一种亚临界水同步萃取灰树花多糖和蛋白的方法技术

一种亚临界水同步萃取灰树花多糖和蛋白的方法，步骤如下：取灰树花子实体干燥，再粉碎得灰树花粉末；取灰树花粉末，置于密闭萃取罐中，抽真空，注入去离子水，萃取后进行过滤，得初级滤渣与初级滤液；将初级滤渣置于密闭萃取罐中，抽真空，注入去离子水，萃取后进行过滤，得二级滤渣与二级滤液；将二级滤渣，置于密闭萃取罐中，抽真空，注入去离子水，萃取后进行过滤，得三级滤渣与三级滤液；将初级滤液、二级滤液以及三级滤液合并离心；离心后提取上清液，浓缩上清液得到灰树花多糖和蛋白质浓缩液；冷冻干燥，得灰树花多糖和蛋白质。解决现有技术中灰树花中多糖及蛋白的提取方法提取工艺步骤复杂，生产周期长成本很高的问题，工艺简单成本低廉。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及亚临界萃取应用，特别涉及一种亚临界水同步萃取灰树花多糖和蛋白的方法。
技术介绍
灰树花是一种极具开发价值的珍贵食、药用真菌,属担子菌亚门,层菌纲,无隔担子菌亚纲,非褶菌目,多孔菌科,又名贝叶多孔菌、千佛菌、栗子蘑、云蕈等,日本称之舞茸。灰树花中更为人们所瞩目的是它的生理活性物质——多糖。多糖是从灰树花子实体中分离到的一种真菌多糖,国内外深入开展了作为生物反应调节剂的真菌多糖的研究,灰树花多糖显著的疗效也逐渐被人们所认识。经过大量的化学和药理分析发现,灰树花多糖具有明显的抗肿瘤,抗HIV病毒,改善免疫系统功能,调节血糖、血脂及胆固醇水平,降血压等作用,对防止癌细胞的生成和转移、艾滋病、高血压、肥胖症、糖尿病以及免疫系统功能的紊乱都有一定的疗效,且无任何毒副作用。灰树花蛋白是灰树花生物结构的重要组成部分，也是组织更新和修复的主要原料，并具有多种生理功能。目前灰树花蛋白质的研究一直是世界学者研究热点。传统的灰树花多糖与蛋白的提取方法主要是采用热水浸提法、酸浸提法、碱浸提法等。酸或碱浸提法虽能提高提取率，但对设备要求高且极易破坏多糖的结构，还存在环境污染问题。传统的热水浸提法时间长、耗能高，活性成分提取得率低。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种亚临界水同步萃取灰树花多糖和蛋白的方法，实现同时萃取多糖和蛋白，解决现有技术中灰树花中多糖及蛋白的提取方法提取工艺步骤复杂，生产周期长成本很高的问题，工艺简单成本低廉。为解决以上问题本专利技术所采用的方案：一种亚临界水同步萃取灰树花多糖和蛋白的方法，其萃取方法如下：（1）选取新鲜的、肉质饱满、无霉变、无虫蚀的灰树花子实体，进行干燥，干燥至水分含量为15～20％（质量百分比），再使用粉碎机粉碎，过80目筛，得灰树花粉末；（2）取步骤1所得灰树花粉末，置于密闭萃取罐中，抽真空，注入pH7.0-9.0的去离子水，萃取条件：料溶比1:10~15（质量比计），温度100——200℃，压力为10-15Mpa，提取时间0.2~1h；萃取结束后，静置自然冷却至常温，进行过滤分离，得初级滤渣与初级滤液；（3）将步骤2所得初级滤渣，置于密闭萃取罐中，抽真空，注入pH7.0-8.0的去离子水，萃取条件：料溶比1:5~10（质量比计），温度150——250℃，压力为10-15Mpa，提取时间0.5~1.5h；萃取结束后，静置自然冷却至常温，进行过滤分离，得二级滤渣与二级滤液；（4）将步骤3所得二级滤渣，置于密闭萃取罐中，抽真空，注入pH6.0-7.0的去离子水，萃取条件：料溶比1:3~7（质量比计），温度170——230℃，压力为13-17Mpa，提取时间0.8~2h；萃取结束后，静置自然冷却至常温，进行过滤分离，得三级滤渣与三级滤液；（5）将步骤2、3、4所得的初级滤液、二级滤液以及三级滤液收集合并，得多糖和蛋白的萃取液，将萃取液以转速1500-2500r/min离心5-10min；离心完成后的提取上清液，上清液用3-5KD截留分子量的超滤膜浓缩至原体积的1/3——1/30,得到灰树花多糖和蛋白质浓缩液；（6）将步骤5所得的灰树花多糖和蛋白质浓缩液进行冷冻干燥，得到灰树花多糖和蛋白质。