抗免疫原性糖肽的抗体、包含其的组合物及其用途制造技术

本文公开的是特异性结合于至少一种由免疫原性糖肽所定义的表位的抗体。本发明专利技术的其他方面是包含该抗体的药物组合物；以及用于预防和/或治疗Globo‑H‑阳性癌症的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及癌症的免疫疗法领域。更具体地，本专利技术涉及抗免疫原性糖肽的抗体、含该抗体的药物组合物及其在癌症疗法中的用途。专利技术背景GloboH是一种六糖且属于过度表达于各种上皮癌细胞(包括乳腺癌细胞、结肠癌细胞、卵巢癌细胞、胰腺癌细胞、肺癌细胞和前列腺癌细胞)的表面上的大量肿瘤相关碳水化合物抗原。GloboH的异常表达使其成为免疫疗法及研发GloboH-阳性癌症的癌症疫苗的引人注目的候选者。然而，如同大多数碳水化合物抗原一样，GloboH通常为免疫系统所耐受，因此，GloboH所诱导的免疫原性有限。另外，生产抗特异性免疫原的抗体通常涉及两种淋巴细胞(B细胞及辅助T细胞)的协同相互作用。但是，GloboH无法单独激活辅助T细胞，这也是因于GloboH的免疫原性差。因此，以GloboH的免疫接种通常具有以下特征：免疫球蛋白M(IgM)的滴度低且无法类别转化为免疫球蛋白G(IgG)，以及抗体亲和力成熟无效。已开发出各种途径来解决上述缺陷。在某些研究中，具有T-表位的外来载体蛋白质或肽(诸如钥孔戚血蓝素(KLH)或去毒破伤风类毒素(TT))已与碳水化合物抗原缀合，以期改善碳水化合物抗原的免疫原性。US20010048929提供一种多价免疫原性分子，其包括含至少一个功能T细胞表位的载体分子和多个各连接至该载体分子及各含至少一种功能B细胞表位的不同碳水化合物片段，其中该载体分子赋予该多个碳水化合物片段提高的免疫原性，且其中该碳水化合物片段是GloboH、LeY或STn。US20120328646提供一种含有经由对硝基苯基连接子以化学方式缀合至免疫原性载体白喉毒素交叉反应物质197(DT-CRM197)(Th表位)的GloboH(B细胞表位)的基于碳水化合物的疫苗，其在乳腺癌模型中提供免疫原性，结果显示在异种移植研究中的肿瘤形成延迟。US20120263749涉及一种用于治疗癌症的多价疫苗，其包含至少两个选自包含以下的组的缀合抗原：诸如GloboH、Lewis抗原和神经节苷脂的糖脂抗原、多糖抗原、粘蛋白抗原、糖基化粘蛋白抗原和适合的佐剂。尽管如此，将碳水化合物缀合至载体蛋白质带来几个新的问题。根据Ingale等人，外来载体蛋白质及将载体蛋白质与碳水化合物连接在一起的连接子可引发强烈B细胞反应，从而导致抑制抗碳水化合物表位的抗体反应(IngaleS.等人，Robustimmuneresponseselicitedbyafullysyntheticthree-componentvaccine.NatChemBiol.2007年10月；3(10):663-7.Epub2007年9月2日)。此外，Ingale等人也指出，缀合化学难以控制，得到组成及结构具有不确定性的缀合物，其可影响免疫反应的可再现性。考虑到上述因素，Ingale等人认为，使用碳水化合物-蛋白质缀合物的临床前及临床研究导致混合结果并不出人意料。例如，Kuduk等人教示，在佐剂QS-21存在下用缀合至KLH的Tn-抗原的三聚体簇的免疫接种在小鼠中引起适度IgG抗体效价(KudukSD等人，Syntheticandimmunologicalstudiesonclusteredmodesofmucin-relatedTnandTFO-linkedantigens:thepreparationofaglycopeptide-basedvaccineforclinicaltrialsagainstprostatecancer.JAmChemSoc.1998；120:12474–12485)；而Slovin等人教示，相同疫苗在复发性前列腺癌患者的临床试验中提供低中值IgG及IgM抗体效价(SlovinSF等人，Fullysyntheticcarbohydrate-basedvaccinesinbiochemicallyrelapsedprostatecancer:clinicaltrialresultswithalpha-N-acetylgalactosamine-O-serine/threonineconjugatevaccine.JClinOncol.2003；21:4292–4298)。此外，对于具有免疫低下状态的癌症患者，具体地在接受化疗或放射疗法的患者以及晚期癌症患者中，主动免疫干预的疗效通常有限，因为这些患者可能无法产生足够引发抗肿瘤效应的抗体。鉴于前文，此项技术中存在研发用于改良基于碳水化合物的疫苗的免疫接种和/或疗效的替代性策略的需求。
技术实现思路
下文呈现本公开的简单概述，以供读者的基本理解。此
