用于紫杉醇的药代动力学引导给药的监测血浆中的紫杉醇浓度的方法、装置和试剂制造方法及图纸

用于测定治疗剂的方法、装置和组合物。在一个方面，提供了用于测定紫杉醇以提供紫杉醇的治疗药物监测引导疗法的方法、装置和组合物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】相关申请的交叉引用本申请要求2014年4月4日提交的美国专利申请No.61/975,386和2014年9月17日提交的美国专利申请No.62/051,757的权益，每个申请明确地通过引用整体并入本文。关于序列表的声明与本申请相关联的序列表以文本格式代替纸质拷贝提供，并在此通过引用并入说明书中。包含序列表的文本文件的名称为53634_SEQ.txt。文本文件为11KB；创建于2015年4月6日；并通过EFS-Web与本说明书的提交一起提交。专利技术背景最初从太平洋紫杉树的树皮中分离的紫杉醇已被建立为用于一系列癌症类型(包括肺癌、卵巢癌和乳腺癌)的最有效的化疗药物之一。紫杉醇的主要限制是其低溶解度和需要配制在有毒有机溶剂(通常为聚氧乙烯化蓖麻油和脱水乙醇混合物(称为))中。为了防止溶剂毒性，已将紫杉醇与多种赋形剂一起配制以及使用可提高疏水性药物诸如紫杉醇的溶解度的纳米颗粒递送系统。(紫杉醇白蛋白结合的纳米颗粒制剂)在2005年被FDA批准并且是目前用于化疗的紫杉醇的最佳制剂之一。其它系统已被研究用于递送紫杉醇或正在开发中，例如使用聚合物纳米颗粒、基于脂质的纳米颗粒制剂、聚合物缀合物、无机纳米颗粒、碳纳米管、纳米晶体或环糊精纳米颗粒(参见例如PingMa等，2013,JNanomed.Nanotechnology:4:2)。尽管是广泛使用的化疗剂并且实际适用于所有癌症类型，但是对的反应可低至20％。在一些患者中发现的对紫杉醇的相对不敏感性可能是低反应率的促成因素。然而，这种不敏感性可能不是低反应率的主要原因。当以各种批准的剂量(260mg/m2用于转移性乳腺癌，125mg/m2用于胰腺癌，和100mg/m2用于肺癌)给药时，在临床患者样品中监测的紫杉醇的血液浓度存在高达10倍的变化(NymanDW等，2005,JClin.Oncol.23,7785-93)。这种变化表明绝大多数患者可能被以太大浓度的紫杉醇施用而不正确地给药并必须取消治疗，或者施用的剂量太低从而不能从治疗提供益处。即使患者对紫杉醇敏感，药物水平不足也会使其无反应从而治疗无效。低剂量组是最脆弱的患者群体，因为难以确定他们是对紫杉醇不敏感还是没有施用足够的紫杉醇。完全药代动力学(PK)分析是在这种情况下的唯一方法来基于个体药代动力学变化提供适当药物剂量的指导。目前没有可用的方法来进行紫杉醇的完全PK定量而无需让患者参加全面的临床测试(这需要住院)。这种PK测试的典型持续时间可以是48小时的时间过程并且包括重复抽血。目前，需要使用复杂的实验室设备来分析紫杉醇的血液浓度，包括液相色谱/质谱(LC/MS)方法。这些方法非常昂贵，目前超过120美元/样本，设备成本在每台仪器超过150K美元至200K美元的范围内。还已经证明，需要在48至72小时的时间段内收集最少四个数据点以充分表征每个特定患者的PK参数。让患者住院进行PK测试可以很容易地将每个患者的成本提高至大约10,000美元。用于证明PK引导给药的临床疗效的充分有力的III期临床试验将需要500名患者(250名患者用于BSA给药，250名患者用于PK引导给药)。单独的生物分析成本将为150万美元(500个点×6个周期的化疗×4个用于PK分析的血液采样×120美元/样品分析)。试验的其它组成部分对每名患者的费用大约为10万美元，总额为5000万美元。这代表了获得指导剂量调整以实现最佳的肿瘤反应和装置的监管批准所必需的有意义的临床数据的重要障碍。