抗心磷脂抗体IgM化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种抗心磷脂抗体IgM化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法，抗心磷脂抗体IgM化学发光免疫检测试剂盒包括：抗心磷脂抗体IgM单克隆抗体包被的羧基化的磁微粒和抗人IgM二抗标记的化学发光标记物。这种抗心磷脂抗体IgM化学发光免疫检测试剂盒能够以全自动化学发光免疫分析仪为检测工具，完成抗心磷脂抗体IgM的检测这种抗心磷脂抗体IgM化学发光免疫检测试剂盒，经过实验，其检测灵敏度达到0.2MPLU/mL，相对于传统的抗心磷脂抗体IgM的检测方法灵敏度至少提高了10倍，这种抗心磷脂抗体IgM化学发光免疫检测试剂盒的检测精度较高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及体外检测领域，尤其涉及一种抗心磷脂抗体IgM化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法。
技术介绍
心磷脂是pangborn1941年从牛的心肌中分离出来的一种具有抗原性的磷脂，并加以命名，其在哺乳动物肌中含量最高，每个心磷脂分子包含4个不饱和的脂肪酸，极易氧化。抗心磷脂抗体（anticardiolipin，ACL）属于是一种以血小板和内皮细胞膜上带负电荷的心磷脂作为靶抗原的自身抗体。心磷脂抗体见于50%的系统性红斑狼疮患者和约4-50%的其他系统性自身免疫异常患者（类风湿性关节炎、硬皮病、干燥综合征等）。心磷脂抗体阳性的患者有发展为静脉和动脉血栓的危险（高浓度心磷脂抗体的患者发病风险约为80%）。心磷脂抗体也常见于自然性流产、死胎和早产患者。心磷脂抗体可有IgA、IgG或IgM亚型，高浓度的抗性磷脂IgM型抗体和溶血性贫血高度有关。临床检测抗心磷脂抗体IgM的主要方法为酶联免疫吸附法，但该方法存在着下述的不足之处：（1）使用12×8型、6×8型、8×12型或整板型96孔专用微孔板作为抗原包被用具和反应容器，在使用时只能分成12批次、6批次、8批次或整板一次使用，无法进行独立的、单人份的检测；（2）定量测定所用的试剂种类较多，每一种检测试剂都要用试剂瓶来盛装，并且每使用一种试剂时都需要更换吸液嘴来分别加注到微孔板的微孔中，不但试剂瓶种类多，加注试剂的操作也极为繁琐；（3）缺少对检测信息的相应标注，只能通过查看试剂盒外包装盒的标识才能了解或知悉检测试剂的生产批号及有效期信息，而且所知悉的信息在检测过程中不受控，具有很大的随意性；（4）检测试剂在检测过程中处于开放的空间，容易引起各种试剂之间的交叉污染而影响检测结果的准确性；（5）检测过程多采用手工操作，试剂或样本的加量不很精确，操作过程极为繁琐和复杂，容易发生操作差错，检测结果的准确度和精密度较差；（6）在检测项目成套试剂的数量配置及使用上均为项目数×48/96人份，如果需要检测10个项目，则试剂的配置及使用数须为10×48/96人份，如果只有一份样本需要检测10个不同的项目，也需要配置10×48/96人份的试剂，存在着不够经济合理的缺点。
技术实现思路

