一种金丝4号枣的组培快繁方法技术

本发明专利技术属于植物组培技术领域，具体涉及一种金丝4号枣的组培快繁方法，包括外植体的建立、启动培养、继代培养、生根培养、炼苗和移栽等步骤，本发明专利技术针对金丝4号枣这一品种进行研究，于不同阶段采用了最适合的培养基组成，繁殖系数高，生根率高，该方法操作简便，成本低，能有效、方便的在短时间内获得大量金丝4号枣组培苗，而且所获得的组培苗成活率高，苗木能够保持优树的优良遗传性状，采用本发明专利技术的方法可实现 “金丝4号”枣树的大量繁殖和快速推广，适合广西北部山区大面积区域种植，特别是喀斯特地貌山区种植。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于植物组培
，具体涉及一种金丝4号枣的组培快繁方法。
技术介绍
“金丝4号”枣是山东省果树研究所1990年从金丝2号自然杂交的实生枣树中选育出的优良单株。具有果大、整齐、含糖高、品质优、抗病、抗裂果、结果早、极丰产、抗逆、适应性强等优点。金丝4号枣果实近长筒形，两端平，中部略粗。平均果重10～12克，整齐度高。果肩平而略斜，无明显梗洼，环洼中等深宽，果尖微凹，果面光滑，光亮艳丽，果皮细薄富韧性，白熟期浅绿白色，着色后呈浅棕红色。果肉白色，质地致密脆嫩，汁液较多，味极甜微酸，无苦辣草辛等杂味，口感极佳。皮薄肌丰，核小肉厚，清香甘甜，既可以鲜食，又可以制干，以其优异的品质和丰富的营养备受消费者欢迎。“金丝4号”枣具有早实、丰产、抗逆性强的特点，是我国南方丘岗山地开发极具发展前途的树种，已经成为我国南方地区主栽枣品种。目前，在实际栽培中，“金丝4号”枣大多采用根蘖苗分株、扦插和嫁接等方法进行繁育，利用根孽分苗繁殖，需与嫁接繁殖相结合，不仅费工费时，成苗率较低，且易侵染各种植物病毒，而且采用根蘖苗分株、扦插和嫁接等方法进行繁育繁殖率很低，生长速度慢，弱病苗比例高，不能进行周年生产，远远不能满足市场的大量需求。因而影响了其大面积的推广。在此形势下，采用枣树组织培养技术则成了快速培育良种苗木的有效途径。组织培养（TissueCulture）是在无菌条件下，分离并在培养基中培养离体植物组织的技术，用组织培养方法快速繁殖，具有整株的遗传一致性，生长健壮，根系发达、移栽成活率高，果品品质好，产量高等优点。枣树的组织培养研究始于2O世纪70年代末，迄今为止，已有20多个品种以不同类型外植体建立了无菌离体繁殖体系。对于枣树的组培方法也有相关文献报道，如：1、【题名】毛叶枣组培快繁技术研究【作者】续九如，李春立，孙建设【出处】北京林业大学学报，2003,25（3）【摘要】利用组织培养技术对毛叶枣的组培快繁技术进行了研究。证明3、4月是1年内采集外植体的最佳时期，在此阶段对外植体进行培养时，有效萌芽率最高。以MS为基本培养基筛选出适合毛叶枣组培各阶段的适宜激素浓度和配比，分别为：启动培养基MS+6-BA0.8mg/L+IBA0.4mg/L；增殖培养基MS+6-BA1.2mg/L+IBA0.5mg/L；生根培养基1/2MS+IBA3.0mg/L并阐明了继代次数与增殖系数和生根率的关系，提出毛叶枣继代次数以8代左右为宜，8代之后应进行生根培养。2、【题名】酸枣组培快繁研究【作者】代丽，刘孟军，王玖瑞，周俊义【出处】河北农业大学学报，2005,28（2）【摘要】:以休眠芽为试材，建立了酸枣的组培快繁体系。最适启动培养基为MS+BA1.0+IBA0.1或MS+BA2.0+NAA0.1，增殖培养基为MS+BA2.0-3.0，萌芽率和壮芽率均超过了70％。增殖培养时，下部茎段的出芽率高于上部茎段，但萌发壮芽的比率则以上部茎段相对较高。1/2MS+IBA0.5-1.0是酸枣快繁生根培养的适宜培养基，生根率最高可达92％。迄今为止，人们在枣树的组培研究方面已取得了一些成就，运用组培繁殖枣树优良品种的技术已逐步应用到生产中，但是，枣的组织培养较困难，成本较高，不同品种间的繁殖条件差异较大，不同品种的枣树的组培方法也不一样。