本发明专利技术提供一种海参多糖和海参胶原蛋白多肽的联合制备方法，以海地瓜为原料，通过温和的二阶段酶解处理方法，利用超滤膜分离技术分别得到海地瓜多肽混合液和海地瓜多糖混合液。再通过选用截留分子量不同的超滤膜，实现对海地瓜多肽和海地瓜多糖的分级分离，最终得到3种分子量的海地瓜蛋白多肽产品和4种分子量的海地瓜多糖产品。本发明专利技术通过联产方法使海地瓜中不同分子量的海参多肽和多糖产品可以联合制备，减少提取过程废弃物的排放，降低生产成本。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种海参多糖和海参胶原蛋白多肽的联合制备方法，属于分离纯化
技术介绍
海参（seacucumber,holothurians）在我国约有140多种，其中可供食用者约有40多种，常见的食用海参有：仿刺参、玉足海参、梅花参、茄参、黑乳参、花刺参、糙海参、方柱五角瓜参、海地瓜等。海地瓜俗称海茄子，是我国20多种食用海参中的一种，但食用品质较差，是我国大宗低值海参品种，但与花刺参、梅花参等高品质可食用海参营养成分相似。体壁是海参的主要食（药）用部位，国内外学者对海参的研究发现，海参体壁营养非常丰富，干海参体壁的有机成分中蛋白质含量接近90％，富含人体所需氨基酸，同时，体壁还含有海参皂苷、多糖、糖蛋白、多种维生素及微量元素，不含胆固醇。国内外已有关于海参的多种活性物质抗癌、抗肿瘤、抗氧化、降血压、免疫调节等作用的报道。海参肽是指蛋白酶水解并分离提纯后得到的小分子肽，此外，海参体内还含有神经肽、糖肽以及抗菌肽等多种活性肽。海参肽具有多种功效，如降血压、降血脂、抗动脉粥样硬化、抗疲劳、抗菌、提高免疫力、延缓衰老和抗氧化等诸多生理功能，对人体生理机能有着其他营养物质不可替代的作用。由于海参肽具有良好的溶解性、稳定性、低粘度性、易消化吸收、无抗原性、食用安全性等特殊的理化性质，因此，海参肽比其他普通海参制品有着更高的生物效价。海参多糖是海参干体中除蛋白之外含量最高的有机物，现阶段研究的海参多糖主要分两种：海参硫酸软骨素（SC-CHS）和海参岩藻聚糖硫酸酯（SC-FUC）。岩藻聚糖硫酸酯是一类主要由岩藻糖及硫酸酯基团组成的多糖类物质，已被证实其具有多种生理活性，包括抗凝血与抗血栓、抗病毒、抗肿瘤、免疫调节、抗炎、降血脂、抗氧化、胃保护作用等。海参岩藻聚糖硫酸酯的结构比同种海参硫酸软骨素的结构要简单,但具有抗破骨类细胞形成、免疫调节、抗氧化等活性较高。目前，有采用化学法水解海参蛋白、也有采用酶解法，都是通过一步水解法进行单独海参多肽或者海参多糖的提取，上述方法只能得到一种海参活性物质(或海参多肽或海参多糖)，其它有效的海参活性物质在提取的同时被浪费掉，并且得到的海参多肽为多种分子量混合的物质，因为具有活性的海参肽通常为二肽、三肽等小分子肽，其中的大分子量的海参肽不利于吸收；另外化学法水解海参蛋白在提取海参活性物质的同时容易产生有毒物质。同时，关于海参多糖提取方法的研究报道较多，但利用低值海参联合制备几种分子量的海参多糖和海参蛋白多肽的方法鲜有报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于针对现有技术的不足，提供一种原料利用率高、生产成本较低的低值海参多糖和海参蛋白多肽的联产制备方法，它是以低值海参海地瓜为原料，主要通过温和的二阶段酶解处理方法，利用超滤膜分离技术分别得到海地瓜多肽混合液和海地瓜多糖混合液。再通过选用截留分子量不同的超滤膜，实现对海地瓜多肽和海地瓜多糖的分级分离，最终得到3种分子量的海地瓜蛋白多肽产品和4种分子量的海地瓜多糖产品。为实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：具体方法包括如下：（1）预处理。海地瓜干品用30-50℃清水泡发24-36小时，洗净体表与体内的泥沙、淤泥，切碎成块状，置于40-50℃烘箱中烘至恒重，粉碎至60-100目颗粒，制成海地瓜干粉，密封干燥保存备用。（2）酶解。海地瓜干粉加入纯净水，料液比为1：30-1：80（W/W）。采用不同的酶和水解条件进行二阶段酶解：用碱调pH至6.8-8.5，加入复合蛋白酶Ⅰ，温度40-60℃，保温振荡水浴酶解1-4小时；用酸调整pH至4.0-7.0，加入复合蛋白酶Ⅱ，温度40-60℃，保温振荡水浴酶解2-5小时。酶解结束后加热灭酶，抽滤除杂，得酶解液待用。（3）超滤膜分离。将步骤(2)中获得的海地瓜酶解液在优化的超滤条件下，选用截留分子量为10KDa超滤膜进行超滤分离，透过液为海地瓜多肽混合液，截流液为海地瓜多糖混合液。（4）海地瓜多肽的分级分离。在超滤条件下，选用截留分子量为5KDa和1KDa的超滤膜，依次对步骤(3)中获得的分子量在10KDa以下的海地瓜多肽混合液进行超滤分级分离，采用截留液全循环超滤方式，当截留液体积为原始酶解液体积的1/5时，达到超滤终点。