BCR-复合体-特异性抗体和其使用方法技术

本发明专利技术涉及特异性结合BCR复合体的嵌合抗体和人源化抗体，并且尤其是BCR复合体的嵌合抗体和人源化抗体。本发明专利技术还涉及抗体和包含它们的组合物用于下列疾病的诊断、预后和治疗的方法：例如，癌症、自身免疫疾病、炎性疾患和传染病。

【技术实现步骤摘要】
本申请是PCT申请号为PCT/US2009/038171，专利技术名称为“BCR-复合体-特异性抗体和其使用方法”的PCT申请进入中国国家阶段后申请号为200980119622.3的中国国家阶段申请的分案申请。相关申请的交叉引用本申请要求2008年4月2日提交的美国专利申请系列第61/041,659号(待决)的优先权，通过引用将其整体并入本文。序列表的引用：根据37C.F.R.1.821以及其下列，本申请包含一个或多个序列表，它们已在纸件和计算机可读介质中公开，并且所述纸件和计算机可读公开内容通过引用整体并入本文。专利技术背景专利
本专利技术涉及特异性结合BCR复合体的嵌合抗体和人源化抗体，并且尤其是BCR复合体的嵌合抗体和人源化抗体。本专利技术还涉及抗体和包含它们的组合物用于下列疾病的诊断、预后和治疗的方法：例如，癌症、自身免疫疾病、炎性疾患和传染病。相关技术说明B细胞受体(BCR)&BCR复合体B细胞是负责产生抗体的免疫系统细胞。B细胞对抗原的反应是正常免疫系统的基本组成。B细胞拥有特化的细胞表面受体(B细胞受体；“BCR”)。如果B细胞遇到能够结合该细胞的BCR的抗原，则B细胞将被刺激而增殖并产生对所结合的抗原特异性的抗体。为了产生对抗原的有效反应，还需要BCR相关蛋白和T辅助细胞。抗原/BCR复合体是内化的，并且抗原被蛋白水解加工。一小部分的抗原保持与B细胞表面上的主要组织相容性复合体-II(“MHCII”)分子复合，这时复合体可以被T细胞识别。被这种抗原呈递激活的T细胞分泌诱导B细胞成熟的多种淋巴因子。通过BCR进行的信号传导在产生抗体、自身免疫性和免疫耐受的建立中起重要的作用(Gauld等人(2002)Science296(5573):1641-1642)。仍在骨髓中的结合自身抗原的未成熟的B细胞被凋亡清除。相反，结合在成熟B细胞上的抗原导致激活、增殖、无反应性和凋亡。观察到的具体功能反应取决于B细胞是否接收到通过其它表面受体的共刺激信号和激活的特定信号转导途径。BCR由膜免疫球蛋白与非共价缔合的CD79的α和β亚基(分别为“CD79a”和“CD79b”)一起形成BCR复合体而构成。CD79a和CD79b是信号转导亚基，它们含有信号转导所需的保守的基于免疫受体酪氨酸的激活基序(“ITAM”)(Dylke等人(2007)Immunol.Lett.112(1):47-57；Cambier(1995)Immunol.Today16:110)。多价抗原引起的BCR复合体聚集启动CD79a和CD79bITAM的转磷酸作用以及受体相关激酶的激活(DeFranco(1997)Curr.Opin.Immunol.9:296-308；Kurosaki(1997)Curr.Opin.Immunol.9:309-318；Kim等人(1993)Immun.Rev.132:125-146)。磷酸化的ITAM募集其他的效应子，例如PI3K、PLC-γ和Ras/MAPK途径的成员。这些信号传导事件负责B细胞增殖和激活标记物(例如MHCII和CD86)的表达增加，这些是初免B细胞以便它们随后与T-辅助(“Th”)细胞相互作用所需的。CD79表达限制在B细胞中并且在非霍奇金淋巴瘤细胞(NHL)中表达(Olejniczak等人(2006)Immunol.Invest.35:93-114；D’Arena等人(2000)Am.J.Hematol.64:275-281；Cabezudo等人(1999)Haematologica84:413-18)。CD79a和CD79b以及可溶性免疫球蛋白(“sIg”)全部都是CD79的表面表达所需要的。NHL上的CD79b的平均表面表达与在正常B细胞上所观察到的类似，但是具有更大的范围(Matsuuchi等人(2001)Curr.Opin.Immunol.13(3):270-277)。慢性淋巴细胞性白血病细胞中的CD79b表达与免疫球蛋白重链基因中的突变相关，但是似乎不充当临床严重程度的独立预测(Cajiao等人(2007)AmJ.Hematol.82(8):712-720)。CD79a和CD79b均参与非抗原依赖性(强直的(tonic))和抗原依赖性的BCR信号传导(Fuentes-Pananá等人(2006)J.Immunol.177(11):7913-7922)。已显示结合BCR复合体的抗体(“抗-BCR复合体抗体”)通过引起BCR解离或通过阻抑(下调)BCR功能而破坏BCR信号传导(参见，例如美国专利第6,503,509号；Polson等人(2007)Blood110(2):616-623；Zhang等人(1995)Ther.Immunol.2(4):191-202)。阻抑一般是更可取的，因为它避免了可能不期望的B细胞损耗和所引起的副作用。这种抗-BCR复合体抗体在自身免疫疾病、癌症、炎性疾病和移植的治疗中具有治疗用途。然而，由于人免疫系统攻击抗-BCR复合体鼠抗体，因此其使用引发减少的人抗-小鼠抗体(“HAMA”)反应的改进的抗体是期望的。同样，表现出改善的结合亲和力或改变的效应子功能的抗-BCR复合体抗体是期望的。Fc受体抗体-抗原复合体与免疫系统的细胞的相互作用导致了广泛的一系列的反应，其范围从效应子功能如抗体依赖性细胞毒性、肥大细胞脱颗粒和吞噬作用到免疫调节信号，如调节淋巴细胞增殖和抗体分泌。所有这些相互作用均是通过抗体或免疫复合体的Fc结构域与Fc受体的结合启动的，Fc受体是造血细胞上的特化的细胞表面受体。由抗体和免疫复合体所触发的细胞反应的多样性是由Fc受体的结构不均一性产生的。Fc受体共同拥有结构上相关的配体结合结构域，该结构域大概介导细胞内信号传导。免疫球蛋白基因超家族的蛋白成员Fc受体是可以结合免疫球蛋白分子的Fc部分的表面糖蛋白。该家族的每个成员通过Fc受体的α链上的识别结构域识别一种或多种同种型的免疫球蛋白。Fc受体是由他们对免疫球蛋白亚型的特异性定义的。IgG的Fc受体称为“FcγR”，IgE的Fc受体称为“FεR”并且IgA的Fc受体称为“FcαR”。不同的佐细胞拥有不同同种型抗体的Fc受体，并且抗体的同种型决定了哪些佐细胞将参与给定的反应(Billadeau等人(2002)J.Clin.Investigat.2(109):161-81；Gerber等人(2001)MicrobesInfection3:131-139；Ravetch等人(2001)Annu.Rev.Immunol.19:275-90；Ravetch等人(2000)Science290:84-89；Ravetch(1994)Cell78(4):553-560；Ravetch等人(1991)Annu.Rev.Immunol.9:457-492；还参见，Immunobiology:TheImmuneSysteminHealthandDisease(免疫生物学：健康与疾病中的免疫系统)(第4版，1999年),ElsevierScienceLtd/GarlandPublishing,NewYork)。各种受体的总括呈现在表1中。每个Fcγ受体(“FcγR”)是整合膜糖蛋白，具有与C2本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种多肽，所述多肽结合人B‑细胞受体(BCR)复合体，其中所述多肽包含：(I)免疫球蛋白轻链可变区(VL)的氨基酸序列，所述免疫球蛋白轻链可变区(VL)是天然BCR复合体抗体的轻链可变区的(BCC VL)人源化变体，其中所述免疫球蛋白轻链可变区(VL)的所述氨基酸序列选自SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:18和SEQ ID NO:20；和(II)免疫球蛋白重链可变区(VH)的氨基酸序列，所述免疫球蛋白重链可变区(VH)是天然BCR复合体抗体的重链可变区(BCC VH)的人源化变体，其中所述免疫球蛋白重链可变区(VH)的所述氨基酸序列选自SEQ ID NO:24、SEQ ID NO:32和SEQ ID NO:34。