目前，在“金丝4号”枣的繁育上，由于采用传统的根蘖苗分株、扦插和嫁接等方法进行繁育，存在着繁育繁殖率很低，生长速度慢，远远不能满足市场的大量需求等问题；因此，开发一种针对“金丝4号”枣的组培快繁方法进行培养繁殖，能够促进优良遗传材料的快速繁殖，实现“金丝4号”枣树的大量繁殖和快速推广，是解决市场需求等问题的有效方法。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种操作简便，生产成本低，生根率高，繁殖率高，可应用于大规模商品化育苗的金丝4号枣的组培快繁方法，采用该方法能有效、方便的在短时间内获得大量金丝4号枣组培苗，而且所获得的组培苗成活率高，适合广西喀斯特地貌山区种植。为实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：一种金丝4号枣的组培快繁方法，包括以下步骤：(1)外植体的建立：于3月初，剪取16-18cm长、当年生优质粗壮的根蘖条，用自来水冲洗10分钟后，于质量浓度为0.4%洗衣粉溶液中浸泡10-13分钟，再用自来水冲洗干净，然后将洗净后的根蘖条置于培养室中水培培养，每22-26小时换一次水，培养温度为27-28℃，光照时间17-19h/d，光照强度2000～3500lx，培养至长出2～3cm的水培芽后，取出根蘖条，清洗、消毒后剪取水培芽作为外植体；（2）启动培养：将水培芽转入经高温灭菌的启动培养基中，诱导不定芽的萌发，培养条件为温度25～28℃,光照强度为2000-2500lx，光照时间16-17h/d，在培养室中无菌培养，新芽萌发之后，将其转接到分生培养基中培养，在光照强度为2000-2200lx，光照时间14-16h/d，温度为27℃的条件下，培养40-45天；（3）继代培养：将植株茎段转接入经消毒后的继代培养基中培养，在培养温度为25-26℃，光强2000～25O0lx，光照时间为15h/d的条件下培养32-34d；（4）生根培养：在无菌条件下，剪取长2-2.5cm继代培养得到的带叶茎段，插入生根培养基中进行生根培养；培养温度26～28℃，光强1800～20001x，光照时间14-16h/d；（5）炼苗：当经过生根培养后的生根试管苗根长1.0～2.0cm时，将组培苗进行室内炼苗，炼苗温度为：27-28℃，光照强度为4000-6000lx，室内瓶炼4-6天后，敞口炼苗5-7天；（6）移栽：取出试管苗，洗净根上的培养基，移栽到用质量浓度为0.2%KMnO4溶液消毒过的椰糠+蛭石+细河沙按照2-3:5:1的比例做基质的营养杯中，浇足水，保持空气湿度为85％-90%，温度25～26℃，避免阳光直射，35-38天后，移出温室进行全光照炼苗5-6d，及时浇水，然后移栽大田。所述的金丝4号枣的组培快繁方法，步骤（1）中培养至长出2～3cm的水培芽后对根蘖条清洗消毒的具体步骤为：取出根蘖条，用75%的酒精浸泡35s，无菌水冲洗3-4次，沥干水分，放到质量浓度为0.1%HgCL2溶液中浸泡消毒7分钟，然后用无菌水冲洗7-8次，用镊子夹取清洗好的茎段，放置在灭菌的接种碟上，用灭菌过的滤纸吸干表面水分，剪取水培芽作为外植体。所述的金丝4号枣的组培快繁方法，步骤（2）中的启动培养基的成分为：MS+N6苄基腺嘌呤（6-BA)1.2mg/L+萘乙酸（NAA）0.15～0.25mg/L+3.5%糖蜜+琼脂6g/L，培养基pH值为6.0-6.3。所述的金丝4号枣的组培快繁方法，步骤（2）中的分生培养基的成分为：MS+N6苄基腺嘌呤（6-BA)2.2mg/L+萘乙酸（NAA）0.5mg/L+维生素C1.6-1.8mg/L+谷氨酸1.7～2.0mg/L+3.5%糖蜜+琼脂7g/L，培养基pH值为6.0。