一种平滑山楂的组培方法技术

技术编号:14423735 阅读:80 留言:0更新日期:2017-01-13 02:17
本发明专利技术提供一种平滑山楂的组培方法,包括以下步骤:切取平滑山楂植株个体的半木质化茎芽进行预处理,然后接种到诱导培养基上,获得无菌芽苗;将获得的无菌芽苗切割成带顶芽的茎段,接种到增殖培养基上,获得丛生芽苗;挑选健壮的丛生芽苗,以单个芽苗为单位进行切离,将切离后的单个芽苗切割,然后将茎段接种到生根培养基上,获得再生植株;将株高达4cm、根系发达、叶片展开的再生植株在培养室内敞口炼苗3d,然后洗净根系附着的培养基,再移植到栽培基质中并浇透水,用塑料薄膜覆盖容器口培养至长出的新叶完全展开后,去掉覆盖的塑料薄膜,获得平滑山楂苗木。本发明专利技术平滑山楂的组培方法简单、科学,具有简便高效、成本低、苗产量高的优点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及组培技术,尤其涉及一种平滑山楂的组培方法
技术介绍
平滑山楂(绿山楂冬王)Crataegusviridis′WinterKing′山楂属落叶小乔木,树高4.5一6米,冠宽3.5一6米。圆形树冠,单叶互生,卵形或倒卵形,3一5裂,叶缘具锯齿。花白色,果红色,果可保留到第二年春季。生长慢,喜光,适宜湿润、肥沃土壤,适应性强,易栽培,耐修剪。原产于北美东部。我国可在北至黑龙江及内蒙古南部,南至湖南、安徽、江苏北部区域内生长。该品种以其夺目鲜红、挂果持久的山楂果而著名,树龄可达100年之久,花、果具观赏价值,适合庭园栽种,既可作庭园景观树,又可作绿篱等。由于利用种子进行播种繁殖存在一些局限性,嫁接繁育技术目前在我国成活率较低,因此加强其无性繁殖的研究,建立无性繁殖技术体系,提高我国绿山楂冬王苗木的生产能力,能为其广泛应用于城市园林中提供技术保障。目前我国对于平滑山楂组培的研究尚无。
技术实现思路
本专利技术的目的在于,针对上述问题,提出一种平滑山楂的组培方法,该方法简便高效,成本低,诱导率高,增殖系数高。为实现上述目的,本专利技术采用的技术方案是:一种平滑山楂的组培方法,包括以下步骤:步骤一、切取平滑山楂植株个体的半木质化茎芽进行预处理,然后接种到含0.01~0.1mg/L细胞分裂素、0.01~0.1mg/L生长素、20~40g/L蔗糖和5~7g/L琼脂的诱导培养基上,在温度为20~30℃、湿度为40%~80%、光照强度为20~100μmol·m-2·s-1、每天光照12~24h、20~30天获得无菌芽苗;步骤二、将获得的无菌芽苗切割成1.5~5.0cm的带顶芽的茎段,接种到含0.1~1mg/L细胞分裂素、0.01~0.1mg/L生长素、20~40g/L蔗糖和5~7g/L琼脂的增殖培养基上,在温度为20~30℃、湿度为40%~80%、光照强度为20~100μmol·m-2·s-1、每天光照12~24h、每10~30天更换新鲜培养基的条件下培养1~3个月,获得丛生芽苗;步骤三、挑选健壮的丛生芽苗,以单个芽苗为单位进行切离,将切离后的单个芽苗切割成长度为2.0~3.0cm的带顶芽的茎段,然后将茎段接种到含有0.1~0.5mg/L生长素(两种生长素,浓度均为0.1-0.5mg/L)、20~40g/L蔗糖和5~7g/L琼脂的生根培养基上,在温度为20~30℃、湿度为40%~80%、光照强度为20~100μmol·m-2·s-1、每天光照12~24h条件下培养10~30天,获得再生植株;步骤四、将株高达4cm、根系发达、叶片展开的再生植株在培养室内敞口炼苗3d,然后洗净根系附着的培养基,再移植到栽培基质中并浇透水,在温度为20~30℃、湿度为60%~80%、光照强度为40~100μmol·m-2·s-1、每天光照12~18h的条件下用塑料薄膜覆盖容器口培养至长出的新叶完全展开后,去掉覆盖的塑料薄膜,获得平滑山楂苗木,即完成平滑山楂的微繁方法。进一步地,步骤一所述预处理包括以下步骤:(大连地区)5-6月份,晴天上午,选生长健壮、树形优美、无病虫害的优良母本,采集一年生枝条,剪成长1.5-2.5cm的带腋芽茎段,用中性洗涤剂漂洗后,流水冲洗2h以上,后置于工作台备用;在超净工作台上,先用70%乙醇处理10-30s,后用0.1%升汞处理1-5min,然后用无菌水漂洗5次。