技术实现思路
并非本公开的详尽概述，且其并未明确本专利技术的关键/决定性元素或描述本专利技术的范围。其唯一目的是简单呈现本文所公开的一些概念，作为稍后呈现的较详细描述的引子。本公开涉及一种如本公开的上述任何方面/实施方案的特异性结合GloboH的抗体。根据某些实施方案，该抗体是单克隆抗体。根据可选实施方案，该抗体是嵌合或人源化抗体。在另一方面，本公开涉及一种用于治疗有此需要的受试者的癌症的药物组合物。根据本公开的一个实施方案，该药物组合物包含(1)治疗有效量的如本公开的任何上述方面/实施方案的抗体，以及视情况(2)药学上可接受的载体。在另一方面，本公开涉及一种用于治疗有此需要的受试者的癌症的方法。根据本公开的实施方案，该方法包括向该受试者施用如本公开的任何上述方面/实施方案的抗体或药物组合物。附图简述图1A至E说明细胞结合分析的结果(A：同种型；B：VK9；C：MZ-2；D：对照血清；E：α-GloboH血清)。图2说明根据本公开的几个工作实例的抗GloboHIgG抗体对原发性卵巢癌细胞的结合亲和力。图3是说明根据本公开的一个工作实例的系列聚糖-珠粒结合分析的结果的FACS图表。图4A和B显示据本公开的一个工作实例的抗-GloboHIgG抗体的蛋白质折叠的模拟(A：小鼠MZ-2单克隆抗体；B：人源化MZ-2单克隆抗体)。图5A至E显示根据本公开的一个工作实例的抗-GloboHIgG抗体的结合亲和力，其代表缔合及解离曲线拟合及解离常数(A：mMZ-2；B：cMZ-2；C：hMZ-2L；D：MK-1；E：hMZ-2Lw)。图6显示，含有超过1.6μg/mlhMZ-2Lw抗体的人类血清在乳腺癌MCF-7细胞中引起补体依赖性细胞毒性。图7显示，浓度高于约10及20μg/ml的hMZ-2Lw抗体在人类卵巢癌细胞株TOV21G中产生剂量依赖性细胞毒性。图8显示，浓度高于约10及20μg/ml的hMZ-2Lw抗体在人类胰腺癌细胞株HPAC中产生剂量依赖性细胞毒性。图9A和B显示本专利技术hMZ-2Lw和MK1抗体对MCF-7细胞(乳腺癌细胞株)的抗原依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)活性。图10A和B显示本专利技术hMZ-2Lw和MK1抗体对TOV21G细胞(卵巢癌细胞株)的抗原依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)活性。图11显示施用hMZ-2Lw和MK1抗体两者显著抑制肿瘤生长，而对照IgG不会实质上影响肿瘤生长。图12显示hMZ-2抗体在乳腺癌皮下模型MCF-7细胞中的结果。图13A和B显示hMZ-2抗体在胰腺癌皮下模型HPAC细胞中的结果。(A：肿瘤照片；B：本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的抗‑Globo H抗体或其抗原结合部分，其包括人源化抗‑Globo H抗体或其抗原结合部分，其包含以下至少一种：由GFSLSTFDMGVG(SEQ ID NO:1)、GSSLSTFDVGVG(SEQ ID NO:2)、GFSLGTFDLGIG(SEQ ID NO:3)、GFSLSTFDLGIG(SEQ ID NO:4)的氨基酸残基或其氨基酸序列相对于SEQ ID NO:1至4中任一个具有至少80％同一性的变体组成的重链互补决定区1(H‑CDR1)；由HIWWDDDKYYNPA(SEQ ID NO:5)、HIWGDDDKYYNPA(SEQ ID NO:6)的氨基酸残基或其氨基酸序列相对于SEQ ID NO:5及6中任一个具有至少80％同一性的变体组成的重链CDR2(H‑CDR2)；以及由LYGNYLTSFYCDY(SEQ ID NO:7)或LSGNYLTSFYCDY(SEQ ID NO:8)、LYGNYLRSYYCDY(SEQ ID NO:9)的氨基酸残基或其氨基酸序列相对于SEQ ID NO:7至9中任一个具有至少80％同一性的变体组成的重链CDR3(H‑CDR3)；和以下至少一种：由SASSSVSYMH(SEQ ID NO:10)、SASSRVSYMH(SEQ ID NO:11)、SARSSVSYMH(SEQ ID NO:12)、RASSSVSYMH(SEQ ID NO:13)的氨基酸残基或其氨基酸序列相对于SEQ ID NO:10至13中任一个具有至少80％同一性的变体组成的轻链CDR1(L‑CDR1)；由ATSNLAS(SEQ ID NO:14)、WTSDRYS(SEQ ID NO:15)、DTSKLAS(SEQ ID NO:16)的氨基酸残基或其氨基酸序列相对于SEQ ID NO:14至16中任一个具有至少80％同一性的变体组成的轻链CDR2(L‑CDR2)；以及由QQWSSNPFT(SEQ ID NO:17)、QQWSSNPLT(SEQ ID NO:18)、QQHLHIPYT(SEQ ID NO:19)的氨基酸残基或其氨基酸序列相对于SEQ ID NO:17至19中任一个具有至少80％同一性的变体组成的轻链CDR3(L‑CDR3)；以使得所述分离的重组抗体或其抗原结合部分结合于Globo H。...