所述的金丝4号枣的组培快繁方法，步骤（3）中继代培养基的成分为：MS+N6苄基腺嘌呤（6-BA)2.2mg/L+萘乙酸（NAA）0.5-0.6mg/L+维生素C0.7-0.9mg/L+维生素B21.5本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种金丝4号枣的组培快繁方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)外植体的建立：于3月初，剪取16‑18cm长、当年生优质粗壮的根蘖条，用自来水冲洗10分钟后，于质量浓度为0.4%洗衣粉溶液中浸泡10‑13分钟，再用自来水冲洗干净，然后将洗净后的根蘖条置于培养室中水培培养，每22‑26小时换一次水，培养温度为27‑28℃，光照时间17‑19h/d，光照强度2000～3500lx，培养至长出2～3cm的水培芽后，取出根蘖条，清洗、消毒后剪取水培芽作为外植体；（2）启动培养：将水培芽转入经高温灭菌的启动培养基中，诱导不定芽的萌发，培养条件为温度 25～28 ℃ ,光照强度为2000‑2500lx，光照时间16‑17h/d，在培养室中无菌培养，新芽萌发之后，将其转接到分生培养基中培养，在光照强度为2000‑2200lx，光照时间14‑16h/d，温度为27℃的条件下，培养40‑45天；（3）继代培养：将植株茎段转接入经消毒后的继代培养基中培养，在培养温度为25‑26℃，光强 2000～25O0lx，光照时间为15h/d的条件下培养32‑34d；（4）生根培养：在无菌条件下，剪取长2‑2.5cm继代培养得到的带叶茎段，插入生根培养基中进行生根培养；培养温度 26～28℃，光强1800～20001x，光照时间14‑16h/d；（5）炼苗：当经过生根培养后的生根试管苗根长1.0～2.0 cm时，将组培苗进行室内炼苗，炼苗温度为：27‑28℃，光照强度为4000‑6000lx，室内瓶炼4‑6天后，敞口炼苗5‑7天；（6）移栽：取出试管苗，洗净根上的培养基，移栽到用质量浓度为0.2%KMnO4溶液消毒过的椰糠+蛭石+细河沙按照2‑3:5:1的比例做基质的营养杯中，浇足水，保持空气湿度为85％‑90%，温度 25～26℃，避免阳光直射，35‑38 天后，移出温室进行全光照炼苗5‑6d，及时浇水，然后移栽大田。...

【技术特征摘要】
1.一种金丝4号枣的组培快繁方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)外植体的建立：于3月初，剪取16-18cm长、当年生优质粗壮的根蘖条，用自来水冲洗10分钟后，于质量浓度为0.4%洗衣粉溶液中浸泡10-13分钟，再用自来水冲洗干净，然后将洗净后的根蘖条置于培养室中水培培养，每22-26小时换一次水，培养温度为27-28℃，光照时间17-19h/d，光照强度2000～3500lx，培养至长出2～3cm的水培芽后，取出根蘖条，清洗、消毒后剪取水培芽作为外植体；（2）启动培养：将水培芽转入经高温灭菌的启动培养基中，诱导不定芽的萌发，培养条件为温度25～28℃,光照强度为2000-2500lx，光照时间16-17h/d，在培养室中无菌培养，新芽萌发之后，将其转接到分生培养基中培养，在光照强度为2000-2200lx，光照时间14-16h/d，温度为27℃的条件下，培养40-45天；（3）继代培养：将植株茎段转接入经消毒后的继代培养基中培养，在培养温度为25-26℃，光强2000～25O0lx，光照时间为15h/d的条件下培养32-34d；（4）生根培养：在无菌条件下，剪取长2-2.5cm继代培养得到的带叶茎段，插入生根培养基中进行生根培养；培养温度26～28℃，光强1800～20001x，光照时间14-16h/d；（5）炼苗：当经过生根培养后的生根试管苗根长1.0～2.0cm时，将组培苗进行室内炼苗，炼苗温度为：27-28℃，光照强度为4000-6000lx，室内瓶炼4-6天后，敞口炼苗5-7天；（6）移栽：取出试管苗，洗净根上的培养基，移栽到用质量浓度为0.2%KMnO4溶液消毒过的椰糠+蛭石+细河沙按照2-3:5:1的比例做基质的营养杯中，浇足水，保持空气湿度为85％-90%，温度25～26℃，避免阳光直...

【专利技术属性】
技术研发人员：雷军强，韦颖婷，覃稳梅，李玉秋，莫晓君，韦倩梅，
申请(专利权)人：象州县科学技术局，
类型：发明
国别省市：广西;45