蓝花侧金盏有效部位及其制备方法和应用技术

蓝花侧金盏有效部位及其制备方法和应用，属于植物提取物技术领域。选自蓝花侧金盏石油醚部位、蓝花侧金盏乙酸乙酯部位、蓝花侧金盏正丁醇部位、蓝花侧金盏水相萃取部位中的一种或两种以上的任意质量比的混合物。将蓝花侧金盏全草粉碎，加入质量百分比浓度65%~95%乙醇溶液回流提取，将所得提取液浓缩、干燥，得浸膏；将浸膏加蒸馏水分散，得浸膏分散液，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇作为溶剂萃取浸膏分散液，挥去溶剂后得蓝花侧金盏石油醚部位、蓝花侧金盏乙酸乙酯部位、蓝花侧金盏正丁醇部位；将萃取后的浸膏分散液浓缩、干燥，得蓝花侧金盏水相萃取部位。本发明专利技术的蓝花侧金盏有效部位在制备抑制HDAC1酶药物方面的应用，能够用于制备抗肿瘤药物。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及蓝花侧金盏有效部位及其制备方法和应用，属于植物提取物

技术介绍
蓝花侧金盏AdoniscoeruleaMaxim属毛茛科侧金盏花属多年生草本植物、高3~15cm，分布于我国西藏、四川、青海和甘肃海拔3350~5200m的高山草地或灌丛,为藏药系统中广泛使用的用于治疗疮疡及牛皮癣的药材[参见：中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志[M].北京科学出版社,1980.]。《藏药志》记载蓝花侧金盏药用全草“苦、寒、外用治疮疡、疖痈、庖疹、疥癣和牛皮癣”[参见：杨永昌,藏药志[M]，青海人民出版社,1991]。蓝花侧金盏AdoniscoeruleaMaxim的相关活性尚处在空白中。蓝花侧金盏AdoniscoeruleaMaxim的化学成分研究从上个世纪九十年代开始，化学成分主要有荭草素、侧金盏醇、异荭草苷、木犀草素、芹菜素和胡萝卜苷等[参见：1、戴源，张蓓蓓，许柚，等.蓝花侧金盏化学成分的研究[J].天然产物研究与开发,2010,22（4）594-596.2、张惠迪，张殊佳，陈耀祖.藏药蓝花侧金盏化学成分的研究[J].兰州大学学报：自然科学版，1991（2）:88-92]等。肿瘤是危害人类健康的重大疾病之一，恶性肿瘤的防治已成为医学界所关注的重要课题。恶性肿瘤就是人们所说的癌症。癌症是危害人类健康的重大疾病之一，恶性癌细胞的防治已成为医学界所关注的重要课题。癌症作为目前人类死亡的首要原因，对其治疗仍局限于癌症疾病的多样性及反复性。然而，尽管不同的癌症的致癌原因可能不尽相同，但其组织观察均表现出相似的细胞周期紊乱以及迅速不可控制的细胞生长及转移。因此，对参与细胞周期调控的一些家族蛋白的研究在推动癌症治疗中成为重要因素。组蛋白去乙酰化酶（HDAC）是一类蛋白酶，对染色体的结构修饰和基因表达调控发挥着重要的作用。一般情况下，组蛋白的乙酰化有利于DNA与组蛋白八聚体的解离，核小体结构松弛，从而使各种转录因子和协同转录因子能与DNA结合位点特异性结合，激活基因的转录。在癌细胞中，HDAC的过度表达导致去乙酰化作用的增强，通过恢复组蛋白正电荷，从而增加DNA与组蛋白之间的引力，使松弛的核小体变得十分紧密，不利于特定基因的表达，包括一些肿瘤抑制基因。组蛋白去乙酰化酶抑制剂（histonedeacetylaseinhibitors，HDACi）则可通过提高染色质特定区域组蛋白乙酰化，从而调控细胞凋亡及分化相关蛋白的表达和稳定性，诱导细胞凋亡及分化，成为一类新的抗肿瘤药物。HDACi不仅对多种血液系统肿瘤和实体瘤具有良好的治疗作用，而且具有肿瘤细胞相对较高选择性和低毒的优点。申请人在研究中发现：目前抗肿瘤药物的原料较少，特别是用于制备抑制HDAC1酶药物的中药原料较为匮乏。现有技术中主要用于治疗疮疡及牛皮癣。目前，尚未见到关于蓝花侧金盏抑制HDAC1酶的活性方面的研究和应用的报道。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是：克服现有技术的不足，提供蓝花侧金盏有效部位及其制备方法和应用，该蓝花侧金盏有效部位能有效抑制HDAC1酶的活性，用于制备抑制HDAC1酶药物，具有较好的抗肿瘤作用。