本发明专利技术公开了一种土生戈登氏菌的全细胞植物油提取物的制备方法和应用，步骤是：A、菌种培养：斜面种子培养基察氏培养基，将冻干种子接种于茄子瓶斜面；B、种子罐培养：将接种瓶种子转入种子罐，培养；C、发酵罐培养：将种子罐种子液打入发酵罐，培养，菌体单个球杆状，菌数108－1010个/ml，停止发酵；D、发酵液煮沸灭活后浓缩，烘干收集菌体，得到土生戈登氏菌全细胞菌粉；E、植物油浸提：将土生戈登氏菌全细胞菌粉用植物油浸提，浸提完后离心收集上清液获得全细胞植物油提取物。易于大规模生产，提取物具备促进伤口愈合、对疱疹性口炎具有显著疗效的作用。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物医学工程领域，具体涉及一种土生戈登氏菌sq-5的全细胞植物油提取物的制备方法，同时还涉及一种土生戈登氏菌sq-5的全细胞植物油提取物的用途。
技术介绍
目前在国内的促进伤口愈合的药物有限，且主要以抗炎、止血、保护创面为主,但这些作用只对创伤早期有效，而对真正体现伤口愈合速度的各种组织细胞的增殖作用较少，且大多都有副作用。开发一种多功能的安全、环保、副作用小且疗效显著的含有天然活性成分的新型药物具有深远的意义。疱疹性口炎是由人类单纯疱疹病毒导致的急性炎症性皮肤黏膜病，由1型单纯疱疹病毒引起，感染该病毒的患者出现口腔黏膜、口腔周围、颜面部皮肤和咽喉部疱疹，还可能感染鼻翼、生殖器等部位，部分患者出现眼部疱疹性角膜炎。该病临床症状带来生活上不便，产生痛苦，且无特效方法治疗，容易复发，严重者可留色素和轻度疤痕，影响美观。专利技术者从事分枝杆菌研究近30年，经研究发现：分枝杆菌，戈登氏菌的细胞壁有着特殊的结构，那就是分枝杆菌多糖(MSP)。它具有明显的免疫调节功能，尤其调节细胞的免疫应答。本专利技术即土生戈登氏菌的全细胞植物油提取物中其氨基酸含量丰富、类胡萝卜素特别是β-胡萝卜素含量高，还含有甲基萘醌、黄酮、多糖和丰富的维生素等天然生物活性物质，赋予了该提取物促进伤口愈合和抗氧化和免疫调节等多种功能。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供了一种土生戈登氏菌sq-5的全细胞植物油提取物的制备方法，方法简单，易行，易于大规模生产，该细胞提取物具备促进伤口愈合、对疱疹性口炎具有显著疗效的作用。所述的土生戈登氏菌sq-5(Gordonaterraesq-5)保存于武汉大学中国典型培养物保藏中心，编号为CCTCCNO:M2012390。该菌为专利菌种，专利号为:ZL201310016059.5。本专利技术的最后一个目的在于提供了一种土生戈登氏菌sq-5的全细胞植物油提取物在制备治疗或预防(促进)伤口愈合、烧伤、烫伤和/或治疗疱疹性口炎等药物中的应用，所述的应用包括但不限于用于制备促进伤口愈合和/或治疗疱疹性口炎等的药物。该提取物其氨基酸含量丰富、类胡萝卜素特别是β-胡萝卜素含量高，还含有甲基萘醌、黄酮、多糖和丰富的维生素等天然生物活性物质，能有效促进伤口愈合,对疱疹性口炎具有明显的治疗效果。本专利技术绿色环保,基本没有副作用。为了达到上述目的，本专利技术采取以下技术措施：一种土生戈登氏菌sq-5的全细胞植物油提取物，包括以土生戈登氏菌sq-5为原料，利用本领域的常规方式，用植物油对土生戈登氏菌sq-5进行浸提获得的上清。