果，但柚子叶提取物对黄嘌呤氧化酶活性方面的探究鲜有报道。本实验主要研究柚子叶活性成分多酚与黄酮的提取工艺，并首次研究提取物对黄嘌呤氧化酶的抑制活性，探讨其作为降尿酸功能因子的可能性，同时为柚子叶的综合开发利用提供一定的参考依据。
技术实现思路
本专利技术的首要目的在于提供一种具有抗氧化和降尿酸功效的蜜柚叶提取物及其制备方法，该蜜柚叶提取物可用于开发具有预防或治疗痛风类疾病功效的保健品及药品。本专利技术通过如下技术方案实现。一种蜜柚叶提取物的制备方法，包括如下步骤：(1)将蜜柚叶烘干去梗，粉碎后过筛；(2)过筛后的蜜柚叶粉末用乙醇进行热提取，得到蜜柚叶乙醇提取液；(3)将蜜柚叶乙醇提取液浓缩后冻干，得到蜜柚叶提取物。进一步地，步骤(1)中，所述过筛为过60～80目筛。进一步地，步骤(2)中，所述乙醇为体积分数50～80％的乙醇。进一步地，步骤(2)中，蜜柚叶粉末与乙醇的料液比为1:15～1:30g/mL。进一步地，步骤(2)中，所述热提取是：在40～80℃温度下提取6～10h，重复三次，合并滤液。进一步地，步骤(3)中，所述浓缩是浓缩至相对于水的密度为1.15～1.30。由上述任一项所述制备方法得到的蜜柚叶提取物。进一步地，所述蜜柚叶提取物的主要成分为黄酮和多酚。进一步地，所述蜜柚叶提取物具有抗氧化性和降尿酸活性。更进一步地，所述抗氧化性体现为对DPPH·自由基、羟自由基、超氧阴离子和ABTS·+的活性清除。更进一步地，所述对DPPH·自由基、羟自由基、超氧阴离子和ABTS.+的活性清除的IC50值分别为1.24mg/mL、1.04mg/mL、1.49mg/mL和3.31mg/mL。更进一步地，所述降尿酸活性体现为体外降尿酸活性，体外降尿酸活性的检测采用比色法。更进一步地，所述降尿酸活性体现为抑制黄嘌呤氧化酶的活性，对黄嘌呤氧化酶活性抑制的IC50值为4.8mg/mL。所述蜜柚提取物用作包括痛风疾病的辅助治疗药物或用于制备具有以降尿酸为功能因子的保健食品及药品。所述蜜柚叶提取物用于制备降尿酸、促进尿酸肾排泄、修复肾损伤的药物；将蜜柚叶提取物与药学上可接受的载体制成保健食品。与现有技术相比，本专利技术具有如下优点和有益效果；(1)本专利技术提取方法简单，方便快捷；(2)本专利技术通过乙醇热提取的方式获得蜜柚叶提取物，得到的蜜柚叶提取物有显著的降尿酸活性，可以进一步用于筛选制备和开发降尿酸药物和保健食品。附图说明图1为实施例1中蜜柚叶提取物对DPPH·自由基的活性清除作用曲线图；图2为实施例2中蜜柚叶提取物对羟自由基的活性清除作用曲线图；图3为实施例3中蜜柚叶提取物对超氧阴离子的活性清除作用曲线图；图4为实施例4中蜜柚叶提取物对ABTS﹒+的活性清除作用曲线图；图5为实施例1～4蜜柚叶提取物对各自由基离子活性清除的IC50值的柱状图；图6为实施例5中蜜柚叶提取物对黄嘌呤氧化酶的抑制活性曲线图。具体实施方式下面通过实施例的方式进一步说明本专利技术，但并不因此将本专利技术限制在所述的实施例范围之中，下列实施例中未注明具体条件的实验方法，均按照常规方法和条件，或按照商品说明书选择，如下实施例中的原料均为市售。实施例1蜜柚叶提取物对DPPH·自由基的清除作用1、蜜柚叶提取物的提取(1)将蜜柚叶烘干去梗，粉碎后过60目筛；(2)过筛后的蜜柚叶粉末用体积分数为80％的乙醇在80℃下热提取6h，重复三次，合并滤液，得到蜜柚叶乙醇提取液；蜜柚叶粉末与乙醇的料液比为1:30g/mL；(3)将蜜柚叶乙醇提取液浓缩至相对于水的密度为1.15后冻干，得到蜜柚叶提取物。2、实验样品及试剂制备蜜柚叶提取物溶液：准确称取20mg蜜柚叶提取物，用蒸馏水配成2.5mg/ml溶液，分别稀释成0.5、1.0、1.5、2.0mg/ml的蜜柚叶提取物溶液，备用。