SNHG10在制备前列腺癌诊断制剂中的应用制造技术

本发明专利技术公开了SNHG10在制备前列腺癌诊断制剂中的应用。本发明专利技术公开了一种前列腺癌的诊断制剂，所述诊断制剂包括用荧光定量PCR方法或基因芯片检测SNHG10的表达水平。本发明专利技术还公开了一种诊断前列腺癌的试剂盒，所述试剂盒能够通过检测生物学样品中的如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列的表达水平来诊断前列腺癌。本发明专利技术公开了一种与前列腺癌相关的SNHG10，并进一步证实该SNHG10在前列腺癌中表达下调。利用SNHG10检测前列腺癌不仅能够快速有效的做到早期检测，而且为基因治疗、药物治疗等临床应用提供了治疗靶点和重要依据。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物医药领域，具体涉及人SNHG10在制备前列腺癌诊断制剂中的应用。
技术介绍
前列腺癌是常见的男性生殖系统恶性肿瘤之一。世界范围内，前列腺癌发病率在男性所有恶性肿瘤中位居第二，在美国前列腺癌的发病率已经超过肺癌，成为第一位危害男性健康的肿瘤。亚洲前列腺癌的发病率远远低于欧美国家，但近年来呈现上升趋势，且增长比欧美发达国家更加迅速。前列腺癌患者主要是老年男性，一般在50岁以后发病，95％发生于60岁以上的老年男性，发生率持续地随着年龄增长而增加。前列腺癌早期多无任何症状，即使有所不适，也不足以引起病人的重视，当肿瘤增大压迫尿道时，又往往与前列腺增生相混淆。在我国约80％的病人首先发现远处转移病灶才发现前列腺癌。此时，病变已达晚期，预后不良。前列腺癌的临床诊断方式目前主要有血清前列腺特异性抗原(PSA)检测、直肠指检、直肠超声波检测、活组织病理检查等。PSA(ProstateSpecificAntigen)为前列腺组织特异性抗原，由前列腺的解剖结构可知PSA通过前列腺导管进入血液和尿液中，一些病例或生理情况下PSA会进入血液中去，如前列腺炎症、尿潴留、前列腺感染、前列腺增生和前列腺癌等，因此通过检测血清PSA水平来预测前列腺癌具有一定的假阳性率。从1991年开始，检测血清中PSA含量用于预测前列腺癌，含量高于4ng/mL认为是前列腺癌阳性，灵敏度79％，特异性20％-59％，平均灵敏度约33％，在浓度4-10ng/mL灰区部分，特异性是最低的，这时往往需要通过侵入性的穿刺活检进行确定，给患者带来极大痛苦及精神和经济负担。所以PSA并不能较好的作为诊断前列腺癌的标志物。直肠指检是最简单、最经济实用的方法，主要通过医生的食指触摸前列腺，用以发现很多无症状的前列腺癌患者，有可能获得早期诊断及根治的机会。但以上的方法都存在局限性。例如直肠指检的局限性主要在4个方面：(1)患者前列腺肿块不大时，易漏诊；(2)部分患者前列腺癌肿大不明显，但已属于晚期，不易根治；(3)患者直肠有疾患时不能使用此检测；(4)医生经验不足时可能有漏诊或者误诊的可能。SNHG10(smallnucleolarRNAhostgene10，核仁小RNA宿主基因10)，位于14号染色体上。SNHG10基因编码一段长度为1.9kblncRNA，并在正常组织中普遍表达。lncRNA在肿瘤的发生发展中起着抑制或促进肿瘤的作用，在调控肿瘤细胞增殖、凋亡、细胞周期、侵袭转移能力等方面越来越受到重视。已有文献报道，SNHG10在肝癌组织和癌旁组织中存在表达差异，SNHG10在肝癌组织中表达上调。目前，对于中晚期前列腺癌患者，手术治疗的效果差，大多数采用药物治疗。根据不同的病情可以采用化学药物治疗、外放射治疗、放射性核素内放射治疗以及各种疗法的综合应用等。然而，放化疗药物不仅作用于肿瘤，还可以作用于肿瘤周围健康的组织，因而在杀伤肿瘤的同时，也给机体带来了很大的副作用，最终影响对肿瘤的治疗效果。
技术实现思路
为了实现前列腺癌的早期发现，早期干预，本专利技术的目的在于提供一种新的前列腺癌相关lncRNA。本专利技术的目的还在于提供前列腺癌相关lncRNA在制备前列腺癌诊断制剂中的应用。为实现上述目的，本专利技术首先提供SNHG10在制备前列腺癌诊断制剂中的应用。优选地，所述SNHG10包括如SEQIDNO:1所示的核苷酸序列。优选地，所述SNHG10在前列腺癌组织中表达下调。进一步地，本专利技术提供了一种前列腺癌的诊断制剂，所述诊断制剂包括用荧光定量PCR方法或基因芯片检测SNHG10的表达水平。优选地，所述的荧光定量PCR方法至少包括一对特异扩增SNHG10的引物；所述基因芯片方法至少包括一条与SNHG10杂交的核酸探针。优选地，所述的引物包括上游引物和下游引物，上游引物为SEQIDNO:2，下游引物为SEQIDNO:3。