一种土生戈登氏菌sq-5的全细胞植物油提取物的制备方法，其步骤是：A、菌种培养：斜面种子培养基察氏培养基，将冻干种子sq-5(专利号为:ZL201310016059.5)接种于茄子瓶斜面，28－32℃培养3天。检查无杂菌，生长健壮，均匀，用无菌水转入接种瓶。B、种子罐培养：将上述A中接种瓶种子转入种子罐，培养温度28－32℃，通气量1:0.6－0.8，自动流加泡敌，培养30－35h，取样镜检，合格后备用。C、发酵罐培养：以5－10％的接种量将上述B中培养好的种子罐种子液打入发酵罐，通气量1:0.8，自动流加泡敌，28－32℃培养48－52h，菌体单个球杆状，菌数108－1010个/ml，停止发酵。D、将上述C中培养好的发酵液100℃煮沸灭活后浓缩，浓缩物108－112℃烘干收集菌体，粉碎过筛(120目)，得到土生戈登氏菌全细胞菌粉。E、植物油浸提：将上述D中收集的土生戈登氏菌全细胞菌粉1－3份，植物油(大豆油或芝麻油)98－102份于80℃浸提4－5h，浸提完后于6500r/min离心10min收集上清液获得土生戈登氏菌sq-5的全细胞植物油提取物。所述的种子罐和发酵罐发酵用培养基配方：一种土生戈登氏菌sq-5的全细胞植物油提取物在制备治疗或预防(促进)伤口愈合、烧伤、烫伤和/或治疗疱疹性口炎等药物中的应用，其步骤是：A、将上述土生戈登氏菌sq-5的全细胞植物油提取物无菌罐装制成油剂用于治疗疱疹性口炎的药物。B、将上述土生戈登氏菌sq-5的全细胞植物油提取物无菌罐装制成油剂用于治疗创伤(包括手术伤口、烧伤和烫伤等)的药物。C、将上述土生戈登氏菌sq-5的全细胞植物油提取物作为药品原料用于制成包括但不限于治疗创伤和疱疹性口炎的药物。本专利技术与现有技术相比，具有以下优点和效果：分枝杆菌，戈登氏菌的细胞壁有着特殊的结构，那就是分枝杆菌多糖(MSP)，本专利技术涉及的土生戈登氏菌的脂多糖含有50个碳原子的不饱和脂肪酸使其生理活性更强，其包含有阿拉伯糖和半乳糖，二者以3:1形式连接，而阿拉伯糖的呋喃糖残基则是免疫决定簇，因而赋予了这类菌特殊的免疫调节功能和非特异性抗感染功能。有资料证明氨基酸在伤口愈合中起着重要的作用；维生素A在伤口愈合的炎症期有积极的作用,促进或有助于胶原的形成、血管再生和上皮的形成,增强伤口和吻合口愈合的张力；黄酮类物质有抑制炎性生物酶的渗出，可以增进伤口愈合和止痛，由于具有强抗组织胺性，可用于各类敏感症。本专利技术为土生戈登氏菌全细胞植物油提取物，其提取物中含有丰富的脂溶性复合氨基酸和以β-胡萝卜素为主的类胡萝卜素，β-胡萝卜素为维生素A的前体物质，且提取物还含有黄酮、甲基萘醌、多糖、维生素等多种天然抗氧化因子赋予该提取物很好的皮肤营养、生肌、免疫调节和抗氧化等功能，而且脂溶性物质具有其自身的优点：1、脂溶性物质更容易透过皮肤被皮肤吸收而发挥生理作用。2、油脂不容易污染无需添加防腐剂更安全，无刺激性。3、油脂本身可以隔离空气可减少伤口及炎症的进一步感染。土生戈登氏菌全细胞植物油提取物中营养全面，多种生理活性因子有机和谐地在一个生命体系之中通过协同作用有利于机体对营养物的吸收和生理效应的发挥，而培养物中维生素都以微量或超微量形式存在更加有效的发挥其生理活性而无副作用。土生戈登氏菌全细胞培养物经急性毒性试验为无毒级类物质，三项致突变试验(小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验，小鼠精子畸形试验，Ames试验)结果均为阴性。本专利技术的原料来源广泛，工艺简单易操作适合大规模生产，本专利技术产品原料安全性高且环保几乎无污染。