本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案是：该蓝花侧金盏有效部位，其特征在于：选自蓝花侧金盏石油醚部位、蓝花侧金盏乙酸乙酯部位、蓝花侧金盏正丁醇部位、蓝花侧金盏水相萃取部位中的一种或两种以上的任意质量比的混合物。该蓝花侧金盏有效部位，其特征在于：选自蓝花侧金盏乙酸乙酯部位，或者蓝花侧金盏乙酸乙酯部位和蓝花侧金盏水相萃取部位任意质量比的混合物。该蓝花侧金盏有效部位的制备方法，其特征在于，包括下述步骤：将蓝花侧金盏全草粉碎，加入质量百分比浓度65%~95%乙醇溶液提取，将所得提取液浓缩、干燥，得浸膏；将浸膏加蒸馏水分散，得浸膏分散液，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇作为溶剂萃取浸膏分散液，挥去溶剂后得蓝花侧金盏石油醚部位、蓝花侧金盏乙酸乙酯部位和蓝花侧金盏正丁醇部位；将萃取后的浸膏分散液浓缩、干燥，得蓝花侧金盏水相萃取部位。优选的，所述的提取为超声波辅助回流提取，超声波辅助回流提取的具体操作为：将粉碎后的蓝花侧金盏全草加入质量百分比浓度65%~95%乙醇溶液超声波提取0.5~3小时，过滤，滤渣回流提取1~3次，合并提取液，即得。该蓝花侧金盏有效部位的应用，其特征在于：在制备抑制HDAC1酶药物方面的应用。所述抑制HDAC1酶药物是通过蓝花侧金盏石油醚部位、蓝花侧金盏乙酸乙酯部位、蓝花侧金盏正丁醇部位和蓝花侧金盏水相萃取部位中的一种或两种以上的任意质量比的混合物，与药用辅料混合制成的口服制剂或注射制剂。所述的注射制剂为脂质体注射剂、纳米粒注射剂或微球注射剂。所述的口服制剂为散剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂或溶液剂。对于本专利技术的说明如下：现有技术中，蓝花侧金盏常规用途为用于治疗疮疡及牛皮癣，未见其有抗肿瘤功效的相关报道。申请人研究发现：目前抗肿瘤药物的原料较为匮乏，现有技术中蓝花侧金盏中的部分提取物还具有抗肿瘤的作用，但是其功效不明显，不能确定其具体的有效部位。因此通过怎样的溶剂、采用怎样制备方法，才能获得抑制HDAC1酶活性效果最好的有效部位，是必须要解决的问题。申请人通过研究发现：采用本专利技术制备方法，筛选出的蓝花侧金盏石油醚部位、蓝花侧金盏乙酸乙酯部位、和蓝花侧金盏水相萃取部位，其抑制HDAC1酶效果较好。制备方法中，所述的超声波提取为常温下进行。具体的，超声波提取后，过滤获得超声波提取液和滤渣，向滤渣中加质量百分比浓度65%~95%乙醇溶液回流提取1~3次，合并超声波提取和回流提取所得提取液。回流提取1~3次是指：向回流加热装置中加入粉碎后的药材和乙醇溶液，加热、回流提取，放冷过滤得一次提取液和药渣；向药渣中加入乙醇溶液，加热、进行第二次回流提取，放冷过滤得二次提取液和药渣；合并多次提取液，即得回流提取的提取液。优选的，每次回流提取0.5~2小时；每次回流提取时所加乙醇溶液没过药材表面1cm~2cm。回流提取的温度为乙醇回流提取的常规温度，需高于乙醇的沸点，优选为80℃~100℃。制备方法中，浸膏为粗提取物，采用不同的溶剂萃取浸膏分散液，指的是依次将石油醚加入浸膏分散液萃取分离获得石油醚萃取液、将乙酸乙酯加入浸膏分散液萃取分离获得乙酸乙酯萃取液、将正丁醇加入浸膏分散液萃取分离获得正丁醇萃取液；取石油醚萃取液、乙酸乙酯萃取液和正丁醇萃取液分别挥发去除溶剂后，即对应得到蓝花侧金盏石油醚部位、蓝花侧金盏乙酸乙酯部位和蓝花侧金盏正丁醇部位；将萃取后剩余的浸膏分散液（溶剂为水），挥发去除溶剂即得蓝花侧金盏水相萃取部位。溶剂的部位指的是该溶剂的萃取物，水相萃取部位也可以称作水相萃取物，水相萃取部位易溶于水；而相对的，石油醚、乙酸乙酯和正丁醇为有机相，石油醚部位、乙酸乙酯部位和正丁醇部位对应易溶于石油醚、乙酸乙酯和正丁醇。其中，蓝花侧金盏石油醚部位主要含有脂肪酸类；蓝花侧金盏乙酸乙酯部位主要含有黄酮类；蓝花侧金盏正丁醇部位主要含有苷类；蓝花侧金盏水相萃取部位主要含有多糖和有机酸类化合物。挥去溶剂即挥发去除溶剂。挥去溶剂可以采用常压加热使溶剂（即石油醚、乙酸乙酯和正丁醇）挥发。优选的，挥去溶剂采用减压浓缩，该方法效率高，并且能避免热敏性成分因高本文档来自技高网...

