3，4-二羟基-F(PAK)-RGD-AA，其合成，活性及应用制造技术

本发明专利技术公开下式的多巴-肽3，4-二羟基-Phe(Pro-Ala-Lys)-Arg-Gly-Asp-AA，公开了它们的制备方法，公开了它们的抗血栓活性，公开了它们的溶血栓活性以及公开了它们治疗脑缺血大鼠的作用，因而本发明专利技术公开了它们在制备抗血栓药物，溶血栓药物以及治疗缺血性中风药物中的应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及3，4-二羟基-Phe(Pro-Ala-Lys)-Arg-Gly-Asp-AA，涉及它们的制备方法，涉及它们的抗血栓活性，涉及它们的溶血栓活性以及涉及它们治疗脑缺血大鼠的作用，因而本专利技术涉及它们在制备抗血栓药物，溶血栓药物以及治疗缺血性中风药物中的应用。本专利技术属于生物医药领域。
技术介绍
缺血性中风是一类较常见且危害严重的脑血管疾病，特点是发病率高、病死率高、致残率高和复发率高。目前临床治疗缺血性中风面临没有有效药物的现实，尤其中风面4h以上的患者非死即残。专利技术对中风面4h以上的患者有效的药物是临床的重要需求。专利技术人曾经公开式II的咪唑啉化合物在中风面24h的大鼠缺血性中风模型上，显示优秀疗效。即连续静脉注射6天式II的咪唑啉化合物，每天1次，首次剂量为5μmol/kg，后5次的剂量为2μmol/kg具有优秀疗效。式中aa1和aa2可为同时存在，aa1存在但aa2不存在，或同时不存在；当aa1和aa2同时存在时，aa1为R(Arg)，且aa2为G(Gly)，A(Ala)或Q(Gln)；当aa1存在但aa2不存在时，aa1为R(Arg)；aa3可为S(Ser)，V(Val)或F(Phe)。由于式II的咪唑啉化合物的2-位是4-氧乙酰-Lys。而该Lys的侧链氨基和主链羧基分别与RGD抗血栓四肽及ARPAK溶栓肽相连接，所以结构比较复杂需要简化。专利技术人经过3年实验研究，发现用3，4-二羟基-Phe残基代替上式中的1-取代苯基咪唑啉基可以获得结构简单和疗效好的双重意想不到的技术效果。按照这个发现，专利技术人提出了本专利技术。专利
技术实现思路
1.本专利技术的内容之一是提供下式的3，4-二羟-Phe(Pro-Ala-Lys)-Arg-Gly-Asp-AA(当AA＝Val时Arg-Gly-Asp-AA为Arg-Gly-Asp-Val；当AA＝Phe时Arg-Gly-Asp-AA为Arg-Gly-Asp-Phe；当AA＝Ser时Arg-Gly-Asp-AA为Arg-Gly-Asp-Ser)2.本专利技术的内容之二是提供3，4-二羟-Phe(Pro-Ala-Lys)-Arg-Gly-Asp-AA(当AA＝Val时Arg-Gly-Asp-AA为Arg-Gly-Asp-Val；当AA＝Phe时Arg-Gly-Asp-AA为Arg-Gly-Asp-Phe；当AA＝Ser时Arg-Gly-Asp-AA为Arg-Gly-Asp-Ser)的制备方法，该方法以下方法构成。(1)制备(S)-3，4-二羟基-Phe-OBzl；(2)制备Boc-Pro-Ala-Lys(Boc)；(3)制备(S)-3，4-二羟基-Phe[Boc-Pro-Ala-Lys(Boc)]-OBzl；(4)制备(S)-3，4-二羟基-Phe[Boc-Pro-Ala-Lys(Boc)]；(5)制备Ia：(5a)制备Boc-Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Val-OBzl；(5b)制备Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Val-OBzl；(5c)制备(S)-3，4-二羟基-Phe[Boc-Pro-Ala-Lys(Boc)]-Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Val-OBzl；(5d)制备(S)-3，4-二羟基-Phe(Pro-Ala-Lys)-Arg-Gly-Asp-Val；(6)制备Ib：(6a)制备Boc-Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl；(6b)制备Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl；(6c)制备(S)-3，4-二羟基-Phe[Boc-Pro-Ala-Lys(Boc)]-Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl；(6d)制备(S)-3，4-二羟基-Phe(Pro-Ala-Lys)-Arg-Gly-Asp-Phe；(7)制备Ic：(7a)制备Boc-Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Ser-OBzl；(7b)制备Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Ser-OBzl；(7c)制备(S)-3，4-二羟基-Phe[Boc-Pro-Ala-Lys(Boc)]-Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzl)-Ser-OBzl；(7d)制备(S)-3，4-二羟基-Phe(Pro-Ala-Lys)-Arg-Gly-Asp-Ser。4.本专利技术的内容之三是评价3，4-二羟基-Phe(Pro-Ala-Lys)-Arg-Gly-Asp-AA(当AA＝Val时Arg-Gly-Asp-AA为Arg-Gly-Asp-Val；当AA＝Phe时Arg-Gly-Asp-AA为Arg-Gly-Asp-Phe；当AA＝Ser时Arg-Gly-Asp-AA为Arg-Gly-Asp-Ser)的抗血栓活性。5.本专利技术的内容之四是评价3，4-二羟基-Phe(Pro-Ala-Lys)-Arg-Gly-Asp-AA(当AA＝Val时Arg-Gly-Asp-AA为Arg-Gly-Asp-Val；当AA＝Phe时Arg-Gly-Asp-AA为Arg-Gly-Asp-Phe；当AA＝Ser时Arg-Gly-Asp-AA为Arg-Gly-Asp-Ser)的溶血栓活性。6.本专利技术的内容之五是评价3，4-二羟基-Phe(Pro-Ala-Lys)-Arg-Gly-Asp-AA(当AA＝Val时Arg-Gly-Asp-AA为Arg-Gly-Asp-Val；当AA＝Phe时Arg-Gly-Asp-AA为Arg-Gly-Asp-Phe；当AA＝Ser时Arg-Gly-Asp-AA为Arg-Gly-Asp-Ser在脑缺血24h后治疗脑缺血的活性。附图说明图1是3，4-二羟基-Phe(Pro-Ala-Lys)-Arg-Gly-Asp-AA(当AA＝Val时Arg-Gly-Asp-AA为Arg-Gly-Asp-Val；当AA＝Phe时Arg-Gly-Asp-AA为Arg-Gly-Asp-Phe；当AA＝Ser时Arg-Gly-Asp-AA为Arg-Gly-Asp-Ser)的合成路线，(i)Cyclohexane，benzylalcohol，Tosh；(ii)HATu，HOBt，THF，NMM；(iii)DCC，HOSu，THF；(iv)DCC，HOBt，THF，NMM；(v)Pd/C，methanol；(vi)4N氯化氢-乙酸乙酯溶液；(vii)TFA，TFMSA。具体实施方式为了进一步阐述本专利技术，下面给出一系列实施例。这些实施例完全是例证性的，它们仅用来对本专利技术进行具体描述，不应当理解为对本专利技术的限制。实施例1制备(S)-3，4-二羟基-Phe-OBzl向100mL茄瓶中分别加入1g(5.08mmol)(S)-3，4-二羟基-Phe、1.02g对甲苯磺酸、8mL苯甲醇、8mL正己烷，瓶口加上分水器及其冷凝管，油浴90～95℃加热反应，搅拌36h，使变澄清。待反应混合液冷却至室温，倒入大量乙醚，析出大量白色固体，静置充分析出后，过滤，用乙醚磨洗上层固体，干燥后得1.08g(77％)标题化合物，为黄色粉末。ESI-MS(m/z)：288[M+H]+。实施例2制备Boc-Pro-Ala将1.07本文档来自技高网...