具体实施方式本专利技术的实施例中的实验方法或条件，如未特别说明均为常规方案。实施例1：一种土生戈登氏菌sq-5的全细胞植物油提取物的制备方法，其步骤是：A、菌种培养：斜面种子培养基察氏培养基，将冻干种子sq-5(专利号为:ZL201310016059.5)接种于茄子瓶斜面，28或29或30或31或32℃培养3天。检查无杂菌，生长健壮，均匀，用无菌水转入接种瓶。B、种子罐培养：将上述A中接种瓶种子转入种子罐，培养温度28或29或30或31或32℃，通气量1:0.6或0.7或0.8，自动流加泡敌，培养30或32或34或35h，取样镜检，合格后备用。C、发酵罐培养：以5％或7％或9％或10％的接种量将上述B中培养好的种子罐种子液打入发酵罐，通气量1:0.8，自动流加泡敌，28或29或30或31或32℃培养48或50或52h，菌体单个球杆状，菌数108或109或1010个/ml，停止发酵。D、将上述C中培养好的发酵液100℃煮沸灭活后浓缩，浓缩物108或109或110或111或112℃烘干收集菌体，粉碎过筛本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种土生戈登氏菌sq‑5的全细胞植物油提取物的制备方法，其步骤是：A、菌种培养：斜面种子培养基察氏培养基，将冻干种子土生戈登氏菌sq‑5接种于茄子瓶斜面，28－32℃培养3天，检查无杂菌，用无菌水转入接种瓶；B、种子罐培养：将步骤(A)中的接种瓶种子转入种子罐，培养温度28－32℃，通气量1:0.6－0.8，自动流加泡敌，培养30－35h，取样镜检，备用；C、发酵罐培养：以5－10％的接种量将种子罐种子液打入发酵罐，通气量1:0.8，自动流加泡敌，28－32℃培养48－52h，菌体单个球杆状，菌数108－1010个/ml，停止发酵；D、土生戈登氏菌全细胞菌粉制备：将步骤(C)中培养好的发酵液100℃煮沸灭活后浓缩，浓缩物108℃－112℃烘干收集菌体，粉碎过筛120目，得到土生戈登氏菌全细胞菌粉；E、植物油浸提：将步骤(D)中收集的土生戈登氏菌全细胞菌粉1－3份，植物油98－102份于80℃浸提4－5h，浸提完后于6500r/min离心10min收集上清液获得土生戈登氏菌sq‑5的全细胞植物油提取物；所述的植物油为大豆油或芝麻油。
【技术特征摘要】
1.一种土生戈登氏菌sq-5的全细胞植物油提取物的制备方法，其步骤是：A、菌种培养：斜面种子培养基察氏培养基，将冻干种子土生戈登氏菌sq-5接种于茄子瓶斜面，28－32℃培养3天，检查无杂菌，用无菌水转入接种瓶；B、种子罐培养：将步骤(A)中的接种瓶种子转入种子罐，培养温度28－32℃，通气量1:0.6－0.8，自动流加泡敌，培养30－35h，取样镜检，备用；C、发酵罐培养：以5－10％的接种量将种子罐种子液打入发酵罐，通气量1:0.8，自动流加泡敌，28－32℃培养48－52h，菌体单个球杆状，菌数108－1010个/ml，停止发酵；D、土生戈登氏菌全细胞菌粉制备：将步骤(C)中培养好的发酵液100℃煮沸灭活后浓缩，浓缩物108℃－112...
【专利技术属性】
技术研发人员：张素琴，张世敏，刘艳丽，李迎春，
申请(专利权)人：武汉启曜环境科技有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北;42
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