本发明专利技术公开了一种荷载肿瘤靶向磁性纳米药物的纤维素膜的构建方法，包括如下步骤：S1.通过化学修饰的方式使叶酸具有光活性，将光活性叶酸固定于磁性水凝胶上，再将血卟啉单甲醚与肿瘤治疗药物吸附于所述磁性水凝胶中，制备得到肿瘤靶向纳米药物；S2.通过培养木醋杆菌，静态发酵产生纤维素膜，并在避光条件下，将步骤S1制备的肿瘤靶向纳米药物溶液没过纤维素膜，摇床处理后进行真空冷冻干燥。制备得到荷载肿瘤靶向磁性纳米药物的纤维素膜具有高效靶向抑制乳腺癌细胞生长的效果。同时，可大大降低常规光敏剂药物使用剂量，而且体外透皮给药具有更好的抑瘤效果，实现乳腺癌治疗过程中的可控缓释给药，大幅度降低了对正常组织的毒副作用。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药
更具体地，涉及一种荷载乳腺癌靶向磁性纳米药物的纤维素膜的构建方法及其应用。
技术介绍
乳腺癌是全球范围内女性最常见的恶性肿瘤之一，近几年逐渐跃居女性恶性肿瘤的首位。据有关统计，我国许多大城市的乳腺癌发病率正在以快速增长的趋势逐年上升，年平均增长速度远高于世界平均增长速度。同时，我国乳腺癌的死亡率也呈缓慢的上升趋势，而且乳腺癌的发病年龄出现了年轻化的倾向，其发病的中位年龄是48岁，比西方国家提早了10年，对女性的身心健康构成了严重威胁。目前乳腺癌的治疗是以手术为主，配合术后放化疗、内分泌治疗及靶向治疗等的综合疗法，虽然治法已经比较完善，但仍有许多患者会发生复发、转移，而且放、化疗的不良反应及药物的耐药也成为许多患者治疗上的障碍。纳米生物技术作为纳米技术与生物技术相结合的产物，在疾病的诊断及治疗方面具有十分广阔的应用前景，应用纳米材料作为药物载体早已成为纳米医学研究领域的前沿方向。国内外更是开展了很多用靶向纳米药物抑制各类癌细胞生长的研究。近年来由于乳腺癌发病率的持续高升，针对乳腺癌靶向治疗的研究方兴未艾，出现了抗体介导的靶向、微载体介导的靶向、乳腺癌干细胞靶向等研究领域，为乳腺癌的治疗研究奠定了理论基础。近几十年研究发现，纳米技术联合药物对退行性疾病，如肿瘤、糖尿病和心血管疾病等的预防以及治疗有着不容忽视的作用。
技术实现思路
本专利技术的目的是克服现有恶性肿瘤尤其是乳腺癌的治疗药物的缺陷和不足，提供一种荷载肿瘤靶向磁性纳米药物的纤维素膜的构建方法。本专利技术另一目的是提供所述荷载肿瘤靶向磁性纳米药物的纤维素膜的应用。本专利技术上述目的通过以下技术方案实现：一种荷载肿瘤靶向磁性纳米药物的纤维素膜的构建方法，包括如下步骤：S1.肿瘤靶向纳米药物(MHNP/HMME/DOX/FA)的制备通过化学修饰的方式使叶酸(FA)具有光活性，将光活性叶酸固定于磁性水凝胶(MHNP)上，再将血卟啉单甲醚(HMME)与肿瘤治疗药物吸附于所述磁性水凝胶中；S2.荷载肿瘤靶向磁性纳米药物的纤维素膜(BC/MHNP/HMME/DOX/FA)的制备通过培养木醋杆菌，静态发酵产生纤维素膜，并在避光条件下，将步骤S1制备的肿瘤靶向纳米药物溶液没过纤维素膜，60～80rpm/min处理8～20h后取出进行真空冷冻干燥。其中，优选地，步骤S1所述肿瘤治疗药物为阿霉素(DOX)。优选地，步骤S1所述光活性叶酸(AzPhFA)的制备方法为：在带盖的深色容器中，将叶酸加入含N-琥珀酰亚胺酯的二甲基甲酰胺DMF/PBS溶液中，在冰浴、避光的条件下搅拌反应40～50h；将混合溶液透析得到光活性叶酸，冷冻干燥。优选地，得到的光活性叶酸在使用前，加入50ml的PBS溶液溶解，并调整至所需浓度1ng/μl。