一种杜仲叶提取物及其制备方法和用途技术

本发明专利技术提供了一种预防水产动物肝胆病的杜仲叶提取物及其制备方法，所述杜仲叶提取物中，绿原酸含量不低于3％，杜仲黄酮不低于10％，杜仲多糖不低于15％；本发明专利技术还提供了杜仲叶提取物的用途。杜仲叶提取物为植物提取物，主要成分为绿原酸、杜仲黄酮和多糖，副作用小，可在水产动物上长期使用，可以保肝利胆，抗菌抗病毒，提高机体免疫力和抗氧化能力，促进生长，降低饵料系数，缓解应激反应，特别对于水产动物的肝胆疾病有着独特疗效，因此有着广阔的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及饲料和饲料添加剂
，尤其是涉及一种预防水产动物肝胆病的杜仲叶提取物。
技术介绍
近年来，随着水产养殖集约化程度的不断提高，养殖密度日益增加，出现了以肝胆疾患为主要特征的疾病，即肝胆综合症。养殖密度过大，水体环境恶化、强化投饲、乱用药物、维生素缺乏、饲料酸败变质，以及营养成分的失衡和饲料中含有有毒物质等，都可能对水产动物肝脏造成损害。肝胆综合症以肝胆肿大、变色为典型症状。病鱼发病初期，肝脏略肿大，轻微贫血，色略淡；胆囊色较暗，略显绿色。随着病情发展，肝脏明显肿大，可比正常情况下大1倍以上，肝色逐渐变黄发白，或呈斑块状黄红白色相间，形成明显的“花肝”症状，有的使肝脏局部或大部分变成“绿肝”；有的肝脏轻触易碎，胆囊明显肿大1-2倍(有时导致胆汁溢出或胆囊破裂)，胆汁颜色变深绿或墨绿色，或变黄变白直到无色，重者胆囊充血发红，并使胆汁也成红色。有时，病鱼的脾肾也明显肿大，脏器系统同时膨大。由于主要脏器出现严重病变、受损，机体的抗病能力下降，给其它病菌的侵入以可乘之机，因此该病重症者常同时伴有出血、烂鳃、肠炎、烂尾等症。本病最典型的特征是肝胆肿大和变色。肝胆综合症近年来已普遍流行于全国各地，尤其是鱼苗、鱼种发病率高，危害的对象主要是鲤、鲫、草鱼、团头鲂、青鱼、罗非鱼，也常见于鳖。由于普遍误诊为其它鱼病，用药不对症，死亡率可达50-60％，甚至可达60-90％。
技术实现思路
针对现有技术存在的上述问题，本申请人提供了一种预防水产动物肝胆病的杜仲叶提取物及其制备方法和用途。杜仲叶提取物为植物提取物，绿原酸含量不低于3％，杜仲黄酮不低于10％，杜仲多糖不低于15％。绿原酸能够杀灭体内细菌和病毒，清除体内自由基，提高机体免疫力和保护肝胆健康的作用；杜仲多糖可以作为体内有益菌的食粮，促进有益菌增殖，维护肠道健康；杜仲黄酮具有植物性类雌激素的功效，提高机体的免疫力，降低腹泻率。多种成分综合作用能够提高养殖效益，有效预防病毒类疾病发生，在水产动物上长期使用，可以保肝利胆，抗菌抗病毒，提高机体免疫力和抗氧化能力，促进生长，降低饵料系数，缓解应激反应，特别对于水产动物的肝胆疾病有着独特疗效，因此有着广阔的应用前景。本专利技术的技术方案如下：一种预防水产动物肝胆病的杜仲叶提取物，它是从杜仲叶中提取出来的，所述杜仲叶提取物中，绿原酸含量不低于3％，杜仲黄酮不低于10％，杜仲多糖不低于15％。一种预防水产动物肝胆病的杜仲叶提取物的制备方法，具体步骤如下：取杜仲叶，先用装有酶制剂底物的溶液浸泡，再用乙醇提取1-2次，将提取液或其浓缩液经大孔吸附树脂吸附后，用乙醇梯度洗脱，收集洗脱液，合并，浓缩，喷雾干燥，即得。浸泡所选酶制剂底物的种类为木质素酶和纤维素酶的重量比为1:1的混合物；酶制剂底物与水的质量比例为2％-5％，浸泡时间为1-2小时；温度为50-80℃。提取所用乙醇浓度为30-80wt％，乙醇的用量为14-16倍杜仲叶体积，每次提取1-2小时。采用多步骤洗脱，第一步洗脱所用乙醇浓度为10-80wt％，所用大孔树脂为苯乙烯类大孔树脂，第二步洗脱所用乙醇浓度为10-90wt％，所用大孔树脂为二乙烯苯大孔树脂。所述收集洗脱液，合并以后的浓缩方式为多步骤浓缩，第一步浓缩采用减压浓缩，设备为真空浓缩罐，第二步浓缩采用离心式浓缩，设备为离心式薄膜蒸发器，第三步浓缩采用多效蒸发方式，设备为三效浓缩罐。所述喷雾干燥的条件为进风温度190-195℃，出风温度90-95℃，所用设备为高速离心喷雾干燥机。一种预防水产动物肝胆病的杜仲叶提取物的用途，所述提取物应用于水产动物的肝胆病及肠炎、烂鳃、出血、烂尾、体表粘液增多或减少、溃疡、体表脓肿。所述水产动物包括鱼、虾、蟹类。所述提取物绿原酸的HPLC液相分析方法为：色谱柱：C18柱；4.6×250mm；5um；流动相：甲醇:水:冰乙酸＝20:80:1；检测波长：324nm。所述提取物杜仲黄酮的分析方法为：紫外分光光度法。所述提取物杜仲多糖的分析方法为：紫外分光光度法。本专利技术有益的技术效果在于：杜仲叶提取物为天然植物提取物，提取工艺先进，有效成分含量是普通粉碎散剂的20倍以上。