CAPG在制备诊断帕金森症产品中的用途制造技术

本发明专利技术公开了CAPG基因可以作为诊断帕金森症的分子标志物。本发明专利技术研究证明与正常人相比，帕金森症患者血液中CAPG基因的mRNA表达水平显著下降。根据CAPG基因与帕金森症之间的存在的相关性，可以制备诊断帕金森症的试剂盒，该试剂盒可以通过检测收受试者血液中CAPG基因的mRNA水平来判断是否发生帕金森症，该试剂盒可在临床上广泛应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于分子诊断领域，涉及一种用于帕金森症诊断的分子标志物，具体涉及血液中的分子标志物-CAPG基因在制备诊断帕金森症的产品中的应用。
技术介绍
帕金森病是临床常见的中枢神经系统退行性疾病，以静止性震颤、运动迟缓、肌强直和姿势步态异常等运动症状为主要表现，并常伴感觉障碍、睡眠障碍、自主神经功能紊乱和神经精神障碍等非运动症状；病理特征为黑质多巴胺能神经元大量缺失，以及残留神经元胞质内出现嗜酸性包涵体，即路易小体(LB)。帕金森病患者一般仅在多巴胺能神经元减少50％、多巴胺水平降低达70％-80％的情况下才表现出典型的运动症状，由于神经元的不可再生特点，此时患者已错过了治疗的最佳时机。因此，积极寻找具有早期诊断价值的生物学标志物，在多巴胺能神经元存活时即明确诊断帕金森是生物学研究的热点。目前，关于帕金森病早期诊断的生物化学标志物研究涉及免疫学、炎症反应、氧化应激反应、细胞凋亡等多个领域，其中以突触共核蛋白(a-Syn)最具研究前景。组织病理学研究显示，帕金森病患者黑质纹状体突触共核蛋白异常聚集、沉积及功能失调，而且突触共核蛋白是路易小体的主要成分，因此若在脑脊液、外周血或唾液等体液中检测到突触共核蛋蛋白，则判断受试者患有帕金森症。但是以蛋白为疾病标志物的检测方法缺乏特异性和灵敏性，且相比基因检测而言，蛋白检测还不能完全体现“早期”检测的概念，因此寻找一种有效的能够在早期即可诊断帕金森症发生的基因标志物是亟待解决的问题。
技术实现思路
为了弥补现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种可用于帕金森症早期诊断的分子标志物。相比传统的帕金森症的诊断方法，使用基因标志物来诊断帕金森症的具有及时性、特异性和灵敏性，从而使患者在疾病早期就能知晓疾病风险，针对风险高低，采取相应的预防和治疗措施。为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：本专利技术提供了检测CAPG基因表达的产品在制备诊断帕金森症的工具中的应用。进一步，上面所提到的检测CAPG基因表达的产品包括：通过RT-PCR、实时定量PCR、免疫检测、原位杂交、芯片或高通量测序平台检测CAPG基因表达水平以诊断帕金森症的产品。进一步，所述用RT-PCR诊断帕金森症的产品至少包括一对特异扩增CAPG基因的引物；所述用实时定量PCR诊断帕金森症的产品至少包括一对特异扩增CAPG基因的引物；所述用免疫检测诊断帕金森症的产品包括：与CAPG蛋白特异性结合的抗体；所述用原位杂交诊断帕金森症的产品包括：与CAPG基因的核酸序列杂交的探针；所述用芯片诊断帕金森症的产品包括：蛋白芯片和基因芯片；其中，蛋白芯片包括与CAPG蛋白特异性结合的抗体，基因芯片包括与CAPG基因的核酸序列杂交的探针。在本专利技术的具体实施方案中，所述用实时定量PCR诊断帕金森症的产品至少包括一对特异扩增CAPG基因的引物的序列如SEQIDNO.3和SEQIDNO.4所示。优选地，所述诊断工具包括芯片、试剂盒、试纸或高通量测序平台。其中，高通量测序平台是一种特殊的诊断工具，检测CAPG基因表达的产品可以应用于该平台实现对CAPG基因的表达情况的检测。随着高通量测序技术的发展，对一个人的基因表达谱的构建将成为十分便捷的工作。通过对比疾病患者和正常人群的基因表达谱，容易分析出哪个基因的异常与疾病相关。因此，在高通量测序中获知CAPG基因的异常与帕金森症相关也属于CAPG基因的用途，同样在本专利技术的保护范围之内。本专利技术还提供了一种诊断帕金森症的工具，所述诊断工具包括芯片、试剂盒、试纸、或高通量测序平台。其中，所述芯片包括基因芯片、蛋白质芯片；所述基因芯片包括固相载体以及固定在固相载体的寡核苷酸探针，所述寡核苷酸探针包括用于检测CAPG基因转录水平的针对CAPG基因的寡核苷酸探针；所述蛋白质芯片包括固相载体以及固定在固相载体的CAPG蛋白的特异性抗体；所述基因芯片可用于检测包括CAPG基因在内的多个基因(例如，与帕金森症相关的多个基因)的表达水平。所述蛋白质芯片可用于检测包括CAPG蛋白在内的多个蛋白质(例如与帕金森症相关的多个蛋白质)的表达水平。通过将多个与帕金森症的标志物同时检测，可大大提高帕金森症诊断的准确率。其中，所述试剂盒包括基因检测试剂盒和蛋白免疫检测试剂盒；所述基因检测试剂盒包括用于检测CAPG基因转录水平的试剂；所述蛋白免疫检测试剂盒包括CAPG蛋白的特异性抗体。进一步，所述试剂包括使用RT-PCR、实时定量PCR、免疫检测、原位杂交或芯片方法检测CAPG基因表达水平过程中所需的试剂。优选度，所述试剂包括针对CAPG基因的引物和/或探针。根据CAPG基因的核苷酸序列信息容易设计出可以用于检测CAPG基因表达水平的引物和探针。与CAPG基因的核酸序列杂交的探针可以是DNA、RNA、DNA-RNA嵌合体、PNA或其它衍生物。所述探针的长度没有限制，只要完成特异性杂交、与目的核苷酸序列特异性结合，任何长度都可以。所述探针的长度可短至25、20、15、13或10个碱基长度。同样，所述探针的长度可长至60、80、100、150、300个碱基对或更长，甚至整个基因。由于不同的探针长度对杂交效率、信号特异性有不同的影响，所述探针的长度通常至少是14个碱基对，最长一般不超过30个碱基对，与目的核苷酸序列互补的长度以15-25个碱基对最佳。所述探针自身互补序列最好少于4个碱基对，以免影响杂交效率。所述高通量测序平台包括检测CAPG基因表达水平的试剂。所述试纸包括试纸载体和固定在试纸载体上的寡核苷酸，所述寡核苷酸能够检测CAPG基因的转录水平。进一步，所述CAPG蛋白的特异性抗体包括单克隆抗体、多克隆抗体。所述CAPG蛋白的特异性抗体包括完整的抗体分子、抗体的任何片段或修饰(例如，，嵌合抗体、scFv、Fab、F(ab’)2、Fv等。只要所述片段能够保留与CAPG蛋白的结合能力即可。用于蛋白质水平的抗体的制备时本领域技术人员公知的，并且本专利技术可以使用任何方法来制备所述抗体。在本专利技术的具体实施方案中，所述针对CAPG基因的引物序列如下：正向引物序列如SEQIDNO.3所示，反向引物如SEQIDNO.4所示。用于诊断帕金森症的CAPG基因及其表达产物的来源包括但不限于血液、组织液、尿液、唾液、脊髓液等可以获得基因组DNA的体液。在本专利技术的具体实施方案中，用于诊断帕金森症的CAPG基因及其表达产物的来源是血液。在本专利技术的上下文中，“CAPG基因”包本文档来自技高网...