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.03.19 US 61/955,2161.一种分离的抗-GloboH抗体或其抗原结合部分，其包括人源化抗-GloboH抗体或其抗原结合部分，其包含以下至少一种：由GFSLSTFDMGVG(SEQIDNO:1)、GSSLSTFDVGVG(SEQIDNO:2)、GFSLGTFDLGIG(SEQIDNO:3)、GFSLSTFDLGIG(SEQIDNO:4)的氨基酸残基或其氨基酸序列相对于SEQIDNO:1至4中任一个具有至少80％同一性的变体组成的重链互补决定区1(H-CDR1)；由HIWWDDDKYYNPA(SEQIDNO:5)、HIWGDDDKYYNPA(SEQIDNO:6)的氨基酸残基或其氨基酸序列相对于SEQIDNO:5及6中任一个具有至少80％同一性的变体组成的重链CDR2(H-CDR2)；以及由LYGNYLTSFYCDY(SEQIDNO:7)或LSGNYLTSFYCDY(SEQIDNO:8)、LYGNYLRSYYCDY(SEQIDNO:9)的氨基酸残基或其氨基酸序列相对于SEQIDNO:7至9中任一个具有至少80％同一性的变体组成的重链CDR3(H-CDR3)；和以下至少一种：由SASSSVSYMH(SEQIDNO:10)、SASSRVSYMH(SEQIDNO:11)、SARSSVSYMH(SEQIDNO:12)、RASSSVSYMH(SEQIDNO:13)的氨基酸残基或其氨基酸序列相对于SEQIDNO:10至13中任一个具有至少80％同一性的变体组成的轻链CDR1(L-CDR1)；由ATSNLAS(SEQIDNO:14)、WTSDRYS(SEQIDNO:15)、DTSKLAS(SEQIDNO:16)的氨基酸残基或其氨基酸序列相对于SEQIDNO:14至16中任一个具有至少80％同一性的变体组成的轻链CDR2(L-CDR2)；以及由QQWSSNPFT(SEQIDNO:17)、QQWSSNPLT(SEQIDNO:18)、QQHLHIPYT(SEQIDNO:19)的氨基酸残基或其氨基酸序列相对于SEQIDNO:17至19中任一个具有至少80％同一性的变体组成的轻链CDR3(L-CDR3)；以使得所述分离的重组抗体或其抗原结合部分结合于GloboH。2.如权利要求1所述的分离的抗-GloboH抗体或其抗原结合部分，其中所述序列同一性为至少90％。3.如权利要求1所述的分离的抗-GloboH抗体或其抗原结合部分，其为单克隆抗体、嵌合抗体或人源化抗体。4.如权利要求1所述的分离的抗-GloboH抗体或其抗原结合部分，其包含(i)重链可变区，其包括包含选自由SEQIDNO:1至4组成的组的H-CDR1、选自由SEQIDNO:5及6组成的组的H-CDR2及选自由SEQIDNO:7至9组成的组的H-CDR3的重链可变区，以及(ii)轻链可变区，其包括选自由SEQIDNO:10至13组成的组的L-CDR1、选自由SEQIDNO:14至16组成的组的L-CDR2及选自由SEQIDNO:17至19组成的组的L-CDR3。5.如权利要求1所述的分离的抗-GloboH抗体或其抗原结合部分，其中H-CDR1是SEQIDNO:3；H-CRD2是SEQIDNO:5；H-CDR3是SEQIDNO:8；L-CDR1是SEQIDNO:10；L-CDR2是SEQIDNO:16；且L-CDR3是SEQIDNO:18。6.如权利要求1所述的分离的抗-GloboH抗体或其抗原结合部分，其包含(i)重链可变区，其包含相对于SEQIDNO:140至163中的任一氨基酸序列具有至少85％同一性的氨基酸序列，以及(ii)轻链可变区，其包含相对于SEQIDNO:164至199中的任一氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列。7.如权利要求6所述的分离的抗-GloboH抗体或其抗原结合部分，其中如上所述的序列同一性为至少90％。8.如权利要求6所述的分离的抗-GloboH抗体或其抗原结合部分，其包含(i)重链可变区，其包含相对于SEQIDNO:147的氨基酸序列具有至少85％同一性的氨基酸序列，以及(ii)轻链可变区，其包含相对于SEQIDNO:195的氨基酸序列具有至少80％同一性的氨...

【专利技术属性】
技术研发人员：张志隆，吴昭志，
申请(专利权)人：台湾基督长老教会马偕医疗财团法人马偕纪念医院，
类型：发明
国别省市：中国台湾;71