进一步地,步骤一、切取平滑山楂植株个体的半木质化茎芽进行预处理,然后接种到含0.01-0.04mg/L细胞分裂素、0.02-0.05mg/L生长素、25~35g/L蔗糖和5~7g/L琼脂的诱导培养基上,在温度为20~25℃、湿度为50%~80%、光照强度为50~100μmol·m-2·s-1、每天光照12~24h、20~30天获得无菌芽苗。进一步地,其中步骤一中诱导培养基为MS培养基、1/2MS培养基、DKW培养基、WPM培养基或QL培养基,pH值为5~6,细胞分裂素为苄基腺嘌呤、玉米素、激动素或氯吡苯脲,生长素为萘乙酸或吲哚丁酸。进一步地,步骤二、将获得的无菌芽苗切割成1.5~5.0cm的带顶芽的茎段,接种到含0.8-1.0mg/L细胞分裂素、0.02~0.05mg/L生长素、20~40g/L蔗糖和5~7g/L琼脂的增殖培养基上,在温度为20~30℃、湿度为60%~80%、光照强度为40~80μmol·m-2·s-1、每天光照12~20h、每10~30天更换新鲜培养基的条件下培养1~3个月,获得丛生芽苗。进一步地,步骤二中增殖培养基为MS培养基、DKW培养基、WPM培养基或QL培养基,pH值为5~6,细胞分裂素为苄基腺嘌呤、玉米素、激动素或氯吡苯脲,生长素为萘乙酸和/或吲哚丁酸。进一步地,步骤三、挑选健壮的丛生芽苗,以单个芽苗为单位进行切离,将切离后的单个芽苗切割成长度为2.0~3.0cm的带顶芽的茎段,然后将茎段接种到含有0.3-0.5mg/L(两种生长素、浓度均为0.3-0.5mg/L)生长素、20~35g/L蔗糖和5~7g/L琼脂的生根培养基上,在温度为20~30℃、湿度为40%~60%、光照强度为50~100μmol·m-2·s-1、每天光照12~20h条件下培养10~30天,获得再生植株。进一步地,步骤三中生根培养基为生长素为1/2MS培养基或1/3MS培养基,pH值为5~6,生长素为吲哚乙酸和/或吲哚丁酸。进一步地,步骤四、将株高达4cm、根系发达、叶片展开的再生植株在培养室内敞口炼苗3d,然后洗净根系附着的培养基,再移植到栽培基质中并浇透水,在温度为20~30℃、湿度为70%~80%、光照强度为60~100μmol·m-2·s-1、每天光照12~15h的条件下用塑料薄膜覆盖容器口培养至长出的新叶完全展开后,去掉覆盖的塑料薄膜,获得平滑山楂苗木,即完成平滑山楂的微繁方法。进一步地,步骤四中所述栽培基质包含体积比如下的各组分:草炭土3份,珍珠岩1-3份。优选为草炭土3份,珍珠岩2份。本专利技术平滑山楂的组培方法步骤科学、合理,与现有技术相比较具有以下优点:1、预处理简便,污染率低,无菌材料的保存率高,可达80%。2、初代培养基的诱导率高,可达80%以上。3、增殖培养基的增殖速度快、苗生长整齐一致、增殖系数高,可达7.0具体实施方式以下结合实施例对本专利技术进一步说明:实施例1本实施例公开了一种平滑山楂的组培方法,包括以下步骤:步骤一、切取平滑山楂植株个体的半木质化茎芽进行预处理,然后接种到含0.05mg/L细胞分裂素、0.05mg/L生长素、30g/L蔗糖和6g/L琼脂的诱导培养基上,在温度为25℃、湿度为60%、光照强度为70μmol·m-2·s-1、每天光照20h、20~30天获得无菌芽苗;步骤二、将获得的无菌芽苗切割成1.5~5.0cm的带顶芽的茎段,接种到含0.05mg/L细胞分裂素、0.05mg/L生长素、30g/L蔗糖和6g/L琼脂的增殖培养基上,在温度为30℃、湿度为60%、光照强度为60μmol·m-2·s-1、每天光照20h、每20天更换新鲜培养基的条件下培养2个月,获得丛生芽苗;步骤三、挑选健壮的丛生芽苗,以单个芽苗为单位进行切离,将切离后的单个本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种平滑山楂的组培方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤一、切取平滑山楂植株个体的半木质化茎芽进行预处理,然后接种到含0.01~0.1mg/L细胞分裂素、0.01~0.1mg/L生长素、20~40g/L蔗糖和5~7g/L琼脂的诱导培养基上,在温度为20~30℃、湿度为40