一种肌肽的结晶方法技术

本发明专利技术公开了一种肌肽的结晶方法，涉及化合物的提取技术领域。包括以下步骤：（1）将酶法合成的经过膜系统及电渗析处理提纯后的肌肽料液，进行脱色、减压浓缩，得到浓缩后的肌肽料液；其中，肌肽料液为水溶液；（2）在20‑60℃下，向浓缩后的肌肽料液中边搅拌边滴加乙醇结晶，待出现晶体后，停止滴加乙醇，养晶，养晶结束后，滴加剩余乙醇，滴加完后保温搅拌；（3）过滤，收集晶体；（4）晶体干燥，得到肌肽。此方法收率高、操作简单易于控制，可用于大规模生产。

Crystallization method of Carnosine

The invention discloses a crystallization method for extracting technology of carnosine, related compounds. Includes the following steps: (1) the enzymatic liquid membrane system and carnosine after electrodialysis treatment after purification of synthesis, decolorization, vacuum concentration, liquid after concentration by carnosine; the liquid carnosine aqueous solution; (2) in the 20 60 DEG C to feed liquid concentration of carnosine after stirring while adding ethanol to crystallization, crystal, stop adding ethanol, crystallization, crystallization after adding residual ethanol, dropping after stirring; (3) filtering, collecting crystals; (4) crystal drying, by carnosine. The method has the advantages of high yield, simple operation and easy control, and can be used for mass production.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及化合物的提取

