一种老芒麦种子的无菌萌芽方法技术

本发明专利技术提供了一种老芒麦种子的无菌萌芽方法，包括如下步骤：将老芒麦种子经过无菌水浸泡、高猛酸钾溶液消毒5min以上、接种培养以及移栽炼苗的步骤后，即可。本发明专利技术实施例采用的老芒麦种子的无菌萌芽方法前后步骤衔接紧密、设计合理，保证了种子在无菌状态下的最佳发芽率，较好的解决了种子发芽率低以及幼苗出苗率低的问题。

Method for aseptic germination of Elymus seeds

The present invention provides a method for aseptic germination of Elymus seeds, which includes the following steps: seed soaked, sterile water potassium permanganate disinfection solution above 5min, inoculation and seedling transplanting steps, you can. Aseptic germination method is the embodiment of the invention adopts the sibiricus seed and steps are closely linked, reasonable design, to ensure the optimum seed germination rate under sterile conditions, solves the problem of low seedling emergence rate and the problem of low seed germination rate.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及种子萌发领域，具体而言，涉及一种老芒麦种子的无菌萌芽方法。
技术介绍
老芒麦别名西伯利亚披碱草，是禾本科小麦族披碱草属多年生疏丛型中旱生植物，具有抗寒、适应性强，适口性好、粗蛋白含量高和易栽培等优良特性，可用于人工草地和放牧草地建植，退化草地改良，在生态环境保护和季节畜牧业中起着重要作用。老芒麦是披碱草属的模式植物种，在披碱草属及其近缘种的系统发育研究方面有特殊的遗传地位。作为我国主要作物小麦的近缘植物，对小麦族植物育种和改良中起重要作用。近年来随着退牧还草工程的开展，对老芒麦的需求日益扩大，因此对老芒麦的科学研究与推广应用也日益受到重视。国内在老芒麦的资源评价、生物学特性、栽培生产等方面做了较多的研究工作，但遗传多样性及育种研究还相当缺乏。我国老芒麦种子资源丰富，分布范围广，搜集和保护有一定的难度，尤其对珍稀的野生种，又时常因为种子未能及时合理的保存而出现老化现象，易造成发芽率较低和遗传完整性下降等问题。目前，老芒麦种子的资源存在诸多不足，不是种子消毒不彻底被大量污染就是消毒时间太长对其造成毒害作用，严重影响其原有的发芽率，容易出现畸形幼苗。有鉴于此，特提出本专利技术。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种老芒麦种子的无菌萌芽方法，所述的无菌萌芽方法具有方法前后步骤衔接紧密、设计合理，保证了种子在无菌状态下的最佳发芽率，较好的解决了种子发芽率低以及幼苗出苗率低的问题。为了实现本专利技术的上述目的，特采用以下技术方案：本专利技术实施例提供了一种老芒麦种子的无菌萌芽方法，包括如下步骤：将老芒麦种子经过无菌水浸泡、高猛酸钾溶液消毒5min以上、接种培养以及移栽炼苗的步骤后，即可。无菌种子萌发技术已经成功应用于花卉、药材等植物中，这种技术的应用是通过组织培养切实解决种子发芽率低及幼苗出苗率低等问题，因此使用较普遍。针对老芒麦种子，现有技术中不是种子消毒不彻底被大量污染就是消毒时间太长对其造成毒害作用，严重影响其原有的发芽率，容易出现畸形幼苗。可见，在老芒麦种子无菌萌发研究方面，现有技术还没有一个切实有效的方法予以借鉴。为了解决以上出现的技术问题，本专利技术提供了一种适于老芒麦种子的无菌萌芽方法，成功的解决了发芽率低、出苗率低等问题。本发明方法不但保证消毒效果彻底，而且在满足消毒彻底的情况下保证高发芽率，非常值得借鉴，适于大范围推广应用，为老芒麦种子的无菌萌芽技术提供了一种可靠有效的参考方法，也为后续应用提供了参考数据，指明了研究方向。本专利技术通过实践发现采用高猛酸钾溶液对老芒麦种子进行消毒不但消毒效果好，还可以保证其发芽率基本不受影响。消毒是植物无菌萌发的一个重要环节。因为在自然条件下种子表面附带有较多细菌，为了让种子能够在无菌条件下茁壮的成长，消毒是无菌播种必不可少的环节，对于不同植物，种子具体消毒方式也各不相同，本专利技术的老芒麦种子只能采用高锰酸钾溶液进行消毒，而现有技术中常用的氯化汞溶液、次氯酸钠溶液均不适用于老芒麦种子的无菌萌芽技术，可能是这些消毒剂药效太过猛烈反而会抑制种子的萌发，对种子具有一定的毒副作用，因此本专利技术通过反复筛选发现，高锰酸钾溶液能够保证老芒麦种子稳定的发芽率。另外，本专利技术对高锰酸钾溶液的浓度以及消毒的时间等参数指标进行了进一步优化，高猛酸钾溶液的质量百分比浓度最好控制在0.5-1％，更优的为0.6-0.8％，例如还可以选择为0.55％、0.65％、0.75％以及0.77等。高猛酸钾溶液消毒的时间最好控制在10min以上，更优的为10-20min，例如还可以为11min、12min、13min、14min或者19min等。高猛酸钾溶液的浓度不能过高，消毒的时间也不能过长，因为如果时间过长浓度过大会对种子有毒害作用，影响发芽率，甚至不发芽，时间太短浓度太低又起不到消毒的效果，因此需要控制在适宜的范围内。具体操作时，一般在用高猛酸钾溶液进行表面消毒之前，会采用乙醇溶液先消毒1-2min，因为高锰酸钾溶液杀菌效果较强，直接与种子的表面接触可能对种子表面造成伤害，所以最好先用杀菌效果比较柔和的乙醇溶液消毒，形成天然屏障，削弱高猛酸钾溶液对种子的伤害。乙醇溶液的质量百分比浓度也有具体的要求，最好控制在70-80％，例如还可以为72％、73％、75％以及78％等，还有采用高猛酸钾溶液消毒过后最好采用无菌水反复冲洗4-5次为好，将种子上的消毒液能够彻底冲洗干净。在本专利技术中，消毒步骤之前一般会先将老芒麦种子浸泡一段时间，浸泡会有利于种子的萌发，浸泡的时间最好控制在12-18h之间，浸泡的温度控制在20-30℃，老芒麦种子在前期挑选时应注意选择饱满、大小均一且未受病虫害的种子，以减小种子本身原因影响发芽率的可能性，并且剥掉内外稃进行浸泡。最后，经过浸泡、消毒之后就是与其他植物种子无菌萌发技术比较类似的接种培养以及炼苗的步骤，只是为了使得这两个步骤更加适用于老芒麦的种子，对具体操作步骤进行了优化，接种培养的温度控制在25-28℃的培养箱中进行，时间控制在12-14h，接种培养一般选择在MS培养基上进行，所述MS培养基含琼脂7-8g/L，蔗糖30-40g/L，pH控制在5-6之间。待苗高长到6-8cm再进行移栽炼苗。移栽炼苗的步骤中，温度控制在25-28℃的光照环境条件下进行，时间控制在14-16h，移栽炼苗在1/2MS培养基上培养进行，所述1/2MS培养基含琼脂7-8g/L，蔗糖20-40g/L，pH控制在5-6之间。移栽炼苗时不能直接置于室外的环境，而是先在室内培养一段时间后再移栽至室外，移栽到室外最好选择在5-6月。经过上述操作过程最终可以得到无菌苗，种子发芽率以及幼苗出苗率均能保证在90％以上，比例较高，且消毒彻底，不会被污染。这些效果的取得与专利技术人大量的创造性劳动是密不可分的，因为对于无菌播种操作而言，污染是非常普遍的现象，如何有效的防治污染又不影响发芽率，两者之间的平衡是考察的关键，而种子表面灭菌的关键在于选择合适的消毒剂以及消毒时间。因为消毒剂会杀死微生物，如果选择不够恰当会对种子产生一定的伤害。现有技术中常用的杀毒剂有次氯酸钙、次氯酸钠、过氧化氢、氯化汞等，但这些消毒剂均不适用于老芒麦种子，而且有些消毒剂例如氯化汞不仅杀菌能力强，对植物的伤害也较大，消毒后会残留在种子体内不易去除，故采用本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种老芒麦种子的无菌萌芽方法，其特征在于，包括如下步骤：将老芒麦种子经过无菌水浸泡、高猛酸钾溶液消毒5min以上、接种培养以及移栽炼苗的步骤后，即可。