在光活性叶酸(AzPhFA)的制备过程中，优选地，所述叶酸和含N-琥珀酰亚胺酯的二甲基甲酰胺DMF/PBS溶液的质量体积比为1～5μg：1ml。更优选地，所述叶酸和含N-琥珀酰亚胺酯的二甲基甲酰胺DMF/PBS溶液的质量体积比为2μg：1ml。优选地，所述含N-琥珀酰亚胺酯的二甲基甲酰胺DMF/PBS溶液中，N-琥珀酰亚胺酯的浓度为25～35μg/ml。更优选地，所述含N-琥珀酰亚胺酯的二甲基甲酰胺DMF/PBS溶液中，N-琥珀酰亚胺酯的浓度为30.72μg/ml。优选地，所述含N-琥珀酰亚胺酯的二甲基甲酰胺DMF/PBS溶液中，二甲基甲酰胺DMF和PBS的体积比为2～5：1。更优选地，所述含N-琥珀酰亚胺酯的二甲基甲酰胺DMF/PBS溶液中，二甲基甲酰胺DMF和PBS的体积比为4：1。优选地，所述含N-琥珀酰亚胺酯的二甲基甲酰胺DMF/PBS溶液的pH＝7～8。更优选地，所述含N-琥珀酰亚胺酯的二甲基甲酰胺DMF/PBS溶液的pH＝7.4。优选地，所述冰浴是4℃冰浴。优选地，所述搅拌反应的时间为48h。优选地，所述透析是使用透析袋(MWCO:Nominal:500)进行透析三天。另外，优选地，步骤S1所述磁性水凝胶(MHNP)的制备方法为：(1)制备光活性水凝胶(AzPhNIPA-AA)：将水凝胶溶于PBS缓冲液中得到水凝胶溶液，然后将水凝胶溶液加入到含有叠氮苯胺盐酸盐的二甲基甲酰胺DMF/PBS溶液中，在冰浴条件下搅拌反应40～50h；将混合溶液透析纯化得到叠氮苯基衍生物，真空冷冻干燥；使用前，向其中加入PBS溶液溶解，配制成一定浓度溶液待用。(2)制备磁性水凝胶(MHNP)：通过光化学固定法—液态光接枝法将水凝胶接枝到纳米粒表面；具体是：避光条件下，将光活性水凝胶溶于PBS缓冲溶液中，加入油酸改性后的四氧化三铁纳米粒(Fe3O4-OA)，混合均匀，并超声分散清洗后，振荡条件下于120～130W紫外灯下8～12cm处照射15～25min后，真空冻干。在磁性水凝胶(MHNP)的制备过程中，优选地，步骤(1)所述水凝胶和PBS缓冲液的质量体积比为0.01g：5～15ml。更优选地，步骤(1)所述水凝胶和PBS缓冲液的质量体积比为0.01g：10ml。优选地，步骤(1)所述PBS缓冲液的pH＝7～8。更优选地，步骤(1)所述PBS缓冲液的pH＝7.4。优选地，步骤(1)所述水凝胶溶液和含有叠氮苯胺盐酸盐的二甲基甲酰胺DMF/PBS溶液的体积比为1：3～5。更优选地，步骤(1)所述水凝胶溶液和含有叠氮苯胺盐酸盐的二甲基甲酰胺DMF/PBS溶液的体积比为1：4。优选地，步骤(1)所述含有叠氮苯胺盐酸盐的二甲基甲酰胺DMF/PBS溶液中，叠氮苯胺盐酸盐的浓度为1～2mg/ml。更优选地，步骤(1)所述含有叠氮苯胺盐酸盐的二甲基甲酰胺DMF/PBS溶液中，叠氮苯胺盐酸盐的浓度为1.5mg/ml。优选地，步骤(1)所述含有叠氮苯胺盐酸盐的二甲基甲酰胺DMF/PBS溶液中，二甲基甲酰胺DMF和PBS的体积比为3～5：1。优选地，步骤(1)所述含有叠氮苯胺盐酸盐的二甲基甲酰胺DMF/PBS溶液中，二甲基甲酰胺DMF和PBS的体积比为4：1。优选地，步骤(1)所述含有叠氮苯胺盐酸盐的二甲基甲酰胺DMF/PBS溶液的pH＝7～8。优选地，步骤(1)所述含有叠氮苯胺盐酸盐的二甲基甲酰胺DMF/PBS溶液的pH＝7.4。优选地，步骤(1)所述冰浴条件下搅拌反应的时间为48h。优选地，步骤(1)所述透析使用透析袋(MWCO:Nominal:500)透析三天。