优选地，所述基因芯片包括固相载体以及固定在所述固相载体上的寡核苷酸探针，所述寡核苷酸探针包括特异性地对应于上面所述的SNHG10核苷酸的部分或全部序列。进一步地，本专利技术提供一种诊断前列腺癌的试剂盒，所述试剂盒能够通过检测生物学样品中的如SEQIDNO:1所示的核苷酸序列的表达水平来诊断前列腺癌。优选地，所述试剂盒为基因检测试剂盒；优选地，所述基因检测试剂盒包括用于检测SEQIDNO:1所示的核苷酸序列的引物或探针；包括10×Buffer、dNTP、MgCl2、Taq酶、逆转录酶和RNA酶抑制剂；还包括人正常的前列腺组织或细胞的总RNA或DNA。进一步地，本专利技术提供一种治疗前列腺癌的制剂，所述制剂中含有促进SNHG10表达的试剂。优选地，所述促进SNHG10表达的试剂为促进基因转录的试剂。优选地，所述制剂能抑制前列腺癌细胞增殖和迁移。优选地，所述制剂用构建过表达载体的方法促进SNHG10的表达。本专利技术的有益效果如下：本专利技术公开了一种与前列腺癌相关的SNHG10，并进一步证实该SNHG10在前列腺癌组织中表达下调。利用SNHG10检测前列腺癌不仅能够快速有效的做到早期检测，而且为基因治疗、药物治疗等临床应用提供了治疗靶点和重要依据。附图说明图1为前列腺癌组织及癌旁组织SNHG10表达情况。具体实施方式以下实施例用于说明本专利技术，但不用来限制本专利技术的范围。若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段，所用的试剂可以商业购买得到。实施例中未注明具体条件的实验方法，通常为本领域常规方法，如按照常规条件如Sambrook等人，分子克隆，实验手册(第三版)(科学出版社，2002)中的所述条件，或按照试剂制造厂家所建议的条件。本专利技术的专利技术人对前列腺癌组织样本及癌旁组织样本进行高通量测序，通过生物信息学方法进行基因筛选，挑选出候选lncRNASNHG10，现有研究中并没有SNHG10和前列腺癌相关的报道，进一步，专利技术人进行了分子生物学方法验证，证实了SNHG10在前列腺癌细胞中表达下调。本专利技术的SNHG10是在本专利技术之前的已知lncRNA，其基本信息如下：Genbank登录号：NCBI参考序列:NR_003138.3，来源于人类基因组。本专利技术还采用RT-PCR方法和基因芯片方法检测上述lncRNA在前列腺癌组织和癌旁正常组织的表达，并验证了该lncRNA在前列腺癌中表达下调。本文使用的术语“表达下调”指对应于所表达基因的序列，其中序列量的测量证明，与从正常个体或从通过前列腺癌分期确定与前列腺癌不同的已鉴定疾病状态的个体中分离的生物学样品中的同一基因相比，所述基因在从患前列腺癌或通过前列腺癌分期确定的前列腺癌已鉴定疾病状态的个体中分离的生物学样品中的表达水平降低。根据本专利技术，“表达下调”是指通过本专利技术方法杂交强度测量的至少1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％或更多的表达降低，例如20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或更低。实施例1高通量测序筛选差异表达基因1、取样取2012年10月到2015年12月期间在北京协和医院泌尿外科手术中获得组织标本27例，所有标本均经病理学检查证实，其中癌旁组织样本8例、前列腺癌标本19例，编号后置-80℃低温冰箱保存。2、对组织样本进行总RNA提取采本文档来自技高网...

【技术保护点】
SNHG10在制备前列腺癌诊断制剂中的应用。

【技术特征摘要】
1.SNHG10在制备前列腺癌诊断制剂中的应用。2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述SNHG10包括如SEQIDNO:1所示的特异性核苷酸序列。3.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述SNHG10在前列腺癌组织中表达下调。4.一种前列腺癌的诊断制剂，其特征在于，所述诊断制剂包括用荧光定量PCR方法或基因芯片检测SNHG10的表达水平。5.如权利要求4所述的诊断制剂，其特征在于，所述的荧光定量PCR方法至少包括一对特异扩增SNHG10的引物；所述基因芯片方法至少包括一...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘昊，
申请(专利权)人：北京致成生物医学科技有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11