0.2mmol/L的DPPH·溶液：准确称取DPPH·0.00788g溶解于100ml95％乙醇，避光保存。3、实验过程将2mLDPPH·溶液(0.2mmol/L)置于试管中，加入2mL蜜柚叶提取物溶液，震荡均匀，室温放置30min后在517nm处测定吸光值(Ai)；以2mL95％乙醇加入2mL蒸馏水调零；对照为：2mLDPPH·溶液加上2mL95％乙醇在517nm处测定波长下的吸光值(Ac)，2mL蜜柚叶提取物溶液和2mL95％乙醇混合后在517nm处测定波长的吸光值(Aj)。提取物对DPPH·的清除能力用抑制率R表示：R＝[1-(Ai-Aj)/Ac]×100％。以不同浓度的Vc及没食子酸溶液为标准品，并以同样的实验方法测定不同浓度的Vc及没食子酸溶液对DPPH·自由基的活性清除。4、实验结果得到的对DPPH·自由基的清除作用的实验结果如图1，由图1可知，蜜柚叶提取物对DPPH·自由基的活性清除的IC50值为1.24mg/mL。实施例2蜜柚叶提取物对羟自由基的清除作用1、蜜柚叶提取物的提取(1)将蜜柚叶烘干去梗，粉碎后过60目筛；(2)过筛后的蜜柚叶粉末用体积分数为70％的乙醇在80℃下热提取8h，重复三次，合并滤液，得到蜜柚叶乙醇提取液；蜜柚叶粉末与乙醇的料液比为1:15g/mL；(3)将蜜柚叶乙醇提取液浓缩至相对于水的密度1.15后冻干，得到蜜柚叶提取物。2、实验样品及试剂制备蜜柚叶提取物溶液：准确称取20mg蜜柚叶提取物，用蒸馏水配成2.5mg/ml溶液，分别稀释成0.5、1.0、1.5、2.0mg/ml的蜜柚叶提取物溶液，备用。5mmol/L邻二氮菲溶液：0.0991g邻二氮菲固体，加入2ml无水乙醇溶解后加入98ml去离子水。pH7.4磷酸盐缓冲液：3.12gNaH2PO4·2H2O定容到100ml，得溶液A；7.16gNa2HPO4·12H2O定容到100ml，得溶液B；取9.5ml溶液A及40.5ml溶液B混合于烧杯中，调节pH至7.4。15mmol/LEDTA溶液本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种蜜柚叶提取物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）将蜜柚叶烘干去梗，粉碎后过筛；（2）过筛后的蜜柚叶粉末用乙醇进行热提取，得到蜜柚叶乙醇提取液；（3）将蜜柚叶乙醇提取液浓缩后冻干，得到蜜柚叶提取物。

【技术特征摘要】
1.一种蜜柚叶提取物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）将蜜柚叶烘干去梗，粉碎后过筛；（2）过筛后的蜜柚叶粉末用乙醇进行热提取，得到蜜柚叶乙醇提取液；（3）将蜜柚叶乙醇提取液浓缩后冻干，得到蜜柚叶提取物。2.根据权利要求1所述的一种蜜柚叶提取物的制备方法，其特征在于，步骤（1）中，所述过筛为过60~80目筛。3.根据权利要求1所述的一种蜜柚叶提取物的制备方法，其特征在于，步骤（2）中，所述乙醇为体积分数50~80%的乙醇，蜜柚叶粉末与乙醇的料液比为1:15~1:30g/mL，所述热提取是：在40~80℃温度下提取6~10h，重复三次，合并滤液；步骤（3）中，所述浓缩是浓缩至相对于水的密度为1.15~1.30。4.由权利要求1~3任一项所述制备方法得到的蜜柚叶提取物，其特征在于，所述蜜柚叶提取物的主要成分为黄酮和多酚；所述蜜柚叶提取物具有抗氧化性和降尿酸活性。5.根据权利要求4所述的一种蜜柚叶提取物，其特征在于，所述抗氧化性体现为对DPPH•自由基、羟自由基、超氧阴...

【专利技术属性】
技术研发人员：任娇艳，史传超，郑亚美，
申请(专利权)人：华南理工大学，
类型：发明
国别省市：广东;44