本方案的有益效果：采用三步法亚临界水萃取工艺，步骤简单，工艺简单、绿色无污染，容易实现工业化不仅提高了灰树花多糖与蛋白质的提取率，与现有其他提取方法相比，本专利技术的设备成本和运行成本都相对较低，灰树花多糖与蛋白质的提取效率和生物活性都有显著提高。亚临界水低黏度和表面张力以及高扩散能力等能使多糖和蛋白最大限度的溶出，显著提高多糖蛋白的溶出率，提高原料的生物利用率。具体实施方式以下通过具体实施例对本专利技术的具体实施方式作进一步详细的说明。本专利技术采用的比例均为质量比例。实施例1：一种亚临界水同步萃取灰树花多糖和蛋白的方法，其萃取方法如下：（1）选取新鲜的、肉质饱满、无霉变、无虫蚀的灰树花子实体，进行干燥，干燥至水分含量为15％（质量百分比），再使用粉碎机粉碎，过80目筛，得灰树花粉末；（2）取步骤1所得灰树花粉末，置于密闭萃取罐中，抽真空，注入pH9.0的去离子水，萃取条件：料溶比1:10（质量比计），温度100℃，压力为10Mpa，提取时间1h；萃取结束后，静置自然冷却至常温，进行过滤分离，得初级滤渣与初级滤液；（3）将步骤2所得初级滤渣，置于密闭萃取罐中，抽真空，注入pH8.0的去离子水，萃取条件：料溶比1:5（质量比计），温度150℃，压力为10Mpa，提取时间1.5h；萃取结束后，静置自然冷却至常温，进行过滤分离，得二级滤渣与二级滤液；（4）将步骤3所得二级滤渣，置于密闭萃取罐中，抽真空，注入pH7.0的去离子水，萃取条件：料溶比1:3（质量比计），温度170℃，压力为13Mpa，提取时间2h；萃取结束后，静置自然冷却至常温，进行过滤分离，得三级滤渣与三级滤液；（5）将步骤2、3、4所得的初级滤液、二级滤液以及三级滤液收集合并，得多糖和蛋白的萃取液，将萃取液以转速1500r/min离心5min；离心完成后的提取上清液，上清液用3KD截留分子量的超滤膜浓缩至原体积的1/3,得到灰树花多糖和蛋白质浓缩液；（6）将步骤5所得的灰树花多糖和蛋白质浓缩液进行冷冻干燥，得到灰树花多糖和蛋白质。本实施例中所得多糖蛋白总得率为44.47%，其中多糖、蛋白得率分别为22.95%，21.52%。实施例2：一种亚临界水同步萃取灰树花多糖和蛋白的方法，其萃取方法如下：（1）选取新鲜的、肉质饱满、无霉变、无虫蚀的灰树花子实体，进行干燥，干燥至水分含量为20％（质量百分比），再使用粉碎机粉碎，过80目筛，得灰树花粉末；（2）取步骤1所得灰树花粉末，置于密闭萃取罐中，抽真空，注入pH9.0的去离子水，萃取条件：料溶比1:15（质量比计），温度200℃，压力为15Mpa，提取时间0.2h；萃取结束后，静置自然冷却至常温，进行过滤分离，得初级滤渣与初级滤液；（3）将步骤2所得初级滤渣，置于密闭萃取罐中，抽真空，注入pH8.0的去离子水，萃取条件：料溶比1:10（质量比计），温度250℃，压力为15Mpa，提取时间0.5h；萃取结束后，静置自然冷却至常温，进行过滤分离，得二级滤渣与二级滤液；（4）将步骤3所得二级滤渣，置于密闭萃取罐中，抽真空，注入pH7.0的去离子水，萃取条件：料溶比1:7（质量比计），温度230℃，压力为17Mpa，提取时间0.8h；萃取结束后，静置自然冷却至常温，进行过滤分离，得三级滤渣与三级滤液；（5）将步骤2、3、4所得的初级滤液、二级滤液以及三级滤液收集合并，得多糖和蛋白的萃取液，将萃取液以转速2500r/min离心10min；离心完成后的提取上清液，上清液用5KD截留分子量的超滤膜浓缩至原体积的1/30,得到灰树花多糖和蛋白质浓缩液；（6）将步骤5所得的灰树花多糖和蛋白质浓缩液进行冷冻干燥，得到灰树花多糖和蛋白质。