【技术特征摘要】
1.一种老芒麦种子的无菌萌芽方法，其特征在于，包括如下步
骤：
将老芒麦种子经过无菌水浸泡、高猛酸钾溶液消毒5min以上、
接种培养以及移栽炼苗的步骤后，即可。
2.根据权利要求1所述的一种老芒麦种子的无菌萌芽方法，其
特征在于，挑选饱满、大小均一以及无虫洞的老芒麦种子进行无菌
水浸泡；优选地，在进行无菌水浸泡之前剥掉内外稃。
3.根据权利要求1所述的一种老芒麦种子的无菌萌芽方法，其
特征在于，浸泡的温度控制在20-30℃，浸泡的时间控制在12-18h。
4.根据权利要求1所述的一种老芒麦种子的无菌萌芽方法，其
特征在于，在采用高锰酸钾溶液消毒之前，先用乙醇溶液消毒
1-2min；优选地，用高锰酸钾溶液消毒的时间控制在10min以上。
5.根据权利要求4所述的一种老芒麦种子的无菌萌芽方法，其
特征在于，乙醇溶液的质量百分比浓度控制在70-80％，高锰酸钾溶
液的质量百分比浓度控制在0.5-1％；优选地，高锰酸钾溶液的质量
百分比浓度控制在0.6-...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄帆，李志勇，李鸿雁，刘磊，李俊，
申请(专利权)人：中国农业科学院草原研究所，
类型：发明
国别省市：内蒙古;15