【技术保护点】
检测CAPG基因表达的产品在制备诊断帕金森症的工具中的应用。

【技术特征摘要】
1.检测CAPG基因表达的产品在制备诊断帕金森症的工具中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述产品包括：通过RT-PCR、
实时定量PCR、免疫检测、原位杂交、芯片或高通量测序平台检测CAPG基因
表达水平以诊断帕金森症的产品。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述用RT-PCR诊断帕金森症
的产品至少包括一对特异扩增CAPG基因的引物；所述用实时定量PCR诊断帕金
森症的产品至少包括一对特异扩增CAPG基因的引物；所述用免疫检测诊断帕金
森症的产品包括：与CAPG蛋白特异性结合的抗体；所述用原位杂交诊断帕金森
症的产品包括：与CAPG基因的核酸序列杂交的探针；所述用芯片诊断帕金森症
的产品包括：蛋白芯片和基因芯片；其中，蛋白芯片包括与CAPG蛋白特异性结
合的抗体，基因芯片包括与CAPG基因的核酸序列杂交的探针。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述用实时定量PCR诊断帕金
森症的产品至少包括的一对特异扩增CAPG基因的引物如SEQIDNO.3和SEQID
NO.4所示。
5.一种用于诊断帕金森症的工具，其特征在于，所述工具能够通过检测样
本中CAPG基因的表达来诊断帕金...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙梅芬，周丽丽，
申请(专利权)人：孙梅芬，周丽丽，
类型：发明
国别省市：山东;37