%~80%、光照强度为20~100μmol·m‑2·s‑1、每天光照12~24h、20~30天获得无菌芽苗;步骤二、将获得的无菌芽苗切割成1.5~5.0cm的带顶芽的茎段,接种到含0.1~1mg/L细胞分裂素、0.01~0.1mg/L生长素、20~40g/L蔗糖和5~7g/L琼脂的增殖培养基上,在温度为20~30℃、湿度为40%~80%、光照强度为20~100μmol·m‑2·s‑1、每天光照12~24h、每10~30天更换新鲜培养基的条件下培养1~3个月,获得丛生芽苗;步骤三、挑选健壮的丛生芽苗,以单个芽苗为单位进行切离,将切离后的单个芽苗切割成长度为2.0~3.0cm的带顶芽的茎段,然后将茎段接种到含有0.1~0.5mg/L生长素、20~40g/L蔗糖和5~7g/L琼脂的生根培养基上,在温度为20~30℃、湿度为40%~80%、光照强度为20~100μmol·m‑2·s‑1、每天光照12~24h条件下培养10~30天,获得再生植株;步骤四、将株高达4cm、根系发达、叶片展开的再生植株在培养室内敞口炼苗3d,然后洗净根系附着的培养基,再移植到栽培基质中并浇透水,在温度为20~30℃、湿度为60%~80%、光照强度为40~100μmol·m‑2·s‑1、每天光照12~18h的条件下用塑料薄膜覆盖容器口培养至长出的新叶完全展开后,去掉覆盖的塑料薄膜,获得平滑山楂苗木。...

【技术特征摘要】
1.一种平滑山楂的组培方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤一、切取平滑山楂植株个体的半木质化茎芽进行预处理,然后接种到含0.01~0.1mg/L细胞分裂素、0.01~0.1mg/L生长素、20~40g/L蔗糖和5~7g/L琼脂的诱导培养基上,在温度为20~30℃、湿度为40%~80%、光照强度为20~100μmol·m-2·s-1、每天光照12~24h、20~30天获得无菌芽苗;步骤二、将获得的无菌芽苗切割成1.5~5.0cm的带顶芽的茎段,接种到含0.1~1mg/L细胞分裂素、0.01~0.1mg/L生长素、20~40g/L蔗糖和5~7g/L琼脂的增殖培养基上,在温度为20~30℃、湿度为40%~80%、光照强度为20~100μmol·m-2·s-1、每天光照12~24h、每10~30天更换新鲜培养基的条件下培养1~3个月,获得丛生芽苗;步骤三、挑选健壮的丛生芽苗,以单个芽苗为单位进行切离,将切离后的单个芽苗切割成长度为2.0~3.0cm的带顶芽的茎段,然后将茎段接种到含有0.1~0.5mg/L生长素、20~40g/L蔗糖和5~7g/L琼脂的生根培养基上,在温度为20~30℃、湿度为40%~80%、光照强度为20~100μmol·m-2·s-1、每天光照12~24h条件下培养10~30天,获得再生植株;步骤四、将株高达4cm、根系发达、叶片展开的再生植株在培养室内敞口炼苗3d,然后洗净根系附着的培养基,再移植到栽培基质中并浇透水,在温度为20~30℃、湿度为60%~80%、光照强度为40~100μmol·m-2·s-1、每天光照12~18h的条件下用塑料薄膜覆盖容器口培养至长出的新叶完全展开后,去掉覆盖的塑料薄膜,获得平滑山楂苗木。2.根据权利要求1所述平滑山楂的组培方法,其特征在于,步骤一所述预处理包括以下步骤:5-6月份,晴天上午,选生长健壮、树形优美、无病虫害的优良母本,采集一年生枝条,剪成长1.5-2.5cm的带腋芽茎段,用中性洗涤剂漂洗后,流水冲洗2h以上,后置于工作台备用;在超净工作台上,先用70%乙醇处理10-30s,后用0.1%升汞处理1-5min,然后用无菌水漂洗5次。3.根据权利要求1所述平滑山楂的组培方法,其特征在于,步骤一、切取平滑山楂植株个体的半木质化茎芽进行预处理,然后接种到含0.01-0.04mg/L细胞分裂素、0.02-0.05mg/L生长素、25~35g/L蔗糖和5~7g/L琼脂的诱导培养基上,在温度为20~25℃、湿度为...

【专利技术属性】
技术研发人员:马丽源
申请(专利权)人:盛世绿源科技有限公司
类型:发明
国别省市:辽宁;21

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