优选地，步骤(2)所述光活性水凝胶和PBS缓冲溶液的质量体积比为8～12μg/ml。更优选地，步骤(2)所述光活性水凝胶和PBS缓冲溶液的质量体积比为10μg/ml。优选地，步骤(2)所述油酸改性后的四氧化三铁纳米粒(Fe3O4-OA)和光活性水凝胶的PBS溶液的质量体积比为1：8～12。更优选地，步骤(2)所述油酸改性后的四氧化三铁纳米粒(Fe3O4-OA)和光活性水凝胶的PBS溶液的质量体积比为1：10。优选地，步骤(2)所述油酸改性后的四氧化三铁纳米粒(Fe3O4-OA)的制备方法为：化学共沉淀法制备四氧化三铁纳米粒，通过自组装的形式将油酸包裹在纳米粒表面，合成Fe3O4-OA。优选地，步骤(2)所述超声分散清洗的时间为30～本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种荷载肿瘤靶向磁性纳米药物的纤维素膜的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：S1.制备肿瘤靶向纳米药物通过化学修饰的方式使叶酸具有光活性，将光活性叶酸固定于磁性水凝胶上，再将血卟啉单甲醚与肿瘤治疗药物吸附于所述磁性水凝胶中；S2.制备荷载肿瘤靶向磁性纳米药物的纤维素膜通过培养木醋杆菌，静态发酵产生纤维素膜，并在避光条件下，将步骤S1制备的肿瘤靶向纳米药物溶液没过纤维素膜，60～80 rpm/min处理8～20h后取出进行真空冷冻干燥。
【技术特征摘要】
1.一种荷载肿瘤靶向磁性纳米药物的纤维素膜的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：S1.制备肿瘤靶向纳米药物通过化学修饰的方式使叶酸具有光活性，将光活性叶酸固定于磁性水凝胶上，再将血卟啉单甲醚与肿瘤治疗药物吸附于所述磁性水凝胶中；S2.制备荷载肿瘤靶向磁性纳米药物的纤维素膜通过培养木醋杆菌，静态发酵产生纤维素膜，并在避光条件下，将步骤S1制备的肿瘤靶向纳米药物溶液没过纤维素膜，60～80rpm/min处理8～20h后取出进行真空冷冻干燥。2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，步骤S1所述肿瘤治疗药物为阿霉素。3.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，步骤S1所述光活性叶酸的制备方法为：在带盖的深色容器中，将叶酸加入含N-琥珀酰亚胺酯的二甲基甲酰胺DMF/PBS溶液中，在冰浴、避光的条件下搅拌反应40～50h；将混合溶液透析得到光活性叶酸，冷冻干燥。4.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，步骤S1所述磁性水凝胶的制备方法为：（1）制备光活性水凝胶：将水凝胶溶于PBS缓冲液中得到水凝胶溶液，然后将水凝胶溶液加入到含有叠氮苯胺盐酸盐的二甲基甲酰胺DMF/PBS溶液中，在冰浴条件下搅拌反应40～50h；将混合溶液透析纯化得到叠氮苯基衍生物，真空冷冻干燥；（2）制备磁性水凝胶：避光条件下，将光活性水凝胶溶于PBS缓冲溶液中，加入油酸改性后的四氧化三铁纳米粒，混合均匀，并超声分散清洗后，振荡条件下于120～130W...
【专利技术属性】
技术研发人员：关燕清，张令坤，
申请(专利权)人：华南师范大学，
类型：发明
国别省市：广东;44
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