能有效的抗菌抗病毒，提高机体免疫力和抗病力。杜仲叶提取之前先用放有酶制剂底物的溶液浸泡，可加速有效成分的溶解和释放。最后进行喷雾干燥可提高得率。通过对杜仲叶进行浸泡、提取、浓缩、喷雾干燥，能得到具有防治水产动物肝胆疾病作用的提取物。本专利技术提供的液相分析方法可以用于建立该提取物的指纹图谱，用于控制不同产地、批次药材制备的提取物的批次间差异。附图说明图1为绿原酸对照品第1次检测得到的HPLC扫描图谱；图2为绿原酸对照品第2次检测得到的HPLC扫描图谱；图3为杜仲叶提取物第1次检测得到的HPLC扫描图谱；图4为杜仲叶提取物第2次检测得到的HPLC扫描图谱。具体实施方式下面结合附图1～4和实施例及测试例，对本专利技术进行具体描述。实施例1：杜仲叶先用装有木质素酶和纤维素酶(等重量比混合)的溶液(浓度为2％)浸泡2小时，然后用60％乙醇于70℃浸提两次，每次用14倍杜仲叶量体积，每次1小时，依次洗脱，第一步洗脱所用乙醇浓度为10wt％，所用大孔树脂为苯乙烯类大孔树脂，第二步洗脱所用乙醇浓度为30wt％，所用大孔树脂为二乙烯苯大孔树脂。收集洗脱液，合并10％及30％洗脱液，浓缩采用多步骤浓缩，第一步浓缩采用减压浓缩，设备为真空浓缩罐，第二步浓缩采用离心式浓缩，设备为离心式薄膜蒸发器，第三步浓缩采用多效蒸发方式，设备为三效浓缩器，最后喷雾干燥(进风温度192℃，出风温度90℃)。制备所得杜仲叶提取物中，绿原酸含量3.2％，杜仲黄酮含量10.5％，杜仲多糖含量15.4％。提取物绿原酸的HPLC液相分析方法为：色谱柱：C18柱；4.6×250mm；5um；流动相：甲醇:水:冰乙酸＝20:80:1；检测波长：324nm。提取物杜仲黄酮和杜仲多糖的分析方法为：紫外分光光度法。实施例2：杜仲叶先用装有木质素酶和纤维素酶(等重量比混合)的溶液(浓度为3.6％)浸泡1.5小时，然后用50％乙醇于72℃浸提两次，每次用15倍杜仲叶量体积，每次1小时，依次洗脱，第一步洗脱所用乙醇浓度为20wt％，所用大孔树脂为苯乙烯类大孔树脂，第二步洗脱所用乙醇浓度为50wt％，所用大孔树脂为二乙烯苯大孔树脂。收集洗脱液，合并20％及50％洗脱液，浓缩采用多步骤浓缩，第一步浓缩采用减压浓缩，设备为真空浓缩罐，第二步浓缩采用离心式浓缩，设备为离心式薄膜蒸发器，第三步浓缩采用多效蒸发方式，设备为三效浓缩器，最后喷雾干燥(进风温度193℃，出风温度92℃)。制备所得杜仲叶提取物中，绿原酸含量3.6％，杜仲黄酮含量10.7％，杜仲多糖含量15.7％。提取物绿原酸的HPLC液相分析方法为：色谱柱：C18柱；4.6×250mm；5um；流动相：甲醇:水:冰乙酸＝20:80:1；检测波长：324nm。提取物杜仲黄酮和杜仲多糖的分析方法为：紫外分光光度法。实施例3：杜仲叶先用装有木质素酶和纤维素酶(等比混合)的溶液(浓度为5％)浸泡1小时，然后用70％乙醇于75℃浸提两次，每次用16倍杜仲叶量体积，每次1.5小时，依次洗脱，第一步洗脱所用乙醇浓度为30wt％，所用大孔树脂为苯乙烯类本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种预防水产动物肝胆病的杜仲叶提取物，其特征在于：它是从杜仲叶中提取出来的，所述杜仲叶提取物中，绿原酸含量不低于3％，杜仲黄酮不低于10％，杜仲多糖不低于15％。

【技术特征摘要】
1.一种预防水产动物肝胆病的杜仲叶提取物，其特征在于：它是从杜仲叶中提取出来的，所述杜仲叶提取物中，绿原酸含量不低于3％，杜仲黄酮不低于10％，杜仲多糖不低于15％。2.一种预防水产动物肝胆病的杜仲叶提取物的制备方法，其特征在于具体步骤如下：取杜仲叶，先用装有酶制剂底物的溶液浸泡，再用乙醇提取1-2次，将提取液或其浓缩液经大孔吸附树脂吸附后，用乙醇梯度洗脱，收集洗脱液，合并，浓缩，喷雾干燥，即得。3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：浸泡所选酶制剂底物的种类为木质素酶和纤维素酶的重量比为1:1的混合物；酶制剂底物与水的质量比例为2％-5％，浸泡时间为1-2小时。4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：提取所用乙醇浓度为30-80wt％，乙醇的用量为14-16倍杜仲叶体积，每次提取1-2小时。5.根据权利要求2所述的制备方法，其特...

【专利技术属性】
技术研发人员：冯静波，叶峰先，周光玉，
申请(专利权)人：无锡正大生物股份有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32