因此，分析和仪器的高成本对于针对具有相对窄的治疗范围的许多药物建立治疗药物监测(TDM)具有令人望而止步的后果。因此，仍然需要一种简单、有效和廉价的方法来监测患者中紫杉醇的药代动力学，从而通过为给药策略的任何调整提供信息来适当地个性化对个体患者的治疗。本专利技术寻求满足这种需要并提供另外的相关优势。专利技术概述本专利技术提供了用于测定治疗剂的方法、装置和组合物。在一个方面，提供了用于测定紫杉醇的方法、装置和组合物。在一个方面，本专利技术提供了用于测定液体样品中的紫杉醇的方法。在一个实施方案中，所述方法包括：(a)将包含紫杉醇的液体样品施加到侧流测定装置，所述装置包含(i)用于接收液体样品的样品接收区；(ii)检测试剂区，其与所述样品接收区液体连通并且按流动方向位于所述样品接收区的下游，其中所述检测试剂区包含沉积在其上的检测试剂，其中所述检测试剂是用可检测的报告基团标记的结合紫杉醇的紫杉醇抗体或其片段或衍生物，并且其中所述紫杉醇抗体或其片段或衍生物具有约104至约107的Kon和约10-3至约10-7的Koff；和(iii)捕获区，其与所述检测试剂区液体连通，并按流动方向位于所述检测试剂区的下游，其中所述捕获区包含固定在其上的第一和第二捕获试剂，其中所述第一捕获试剂是能够结合所述检测试剂的紫杉醇材料(测试线)，其中所述第二捕获试剂是能够结合所述检测试剂的抗体(对照线)，其中所述第一捕获试剂按流动方向定位在所述捕获区的上游端的下游的第一距离处，其中所述第二捕获试剂按流动方向定位在所述捕获区的上游端的下游的第二距离处，其中所述第二距离大于所述第一距离，以及其中当Kon大于约2.0×105且Koff小于约1.0×10-3时，第一距离与第二距离的比率为约0.0至约0.4，以及其中当Kon大于约2.0×104且Koff小于约2.0×10-4时，第一距离与第二距离的比率为约0.2至约1.0；以及(b)使样品从样品接收区流动通过检测试剂区以提供具有紫杉醇的检测试剂；(c)使具有紫杉醇的检测试剂流过捕获区，由此第一捕获试剂(测试线)与分析物(紫杉醇)竞争结合检测试剂，和由此第二捕获试剂(对照线)结合过量的检测试剂；以及(d)观察结合至第一捕获试剂(测试线)相对于第二捕获试剂(对照线)的检测试剂的量。在某些实施方案中，所述方法还包括通过定量结合至第一捕获试剂的检测试剂的量来测定样品中紫杉醇的量。定量结合至第一捕获试剂的检测试剂的量可以包括光密度测量。在一个实施方案中，紫杉醇抗体是3C6。在另一个实施方案中，紫杉醇抗体是8A10。在某些实施方案中，使用结合紫杉醇的两种紫杉醇抗体或其片段或衍生物(例如3C6和8A10)。在该方法中，紫杉醇材料是与紫杉醇竞争结合检测试剂的紫杉醇抗原。在一个实施方案中，紫杉醇材料是紫杉醇蛋白质缀合物。在本专利技术的方法中，样品接收区与第一捕获试剂之间的距离可改变，以优化紫杉醇检测灵敏度。在某些实施方案中，使样品接收区与第一捕获试剂之间的距离最小化，以优化紫杉醇检测灵敏度。在某些实施方案中，所述方法还包括观察结合至第二捕获试剂(对照线)的过量检测试剂的量。在这些实施方案中，所述方法还可包括通过定量结合至第二捕获试剂的检测试剂的量来测定样品中紫杉醇的量。为了增加灵敏度和动态范围，该方法可进一步包括在第一与第二捕获区之间的第三捕获区，其中第三捕获区包含能够结合检测试剂的紫杉醇材料。在这些实施方案中，可以通过定量结合至第三捕获试剂的检测试剂的量来测定紫杉醇的量。定量结合至第三捕获试剂的检测试剂的量可以包括光密度测量。应当理解，本专利技术的方法适用于其它固相测定，包括例如表面等离子体共振(SPR)测定。如上所述，在该方法中可以使用不止一种抗体、其片段或衍生物。