【技术特征摘要】
2008.04.02 US 61/041,6591.一种多肽，所述多肽结合人B-细胞受体(BCR)复合体，其中所述多肽包含：(I)免疫球蛋白轻链可变区(VL)的氨基酸序列，所述免疫球蛋白轻链可变区(VL)是天然BCR复合体抗体的轻链可变区的(BCCVL)人源化变体，其中所述免疫球蛋白轻链可变区(VL)的所述氨基酸序列选自SEQIDNO:12、SEQIDNO:18和SEQIDNO:20；和(II)免疫球蛋白重链可变区(VH)的氨基酸序列，所述免疫球蛋白重链可变区(VH)是天然BCR复合体抗体的重链可变区(BCCVH)的人源化变体，其中所述免疫球蛋白重链可变区(VH)的所述氨基酸序列选自SEQIDNO:24、SEQIDNO:32和SEQIDNO:34。2.如权利要求1所述的多肽，其中所述免疫球蛋白轻链可变区(VL)的所述氨基酸序列是SEQIDNO:12。3.如权利要求1所述的多肽，其中所述免疫球蛋白轻链可变区(VL)的所述氨基酸序列是SEQIDNO:18。4.如权利要求1所述的多肽，其中所述免疫球蛋白轻链可变区(VL)的所述氨基酸序列是SEQIDNO:20。5.如权利要求1-4任一项所述的多肽，其中所述免疫球蛋白重链可变区(VH)的所述氨基酸序列是SEQIDNO:24。6.如权利要求1-4任一项所述的多肽，其中所述免疫球蛋白重链可变区(VH)的所述氨基酸序列是SEQIDNO:32。7.如权利要求1-4任一项所述的多肽，其中所述免疫球蛋白重链可变区(VH)的所述氨基酸序列是SEQIDNO:34。8.如权利要求1-4任一项所述的多肽，其中所述多肽包含变体Fc结构域，所述变体Fc结构域在所述Fc结构域中包含相对于野生型Fc结构域的至少一个修饰。9.如权利要求8所述的多肽，其中所述修饰包含：(A)至少一个取代，所述一个取代选自F243L、D270E、R292P、S298N、Y300L、V305I、A330V和P396L；(B)至少两个取代，所...

【专利技术属性】
技术研发人员：莱斯利·S·约翰逊，菱·黄，
申请(专利权)人：宏观基因有限公司，
类型：发明
国别省市：美国;US