【技术保护点】
蓝花侧金盏有效部位，其特征在于：选自蓝花侧金盏石油醚部位、蓝花侧金盏乙酸乙酯部位、蓝花侧金盏正丁醇部位、蓝花侧金盏水相萃取部位中的一种或两种以上的任意质量比的混合物。

【技术特征摘要】
1.蓝花侧金盏有效部位，其特征在于：选自蓝花侧金盏石油醚部位、蓝花侧金盏乙酸乙酯部位、蓝花侧金盏正丁醇部位、蓝花侧金盏水相萃取部位中的一种或两种以上的任意质量比的混合物。2.根据权利要求1所述的蓝花侧金盏有效部位，其特征在于：选自蓝花侧金盏乙酸乙酯部位，或者蓝花侧金盏乙酸乙酯部位和蓝花侧金盏水相萃取部位任意质量比的混合物。3.权利要求1所述的蓝花侧金盏有效部位的制备方法，其特征在于，包括下述步骤：将蓝花侧金盏全草粉碎，加入质量百分比浓度65%~95%乙醇溶液提取，将所得提取液浓缩、干燥，得浸膏；将浸膏加蒸馏水分散，得浸膏分散液，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇作为溶剂萃取浸膏分散液，挥去溶剂后得蓝花侧金盏石油醚部位、蓝花侧金盏乙酸乙酯部位和蓝花侧金盏正丁醇部位；将萃取后的浸膏分散液浓缩、干燥，得蓝花侧金盏水相萃取部位。4.权利要求3所述的蓝花侧金盏有效部位的制备方法，其特征在于：所...

【专利技术属性】
技术研发人员：芦永昌，吴疆，林鹏程，钱帅，白雪，李海丽，郑虹，朱奎德，曾擎屹，
申请(专利权)人：青海民族大学，
类型：发明
国别省市：青海;63