依次收集5KDa截留液、1KDa截留液和1KDa透过液，透析除盐，旋转蒸发后，冷冻干燥得到3个海地瓜多肽产品P1、P2、P3，其分子质量范围分别是5~10KDa、1~5KDa和＜1KDa；所占比例12.46%、P2为39.07%、P3为48.47%。（5）海地瓜多糖的分级分离。在超滤条件下，选用截留分子量为10KDa、100KDa和200KDa的超滤膜对步骤（3）获得的海地瓜多糖混合液进行截留液全循环超滤，当截留液体积为原始酶解液体积的1/5时，达到超滤终点。依次收集10KDa透过液、100KDa透过液、200KDa透过液和200KDa截留液，透析除盐，旋转蒸发后，冷冻干燥得到4个海地瓜多糖产品G1、G2、G3和G4，其分子质量范围分别是＜10KDa、10~100KDa、100~200KDa和＞200KDa，所占比例：G1为3.67%、G2为19.36%、G353.09%、G4为23.88%。在步骤（2）中，所用的复合蛋白酶Ⅰ为：胰蛋白酶和碱性蛋白酶，两者重量比为2：1，复合蛋白酶Ⅰ的添加量为原料重量的0.2-3%。所用的复合蛋白酶Ⅱ为：木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和胃蛋白酶，三者的重量比为3：1：1，复合蛋白酶Ⅱ的添加量为原料重量的0.5-4%。在步骤(3)、步骤(4)、步骤(5)中，所述的超滤条件：操作压力为0.05-1.0MPa，操作温度为25-45℃。在步骤(4)、步骤(5)中，所述的旋转蒸发温度为40-60℃.由于本专利技术根据低值海参海地瓜所含胶原蛋白和多糖等的特性，改变传统的分别提取提取的方法，采用不同的水解酶和水解条件对海地瓜进行二阶段酶解，选用不同截留分子量的超滤膜，对不同分子量的海参多肽和多糖逐步分级分离，实现了不同分子量的海参多肽和多糖产品联合制备。1、本专利技术利用低值海参海地瓜为原料，提高了原料利用价值。2、本专利技术通过联产方法使海地瓜中不同分子量的海参多肽和多糖产品可以联合制备，减少提取过程废弃物的排放，降低生产成本。3、本专利技术制备的多种不同分子量的海参多肽和多糖产品可以满足不同需求，应用范围广。具体实施方式本专利技术用下列实施例来进一步说明本专利技术，但本专利技术的保护范围并不限于下列实施例。实施例1（1）预处理。海地瓜干品用30℃清水泡发24本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种海参多糖和海参胶原蛋白多肽的联合制备方法，其特征在于：以海地瓜为原料，通过温和的二阶段酶解处理方法，利用超滤膜分离技术分别得到海地瓜多肽混合液和海地瓜多糖混合液；再通过选用截留分子量不同的超滤膜，实现对海地瓜多肽和海地瓜多糖的分级分离，最终得到3种分子量的海地瓜蛋白多肽产品和4种分子量的海地瓜多糖产品。
【技术特征摘要】
1.一种海参多糖和海参胶原蛋白多肽的联合制备方法，其特征在于：以海地瓜为原料，
通过温和的二阶段酶解处理方法，利用超滤膜分离技术分别得到海地瓜多肽混合液和海地
瓜多糖混合液；再通过选用截留分子量不同的超滤膜，实现对海地瓜多肽和海地瓜多糖的
分级分离，最终得到3种分子量的海地瓜蛋白多肽产品和4种分子量的海地瓜多糖产品。
2.根据权利要求1所述的一种海参多糖和海参胶原蛋白多肽的联合制备方法，其特征
在于：所述方法具体包括如下：
（1）预处理：海地瓜干品用30-50℃清水泡发24-36小时，洗净体表与体内的泥沙、淤泥，
切碎成块状，置于40-50℃烘箱中烘至恒重，粉碎至60-100目颗粒，制成海地瓜干粉，密封干
燥保存备用；
（2）酶解：海地瓜干粉加入纯净水，料液质量比为1：30-1：80；采用不同的酶和水解条件
进行二阶段酶解：用碱调pH至6.8-8.5，加入复合蛋白酶Ⅰ，温度40-60℃，保温振荡水浴酶解
1-4小时；用酸调整pH至4.0-7.0，加入复合蛋白酶Ⅱ，温度40-60℃，保温振荡水浴酶解2-5
小时；酶解结束后加热灭酶，抽滤除杂，得酶解液待用；
（3）超滤膜分离：将步骤(2)中获得的海地瓜酶解液在超滤条件下，选用截留分子量为
10KDa超滤膜进行超滤分离，透过液为海地瓜多肽混合液，截流液为海地瓜多糖混合液；
（4）海地瓜多肽的分级分离：在超滤条件下，选用截留分子量为5KDa和1KDa的超滤
膜，依次对步骤(3)中获得的分子量在10KDa以下的海地瓜多肽混合液进行超滤分级分离，
采用截留液全循环超滤方式，当截留液体积为原始酶解液体积的1/5时，达到超滤终点；依
次收集5KDa截留液、1KDa截留液和1KDa透过液，透析除盐，旋转蒸发后，冷冻干燥得到3
个海地瓜多肽产品P1、P2、P3；
（5）海地瓜多糖的分级分离：在超滤条件下，选用...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈发河，吴光斌，李真，
申请(专利权)人：集美大学，
类型：发明
国别省市：福建;35
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