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于测定液体样品中的紫杉醇的方法，包括：(a)将包含紫杉醇的液体样品施加到侧流测定装置，所述装置包含(i)用于接收液体样品的样品接收区；(ii)检测试剂区，其与所述样品接收区液体连通并且按流动方向位于所述样品接收区的下游，其中所述检测试剂区包含沉积在其上的检测试剂，其中所述检测试剂是用可检测的报告基团标记的结合紫杉醇的紫杉醇抗体或其片段或衍生物，并且其中所述紫杉醇抗体或其片段或衍生物具有约104至约107的Kon和约10‑3至约10‑7的Koff；和(iii)捕获区，其与所述检测试剂区液体连通并且按流动方向位于所述检测试剂区的下游，其中所述捕获区包含固定在其上的第一和第二捕获试剂，其中所述第一捕获试剂是能够结合所述检测试剂的紫杉醇材料(测试线)，其中所述第二捕获试剂是能够结合所述检测试剂的抗体(对照线)，其中所述第一捕获试剂按流动方向定位在所述捕获区的上游端的下游的第一距离处，其中所述第二捕获试剂按流动方向定位在所述捕获区的上游端的下游的第二距离处，其中所述第二距离大于所述第一距离，以及其中当所述Kon大于约2.0×105且所述Koff小于约1.0×10‑3时，所述第一距离与所述第二距离的比率为约0.0至约0.4，以及其中当所述Kon大于约2.0×104且所述Koff小于约2.0×10‑4时，所述第一距离与所述第二距离的比率为约0.2至约1.0；以及(b)允许所述样品从所述样品接收区流动通过所述检测试剂区以提供具有紫杉醇的检测试剂；(c)使所述具有紫杉醇的检测试剂流过捕获区，由此所述第一捕获试剂(测试线)与分析物(紫杉醇)竞争结合所述检测试剂，和由此所述第二捕获试剂(对照线)结合过量的检测试剂；以及(d)观察结合至所述第一捕获试剂(测试线)相对于所述第二捕获试剂(对照线)的检测试剂的量。...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.04.04 US 61/975,386;2014.09.17 US 62/051,7571.一种用于测定液体样品中的紫杉醇的方法，包括：(a)将包含紫杉醇的液体样品施加到侧流测定装置，所述装置包含(i)用于接收液体样品的样品接收区；(ii)检测试剂区，其与所述样品接收区液体连通并且按流动方向位于所述样品接收区的下游，其中所述检测试剂区包含沉积在其上的检测试剂，其中所述检测试剂是用可检测的报告基团标记的结合紫杉醇的紫杉醇抗体或其片段或衍生物，并且其中所述紫杉醇抗体或其片段或衍生物具有约104至约107的Kon和约10-3至约10-7的Koff；和(iii)捕获区，其与所述检测试剂区液体连通并且按流动方向位于所述检测试剂区的下游，其中所述捕获区包含固定在其上的第一和第二捕获试剂，其中所述第一捕获试剂是能够结合所述检测试剂的紫杉醇材料(测试线)，其中所述第二捕获试剂是能够结合所述检测试剂的抗体(对照线)，其中所述第一捕获试剂按流动方向定位在所述捕获区的上游端的下游的第一距离处，其中所述第二捕获试剂按流动方向定位在所述捕获区的上游端的下游的第二距离处，其中所述第二距离大于所述第一距离，以及其中当所述Kon大于约2.0×105且所述Koff小于约1.0×10-3时，所述第一距离与所述第二距离的比率为约0.0至约0.4，以及其中当所述Kon大于约2.0×104且所述Koff小于约2.0×10-4时，所述第一距离与所述第二距离的比率为约0.2至约1.0；以及(b)允许所述样品从所述样品接收区流动通过所述检测试剂区以提供具有紫杉醇的检测试剂；(c)使所述具有紫杉醇的检测试剂流过捕获区，由此所述第一捕获试剂(测试线)与分析物(紫杉醇)竞争结合所述检测试剂，和由此所述第二捕获试剂(对照线)结合过量的检测试剂；以及(d)观察结合至所述第一捕获试剂(测试线)相对于所述第二捕获试剂(对照线)的检测试剂的量。