【技术保护点】
下式的Nα‑Pro‑Ala‑Lys‑3，4‑二羟基‑Phe‑Arg‑Gly‑Asp‑AA，当AA＝Val时Arg‑Gly‑Asp‑AA为Arg‑Gly‑Asp‑Val；当AA＝Phe时Arg‑Gly‑Asp‑AA为Arg‑Gly‑Asp‑Phe；当AA＝Ser时Arg‑Gly‑Asp‑AA为Arg‑Gly‑Asp‑Ser

【技术特征摘要】
1.下式的Nα-Pro-Ala-Lys-3，4-二羟基-Phe-Arg-Gly-Asp-AA，当AA＝Val时Arg-Gly-Asp-AA为Arg-Gly-Asp-Val；当AA＝Phe时Arg-Gly-Asp-AA为Arg-Gly-Asp-Phe；当AA＝Ser时Arg-Gly-Asp-AA为Arg-Gly-Asp-Ser2.权利要求1的Nα-Pro-Ala-Lys-3，4-二羟基-Phe-Arg-Gly-Asp-AA的制备方法，该方法由以下方法构成：(1)制备S-3，4-二羟基-Phe-OBzl；(2)制备Boc-Pro-Ala-Lys-Nω-Boc；(3)制备Nα-Boc-Pro-Ala-Lys-Nω-Boc-3，4-二羟基-Phe-OBzl；(4)制备Nα-Boc-Pro-Ala-Lys-Nω-Boc-3，4-二羟基-Phe；(5)制备Ia：(5a)制备Boc-NG-NO2-Arg-Gly-β-羧基-Asp-OBzl-Val-OBzl；(5b)制备NG-NO2-Arg-Gly-β-羧基-Asp-OBzl-Val-OBzl；(5c)Nα-Boc-Pro-Ala-Lys-Nω-Boc-3，4-二羟基-Phe-NG-NO2-Arg-Gly-β-羧基-OBzl-Asp-Val-OBzl；(5d)制备Nα-Boc-Pro-Ala-Lys-Nω-Boc-3，4-二羟基-Phe-Arg-Gly-Asp-Val；(6)制备Ib：(6a)制备Boc-NG-N...

【专利技术属性】
技术研发人员：彭师奇，赵明，王玉记，吴建辉，王夏，
申请(专利权)人：首都医科大学，
类型：发明
国别省市：北京;11