本实施例中所得多糖蛋白总得率为59.36%，其中多糖、蛋白得率分别为33.68%，25.68%。实施例3：一种亚临界水同步萃取灰树花多糖和蛋白的方法，其萃取方法如下：（1）选取新鲜的、肉质饱满、无霉变、无虫蚀的灰树花子实体，进行干燥，干燥至水分含量为17％（质量百分比），再本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种亚临界水同步萃取灰树花多糖和蛋白的方法，其特征在于，其萃取方法如下：选取新鲜的、肉质饱满、无霉变、无虫蚀的灰树花子实体，进行干燥，干燥至水分含量为15～20％，再使用粉碎机粉碎，过80目筛，得灰树花粉末；取步骤1所得灰树花粉末，置于密闭萃取罐中，抽真空，注入pH7.0‑9.0的去离子水，萃取条件：料溶比1:10~15，温度100——200℃，压力为10‑15Mpa，提取时间0.2~1h；萃取结束后，静置自然冷却至常温，进行过滤分离，得初级滤渣与初级滤液；将步骤2所得初级滤渣，置于密闭萃取罐中，抽真空，注入pH7.0‑8.0的去离子水，萃取条件：料溶比1:5~10，温度150——250℃，压力为10‑15Mpa，提取时间0.5~1.5h；萃取结束后，静置自然冷却至常温，进行过滤分离，得二级滤渣与二级滤液；将步骤3所得二级滤渣，置于密闭萃取罐中，抽真空，注入pH6.0‑7.0的去离子水，萃取条件：料溶比1:3~7，温度170——230℃，压力为13‑17Mpa，提取时间0.8~2h；萃取结束后，静置自然冷却至常温，进行过滤分离，得三级滤渣与三级滤液；将步骤2、3、4所得的初级滤液、二级滤液以及三级滤液收集合并，得多糖和蛋白的萃取液，将萃取液以转速1500‑2500r/min离心5‑10min；离心完成后的提取上清液，上清液用3‑5KD截留分子量的超滤膜浓缩至原体积的1/3——1/30,得到灰树花多糖和蛋白质浓缩液；将步骤5所得的灰树花多糖和蛋白质浓缩液进行冷冻干燥，得到灰树花多糖和蛋白质。...

【技术特征摘要】
1.一种亚临界水同步萃取灰树花多糖和蛋白的方法，其特征在于，其萃取方法如下：选取新鲜的、肉质饱满、无霉变、无虫蚀的灰树花子实体，进行干燥，干燥至水分含量为15～20％，再使用粉碎机粉碎，过80目筛，得灰树花粉末；取步骤1所得灰树花粉末，置于密闭萃取罐中，抽真空，注入pH7.0-9.0的去离子水，萃取条件：料溶比1:10~15，温度100——200℃，压力为10-15Mpa，提取时间0.2~1h；萃取结束后，静置自然冷却至常温，进行过滤分离，得初级滤渣与初级滤液；将步骤2所得初级滤渣，置于密闭萃取罐中，抽真空，注入pH7.0-8.0的去离子水，萃取条件：料溶比1:5~10，温度150——250℃，压力为10-15Mpa，提取时间0.5~1.5h；萃取结束后，静置自然冷却至常温，进行过滤分离，得二级滤渣与二级滤...

【专利技术属性】
技术研发人员：邵兴军，毛日文，朱惠芬，仲延龙，
申请(专利权)人：江苏江大源生态生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32