2.权利要求1的方法，其还包括通过定量在对照线和测试线结合的检测试剂的量来测定所述样品中紫杉醇的量。3.权利要求2的方法，其中定量结合到所述捕获试剂的检测试剂的量包括光密度测量。4.权利要求1的方法，其中所述可检测的报告基团是胶体金。5.权利要求1的方法，其中所述紫杉醇抗体是3C6。6.权利要求1的方法，其中所述紫杉醇抗体是8A10。7.权利要求1的方法，其中所述紫杉醇材料是与紫杉醇竞争结合所述检测试剂的紫杉醇抗原。8.权利要求1的方法，其中所述紫杉醇材料是紫杉醇蛋白质缀合物。9.权利要求1的方法，其中所述能够结合检测试剂的抗体是山羊抗小鼠抗体。10.权利要求1的方法，其中改变所述样品接收区与所述第一捕获试剂之间的距离以优化紫杉醇检测灵敏度。11.权利要求1的方法，其中使所述样品接收区与所述第一捕获试剂之间的距离最小化以优化紫杉醇检测灵敏度。12.权利要求1的方法，其还包括观察结合至所述第二捕获试剂(对照线)的过量检测试剂的量。13.权利要求1的方法，其还包括通过定量结合至所述第二捕获试剂的过量检测试剂的量来测定所述样品中的紫杉醇的量。14.权利要求1的方法，其还包括在所述第一和第二捕获区之间的第三捕获区，其中所述第三捕获区包含能够结合所述检测试剂的紫杉醇材料。15.权利要求14的方法，其包括通过定量结合至所述第三捕获试剂的检测试剂的量来测定所述样品中紫杉醇的量。16.权利要求15的方法，其中定量结合至所述第三捕获试剂的检测试剂的量包括光密度测量。17.权利要求1的方法，其中所述侧流装置还包含与所述捕获试剂区液体连通并且按流动方向位于所述捕获试剂区的下游的吸收区。18.权利要求1的方法，其中LFA可用SPR或其它固相免疫测定法代替。19.权利要求1的方法，其中使用第一和第二抗体，并且其中所述第一抗体具有大于104的Kon，并且所述第二抗体具有小于10-3的Koff。20.权利要求1的方法，其中两条或三条线可用于在相同样品上产生多个读数，从而允许增加重现性和扩展的动态范围。21.一种用于监测经诊断患有癌症的患者中的紫杉醇治疗的功效的方法，其包括：(a)在第一时间点用紫杉醇治疗所述癌症患者；(b)在第一时间点测定所述患者中紫杉醇的第一浓度，其中测定所述浓度包括权利要求1-20中任一项的方法；(c)在第二时间点用紫杉醇治疗所述患者；(d)在第二时间点测定所述患者中紫杉醇药物的第二浓度，其中测定所述浓度包括权利要求1-20中任一项的方法；和(e)比较所述患者中紫杉醇的第一和第二浓度以测定癌症治疗的功效。22.一种用于在经诊断患有癌症的患者中进行紫杉醇治疗的药代动力学引导给药的方法，包括：(a)在第一时间点用紫杉醇治疗所述癌症患者；在第一时间点测定所述患者中紫杉醇的一个或多个药代动力学参数，其中测定所述一个或多个药代动力学参数包括通过权利要求1-20的任一项的方法测量紫杉醇的浓度；(b)使用来自第一次给药的药代动力学信息在第二时间点用紫杉醇治疗所述患者；(c)在第二时间点测定所述患者中紫杉醇的一个或多个药代动力学参数，其中测定所述一个或多个药代动力学参数包括通过权利要求1-20的任一项的方法测量紫杉醇的浓度；和(d)将受试者中的紫杉醇在第一时间点的一个或多个药代动力学参数与在第二时间点的水平进行比较，以确认实现最佳给药。23.权利要求22的方法，其中所述药代动力学参数选自达到最大浓度的时间(Tmax)、浓度最大值(Cmax)、曲线下面积(AUC)、清除率(CL...

【专利技术属性】
技术研发人员：李岳蓉，朴哲浩，
申请(专利权)人：奥托泰利克有限责任公司，
类型：发明
国别省市：美国;US