技术介绍
肌肽（L-Carnosine），学名β-丙氨酰-L-组氨酸，是一种由β-丙氨酸和L-组氨酸两种氨基酸组成的二肽，结晶状固体。肌肉和脑部的组织含有很高浓度的肌肽。肌肽是一种跟肉碱一起由俄国化学家古列维奇发现。在英国、韩国、俄国及其他国家均有研究表明：肌肽具有很强的抗氧化能力，对人体有益。肌肽已被证实可清除在氧化应激过程中使细胞膜的脂肪酸过度氧化而形成的活性氧自由基（ROS）以及α-β不饱和醛。肌肽是一种新型食品添加剂和天然的抗氧化剂，肌肽对自由基和金属离子引起得脂质氧化具有显著的抑制作用，在肉品加工中肌肽具有抑制脂肪氧化和保护肉色的作用。肌肽与植酸抗牛肉氧化。日粮中添加0.9g/kg肌肽，可改善肉色和提高骨骼肌的氧化稳定性，并与维生素E具有协同作用。化妆品中的使用，可以防止肌肤的衰老及肌肤增白的作用，肌肽可防止出现因吸烟而产生的游离基，而这种游离基比太阳光更会伤害皮肤，自由基是人体内活性很强的原子或原子团，能够对人体内其它物质进行氧化。本品对浑浊的人眼晶体的透光度得以增强。使用以肌肽为原料的抗氧化制剂可以治疗老年性白内障。同时肌肽还是嗅觉神经的传感物，能促进伤口愈合，特别应用于外科手术治疗的口服药。现有肌肽的提纯方法收率低、操作复杂不易于控制。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一种肌肽的结晶方法，此方法收率高、操作简单易于控制，可用于大规模生产。为解决上述技术问题，本专利技术所采取的技术方案是：一种肌肽的结晶方法，包括以下步骤：（1）将酶法合成的经过膜系统及电渗析处理提纯后的肌肽料液，进行脱色、减压浓缩，得到浓缩后的肌肽料液；其中，肌肽料液为水溶液；（2）在20-60℃下，向浓缩后的肌肽料液中边搅拌边滴加乙醇结晶，待出现晶体后，停止滴加乙醇，养晶，养晶结束后，滴加剩余乙醇，滴加完后保温搅拌；（3）过滤，收集晶体；（4）晶体干燥，得到肌肽。酶法合成肌肽为：用肌肽合成酶直接将β-丙氨酸和L-组氨酸反应合成在一起，转化反应结束，得到含有肌肽的料液，含有肌肽的料液经过离心机分离菌体，经过膜系统分离可见杂质和高分子蛋白杂质，经过电渗析处理分离盐分后，得到的肌肽料液中肌肽含量在45-75g/L，β-丙氨酸≤3g/L，组氨酸≤3g/L，纯度上未知总杂质≤5%，未知最大单个杂质≤2%，再通过本专利技术方法对肌肽进行结晶提纯。优选的，步骤（1）中，脱色为加入活性炭，室温搅拌脱色；活性炭的加入克数是经过膜系统及电渗析处理提纯后的肌肽料液毫升数的2-4%。进一步优选的，步骤（1）中，脱色后，过滤除活性炭，收集滤液过微孔滤膜，微孔滤膜孔径为0.45μm。优选的，步骤（1）中，减压浓缩温度为50-70℃，控制真空度≤-0.095MPa，浓缩后的肌肽料液的毫升数为肌肽料液中底物肌肽克数的3.4-5倍。优选的，步骤（2）中，滴加乙醇的毫升数为肌肽料液中底物肌肽克数的7-10倍。优选的，步骤（2）中，养晶时间为30-60分钟；保温搅拌时间为0.5-2h。优选的，步骤（3）中，过滤，分别收集晶体和滤液，晶体用乙醇淋洗。优选的，步骤（4）中，干燥温度为60-80℃。采用上述技术方案所产生的有益效果在于：本专利技术用乙醇提取结晶肌肽，去除杂质效果好，收率高，收率在85-90%，且操作简单易于控制，可用于大规模生产。具体实施方式下面结合具体实施方式对本专利技术作进一步详细的说明。实施例1取酶法合成的经过膜系统及电渗析处理提纯后的肌肽料液700ml（此肌肽料液中，肌肽含量为50g/L，组氨酸0.51g/L，β-丙氨酸1.2g/L），加活性炭14g，室温搅拌脱色40min，过滤，除碳，滤液过微孔滤膜（微孔滤膜孔径为0.45μm），50-70℃，真空度≤-0.095MPa，减压浓缩至120ml，30℃滴加乙醇，加150ml乙醇后出现白色针状晶体，养晶45min，养晶结束后继续滴加剩余乙醇200ml，保温搅拌30min，过滤，分别收集晶体和滤液，晶体用35ml乙醇淋洗，收集母液和洗液。将湿粉置于干燥箱中80℃干燥10h得肌肽粗粉33.1g，纯度95%，组氨酸≤0.1%、β-丙氨酸≤0.1%，未知单个杂质≤0.2%，收率90%。实施例2取酶法合成的经过膜系统及电渗析处理提纯后的肌肽料液900ml（此肌肽料液中，肌肽含量为50g/L，组氨酸0.37g/L，β-丙氨酸0.78g/L），加活性炭27g，室温搅拌脱色40min，过滤，除碳，滤液过微孔滤膜（微孔滤膜孔径为0.45μm），50-70℃，真空度≤-0.095MPa，减压浓缩至180ml，20℃滴加乙醇，加200ml乙醇后出现白色针状晶体，养晶30min，养晶结束后继续滴加剩余乙醇250ml，保温搅拌1h，过滤，分别收集晶体和滤液，晶体用45ml乙醇淋洗，收集母液和洗液。将湿粉置于干燥箱中80℃干燥10h得肌肽粗粉43.5g，纯度92%，组氨酸≤0.1%、β-丙氨酸≤0.1%，未知单个杂质≤0.2%，收率89%。实施例3取酶法合成的经过膜系统及电渗析处理提纯后的肌肽料液800ml（此肌肽料液中，肌肽含量为50g/L，组氨酸0.51g/L，β-丙氨酸1.2g/L），加活性炭20g，室温搅拌脱色40min，过滤，除碳，滤液过微孔滤膜（微孔滤膜孔径为0.45μm），50-70℃，真空度≤-0.095MPa，减压浓缩至160ml，60℃滴加乙醇，加120ml乙醇后出现白色针状晶体，养晶60min，养晶结束后继续滴加剩余乙醇160ml，保温搅拌2h，过滤，分别收集晶体和滤液，晶体用40ml乙醇淋洗，收集母液和洗液。将湿粉置于干燥箱中60℃干燥10h得肌肽粗粉37.89g，纯度95%，组氨酸≤0.1%、β-丙氨酸≤0.1%，未知单个杂质≤0.2%，收率90%。本专利技术用乙醇提取结晶肌肽，去除杂质效果好，收率高，收率在85-90%，且操作简单易于控制，可用于大规模生产。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种肌肽的结晶方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将酶法合成的经过膜系统及电渗析处理提纯后的肌肽料液，进行脱色、减压浓缩，得到浓缩后的肌肽料液；其中，肌肽料液为水溶液；（2）在20‑60℃下，向浓缩后的肌肽料液中边搅拌边滴加乙醇结晶，待出现晶体后，停止滴加乙醇，养晶，养晶结束后，滴加剩余乙醇，滴加完后保温搅拌；（3）过滤，收集晶体；（4）晶体干燥，得到肌肽。

【技术特征摘要】
1.一种肌肽的结晶方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将酶法合成的经过膜系统及电渗析处理提纯后的肌肽料液，进行脱色、减压浓缩，得到浓缩后的肌肽料液；其中，肌肽料液为水溶液；（2）在20-60℃下，向浓缩后的肌肽料液中边搅拌边滴加乙醇结晶，待出现晶体后，停止滴加乙醇，养晶，养晶结束后，滴加剩余乙醇，滴加完后保温搅拌；（3）过滤，收集晶体；（4）晶体干燥，得到肌肽。2.根据权利要求１所述的一种肌肽的结晶方法，其特征在于：步骤（1）中，脱色为加入活性炭，室温搅拌脱色；活性炭的加入克数是经过膜系统及电渗析处理提纯后的肌肽料液毫升数的2-4%。3.根据权利要求2所述的一种肌肽的结晶方法，其特征在于：步骤（1）中，脱色后，过滤除活性炭，收集滤液过微孔滤膜，微孔滤膜孔...

【专利技术属性】
技术研发人员：李斌水，米造吉，张学义，何连顺，
申请(专利权)人：精晶药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：河北;13