本发明专利技术涉及家禽育种领域，涉及一种利用IGF‑IR基因培育边鸡快长系的方法。本发明专利技术公开了IGF‑IR基因在边鸡快长系的分子标记辅助育种中的应用，还提供了利用IGF‑IR基因培育边鸡快长系的方法。该方法是提取待测样本鸡的基因组DNA为模板，经序列如SEQ ID NO:1‑2所示的特异性引物进行扩增，产物用AluI酶切，酶切产物用非变性聚丙烯酰胺凝胶检测，硝酸银染色后得到DNA的RFLP图谱，根据图谱中的带型筛选基因型为GG的个体。本发明专利技术的方法简单快捷，且不受外界环境影响。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及家禽育种领域，具体涉及一种利用IGF-IR基因培育边鸡快长系的方法。
技术介绍
随着我国经济的发展，人民生活水平的不断提高，优质鸡逐步成为城乡人民消费的主流肉食品之一。高生长速度，优良的肉质性状一直是肉用动物长期以来的育种目标。运用候选基因法，鉴定分离出与生长性状遗传变异相关的分子标记，有利于对家禽经济性状的有效选择。胰岛素样生长因子(IGFs)能够促进细胞生长发育，以及促进细胞分化、增殖，同时参与脂肪、糖以及蛋白质代谢，在鸡等禽类中，胰岛素样生长因子1受体(IGF-IR)作为IGFs唯一受体，对IGFs发挥功能非常重要，是影响鸡生长和体组成性状的重要候选基因。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一种利用IGF-IR基因培育边鸡快长系的方法，该方法利用IGF-IR基因的突变对边鸡的各周龄体重进行标记辅助选择，不受环境影响。本专利技术公开了IGF-IR基因在边鸡快长系的分子标记辅助育种中的应用。本专利技术还公开了利用IGF-IR基因培育边鸡快长系的方法。基于上述应用，利用IGF-IR基因培育边鸡快长系的方法：提取待测样本鸡的基因组DNA，经序列如SEQIDNO:1-2所示的特异性引物扩增得到155bp长度的片段，目的片段经RFLP分析，用非变性聚丙烯酰胺凝胶检测，硝酸银染色后得到DNA的RFLP图谱，根据图谱中的带型筛选基因型为GG的个体，也就是酶切后仅含有90bp和65bp两个片段的个体。本专利技术的原理是：针对IGF-IR基因设计1对引物(IGF-IR2-2)，引物IGF-IR2-2扩增产物存在3种基因型，生长性状统计分析结果表明GG基因型个体在8、14、16、18周龄体重显著高于GA型个体(P<0.05)。根据RFLP分型结果，挑选出GG型个体，GG纯合型能够在后代中加以固定，可以作为培育边鸡快长系的方法，该方法简单快捷，且不受外界环境影响。附图说明图1是引物IGF-IR2-2PCR产物AluI酶切结果。具体实施方式实施例1.1实验动物本实验以山西省农科院畜牧兽医研究所饲养的115只边鸡母鸡作为采样群体，记录其初出重、6、8、10、12、14、16、18周龄体重；翅静脉采集血样1.5ml，肝素钠抗凝，置冰盒带回实验室，-20℃保存。常规苯酚-氯仿法抽提基因组DNA，对基因组DNA进行OD值测定，并计算其浓度后备用。1.2引物设计与PCR扩增运用Primer5.0软件，根据GenBank中鸡IGF-IR基因序列(GenBank登录号为NM_205032)针对IGF-IR基因外显子2的AluI位点设计1对引物，扩增产物大小为155bp。引物序列如下。IGF-IR2-2：F：5′-AACGCCTGGAGAACTGTACG-3′(SEQIDNO：1)R:5′-ATCGCTGAGGCTTTCCAAG-3′(SEQIDNO：2)PCR扩增反应总体积为20μL，其中包括:10×Buffer2.0μL，dNTPs(10mmol/L)0.8μL，DNA模板1μL，MgCl2(25mmol/L)2.2μL，上下游引物(均为10μmol/L)各1μL，Tap酶(5U/μL)0.2μL，ddH2O11.8μL。反应条件为94℃预变性6min；31个循环(94℃变性30s，56℃退火30s，72℃延伸35s；最后72℃延伸性10min，4℃保存产物。PCR产物用10％非变性聚丙烯酰胺凝胶检测，结果良好。1.3PCR-RFLP检测PCR产物用AluI酶切，以检测多态性。酶切反应总体积为20μL，超纯水16.5μL，AluI酶(10u/μL)0.5μL，10×buffer2μL，37℃酶切2h，酶切产物用交联度为(Acr:Bis)29:1的非变性聚丙烯酰胺凝胶检测，200V电泳5h，硝酸银染色，显示三种基因型(图1)，GG型含有90bp和65bp二个片段，GA型同时含有155bp、90bp和65bp三个片段，AA型仅含有155bp的片段。1.4IGF-IR基因不同基因型与边鸡生长性状的关联分析配合下列模型进行最小二乘方差分析，比较边鸡生长性状在IGF-IR不同基因型之间的差异：Yij＝μ+Gi+eij其中Yij为性状记录值，μ为群体均值，Gi为基因型效应，eij为随机残差效应，应用SPSS11.0的广义线形模型(GLM)过程完成。IGF-IR基因不同基因型与边鸡生长性状的关联分析结果见表1。表1AluI位点与边鸡生长性状的关联分析注:同行数据肩标不同小写字母表示差异显著(P<0.05)由表1可以看出8、14、16、18周龄时，GG基因型个体的体重显著高于GA型(P<0.05)。纯合基因型能够在后代中加以固定，所以根据IGF-IR基因的RFLP分型结果筛选出GG基因型的个体可作为培育边鸡快长系的方法。本文档来自技高网...
【技术保护点】
IGF‑IR基因在边鸡快长系的分子标记辅助育种中的应用。
【技术特征摘要】
1.IGF-IR基因在边鸡快长系的分子标记辅助育种中的应用。2.一种利用IGF-IR基因培育边鸡快长系的方法，其特征在于，提取待测样本鸡的基因组DNA为模板，经序列如SEQIDNO:1-2所示的特异性引物...
【专利技术属性】
技术研发人员：张跟喜，吴鹏飞，张涛，丁馥香，戴国俊，张丽，李培峰，谢恺舟，王金玉，
申请(专利权)人：扬州大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。