技术实现思路
基于此，有必要提供一种检测灵敏度较高的抗心磷脂抗体IgM化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法。一种抗心磷脂抗体IgM化学发光免疫检测试剂盒，包括：抗心磷脂抗体IgM单克隆抗体包被的羧基化的磁微粒和抗人IgM二抗标记的化学发光标记物。在一个实施例中，所述抗心磷脂抗体IgM单克隆抗体包被的羧基化的磁微粒中，所述抗心磷脂抗体IgM单克隆抗体与所述羧基化的磁微粒的比例为1：25~35。在一个实施例中，所述抗人IgM二抗标记的化学发光标记物中，所述抗心磷脂抗体IgM单克隆抗体与所述化学发光标记物的比例为50：1~10。在一个实施例中，所述羧基化的磁微粒的粒径为0.05μm~1μm。在一个实施例中，所述化学发光标记物为鲁米诺、异鲁米诺、三联吡啶钌或吖啶酯。在一个实施例中，还包括化学发光底物液，所述化学发光底物液包括A液和B液。在一个实施例中，所述A液为H2O2溶液，所述B液为NaOH溶液。在一个实施例中，还包括抗心磷脂抗体IgM定标品。在一个实施例中，所述抗心磷脂抗体IgM定标品为浓度分别为0MPLU/mL、10MPLU/mL、20MPLU/mL、50MPLU/mL、100MPLU/mL和200MPLU/mL的抗心磷脂抗体IgM的溶液。一种上述的抗心磷脂抗体IgM化学发光免疫检测试剂盒的制备方法，包括如下步骤：取羧基化的磁微粒的悬浮液，磁分离去上清后用MES缓冲液重悬，接着加入EDC水溶液，活化羧基化的磁微粒的表面羧基，接着加入抗心磷脂抗体IgM单克隆抗体，室温下混悬2h~10h，磁分离去除上清后用Tris缓冲液重悬，得到抗心磷脂抗体IgM单克隆抗体包被的羧基化的磁微粒；以及取抗心磷脂抗体IgM单克隆抗体，加入碳酸盐缓冲液后混匀，然后加入化学发光标记物后混匀，室温下避光反应1h~2h后除杂，得到抗人IgM二抗标记的化学发光标记物。这种抗心磷脂抗体IgM化学发光免疫检测试剂盒能够以全自动化学发光免疫分析仪为检测工具，完成抗心磷脂抗体IgM的检测这种抗心磷脂抗体IgM化学发光免疫检测试剂盒，经过实验，其检测灵敏度达到0.2MPLU/mL，相对于传统的抗心磷脂抗体IgM的检测方法灵敏度至少提高了10倍，这种抗心磷脂抗体IgM化学发光免疫检测试剂盒的检测精度较高。附图说明图1为一实施方式的抗心磷脂抗体IgM化学发光免疫检测试剂盒的制备方法的流程图；图2为实施例3得到的抗心磷脂抗体IgM标准曲线图。具体实施方式为使本专利技术的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合附图和具体实施例对本专利技术的具体实施方式做详细的说明。在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本专利技术。但是本专利技术能够以很多不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本专利技术内涵的情况下做类似改进，因此本专利技术不受下面公开的具体实施的限制。一实施方式的抗心磷脂抗体IgM化学发光免疫检测试剂盒，包括：抗心磷脂抗体IgM单克隆抗体包被的羧基化的磁微粒和抗人IgM二抗标记的化学发光标记物。优选的，抗心磷脂抗体IgM单克隆抗体包被的羧基化的磁微粒中，抗心磷脂抗体IgM单克隆抗体与羧基化的磁微粒的比例为1：25~35。优选的，抗人IgM二抗标记的化学发光标记物中，抗心磷脂抗体IgM单克隆抗体与化学发光标记物的比例为50：1~10。优选的，羧基化的磁微粒的粒径为0.05μm~1μm。化学发光标记物可以为鲁米诺、异鲁米诺、三联吡啶钌或吖啶酯。其中，化学发光标记物优选为吖啶酯。在其他的实施例中，上述抗心磷脂抗体IgM化学发光免疫检测试剂盒还包括化学发光底物液。化学发光底物液包括A液和B液。A液可以为H2O2溶液，B液可以为NaOH溶液。本实施例中，A液为浓度为0.1mol/L的H2O2溶液，B液为浓度为0.25mol/L的NaOH溶液。在其他的实施例中，上述抗心磷脂抗体IgM化学发光免疫检测试剂盒还包括抗心磷脂抗体IgM定标品。抗心磷脂抗体IgM定标品为浓度分别为0MPLU/mL、10MPLU/mL、20MPLU/mL、50MPLU/mL、100MPLU/mL和200MPLU/mL的抗心磷脂抗体IgM的溶液。具体的，抗心磷脂抗体IgM定标品可以采用标准品缓冲液将抗心磷脂抗体IgM配制成浓度分别为0MPLU/mL、10MPLU/mL、20MPLU/mL、50MPLU/mL、100MPLU/mL和200MPLU/mL的抗心磷脂抗体IgM的溶液。这种抗心磷脂抗体IgM化学发光免疫检测试剂盒用于抗心磷脂抗体IgM检测时，利用全自动化学发光免疫分析仪对抗心磷脂抗体IgM定标品进行检测，绘制标准曲线，内置于电脑软件；接着测试实际样本，根据样本发光值计算样本浓度；最后对抗心磷脂抗体IgM全自动化学发光免疫分析系统进行性能（灵敏度、线性、精密度、干扰性）的评价。这种抗心磷脂抗体IgM化学发光免疫检测试剂盒能够以全自动化学发光免疫分析仪为检测工具，完成抗心磷脂抗体IgM的检测这种抗心磷脂抗体IgM化学发光免疫检测试本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种抗心磷脂抗体IgM化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，包括：抗心磷脂抗体IgM单克隆抗体包被的羧基化的磁微粒和抗人IgM二抗标记的化学发光标记物。

【技术特征摘要】
1.一种抗心磷脂抗体IgM化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，包括：抗心磷脂抗体IgM单克隆抗体包被的羧基化的磁微粒和抗人IgM二抗标记的化学发光标记物。2.根据权利要求1所述的抗心磷脂抗体IgM化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，所述抗心磷脂抗体IgM单克隆抗体包被的羧基化的磁微粒中，所述抗心磷脂抗体IgM单克隆抗体与所述羧基化的磁微粒的比例为1：25~35。3.根据权利要求1所述的抗心磷脂抗体IgM化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，所述抗人IgM二抗标记的化学发光标记物中，所述抗心磷脂抗体IgM单克隆抗体与所述化学发光标记物的比例为50：1~10。4.根据权利要求1所述的抗心磷脂抗体IgM化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，所述羧基化的磁微粒的粒径为0.05μm~1μm。5.根据权利要求1所述的抗心磷脂抗体IgM化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，所述化学发光标记物为鲁米诺、异鲁米诺、三联吡啶钌或吖啶酯。6.根据权利要求1所述的抗心磷脂抗体IgM化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，还包括化学发光底物液，所述化学发光底物液包括A液和B液。7.根据权利要求6所述的抗心磷脂抗体IgM化学发光免...

【专利技术属性】
技术研发人员：唐曙明，陈海霞，邹定标，夏福臻，钱纯亘，陈曼，
申请(专利权)人：深圳市亚辉龙生物科技股份有限公司，深圳市人民医院，
类型：发明
国别省市：广东;44